各种因素对消毒剂杀菌作用影响的测定

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1、各种因素对消毒剂杀菌作用影响的测定2.1.1.12.1目的了解有机物、温度和pH对消毒剂杀菌作用的影响规律，为制定消毒剂的实用剂量提供参考。2.1.1.12.2试验器材（1）菌片与菌悬液（按2.1.1.2要求和方法制备）。（2）恒温水浴箱。（3）冷水浴装置（可放入试管架的容器，以冰水调节水温）（4）温度计。（5）pH计。（6）有机物，根据消毒剂的使用对象选择，如酵母粉、血清、蛋白月东。（7）中和剂（经中和剂试验鉴定合格）。（8）盐酸（用无菌蒸憾水配制）。（9）氢氧化钠（用无菌蒸憾水配制）。2.1.1.12.3试验微生物的选择

2、根据所测消毒剂鉴定需要决定。一般情况下，除需用于特定微生物者外，对细菌繁殖体应选择大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，作为革兰阳性与阴性细菌的代表即可；用作灭菌剂，可使用枯草杆菌黑色变种芽砲。2.1.1.12.4消毒液浓度和作用时间的设定各种因素影响的测定，均用杀灭相应微生物试验所得最低有效浓度,和3个〜4个作用时间进行杀灭试验。在3个〜4个作用时间中，以该最低有效浓度所需的最短有效时间为第1时间(T),其后的第2时间为第1时间的一倍(2T)o依此，第3时间为3T,第4时间为4T。试验结果应根据需要测出杀灭对数值达5.00(消毒用)的

3、最低有效剂量。必要时，可根据需要调整消毒剂浓度或作用时间，若第1时间较长(>30min),可根据情况适当缩短作用时间的组距。对第1吋间较短者(<5min),可根据情况适当延长作用吋间的组距。2.1.1.12.5有机物对杀灭微生物效果影响的测定(1)如以小牛血清为有机物代表，应设置无小牛血清对照组；含25%小牛血清组；含50%小牛血清组等3组。各组所用消毒液浓度和作用时间，见2.1.1.12.4o(2)以稀释液配制的微生物悬液与无菌小牛血清，按1：1与3：1比例混合，分别配成含50%与25%小牛血清的微生物悬液。此含小牛血清的

4、微生物悬液，可用于悬液定量杀菌试验，亦可滴染菌片进行载体定量试验。(3)试验中根据需要，选择悬液定量杀灭试验或载体浸泡定量杀灭试验之一进行测定即可。具体试验程序根据微生物种类可参见2.1.1.7o(4)其它有机物按此设计类推。各组试验应重复3次，按相应微生物杀灭试验计算杀灭对数值。2.1.1.12.6温度对杀灭微生物效果影响的测定(1)设置io°c±rc>2o°c±i°c、3o°c±rc等，以io°c为间隔。各组所用消毒液浓度和作用时间，见2.1.1.12.4O（2）对要求试验温度高于室温者，用恒温水浴箱（电热）调节；低于室

5、温者用冷水浴装置（加适量冰水）调节。当上述温度调节装置到达要求温度后，放入装有试验样液的试管，同时放入一含与试验样液等量蒸憾水并插有温度计的试管。待试管内温度计指示到达试验所需温度时，开始随后的试验。（3）根据需要，选择悬液定量杀灭试验或载体浸泡定量杀灭试验之一进行测定即可。具体试验程序根据微生物种类可分别参见2.1.1.7o（4）试验重复3次，按相应微生物杀灭试验计算杀灭对数值。2.1.1.12.7pH对杀灭微生物效果影响的测定（1）本项试验根据所测消毒剂使用溶液的pH值，分为以下3组进行：第1组pH值x-2第2组pH值x

6、第3组pH值x+2［例如，所测消毒剂使用溶液的pH值为7.8,则3组的pH值应为:第1组5.8,第2组7.8,第3组9.8］。各pH组所用消毒液浓度和作用时间，见2.1.1.12.4O（2）对消毒液pH的调节，先用pH计测定原消毒剂的pH,在偏酸时慢慢滴加氢氧化钠溶液，偏碱时慢慢滴加盐酸溶液以调整。随时用pH计测定消毒液的pH。当达到所要求的pH后，停止调整，进行随后的试验。必要吋，在pH调整后可测定有效成分含量以观察是否受到pH变化的影响。(3)根据需要，选择悬液定量杀灭试验或载体浸泡定量杀灭试验之一进行测定即可。具体试验

7、程序见2.1.1.7O(4)试验重复3次，按相应微生物杀灭试验计算杀灭对数值。2.1.1.12.8评价规定评价时，有机物影响试验应以不含外加有机物组(直接用稀释液配制微生物)的结果为对照；温度影响试验应以2o°c±rc组的结果为对照；pH影响试验应以消毒剂使用溶液pH组的结果为对照。(1)该组第1个〜4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果均合格，判为该组所试因素无影响。(2)该组第2个〜4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果合格，判为该组所试因素有轻度影响。(3)该组第3个〜4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果合格，

8、判为该组所试因素有中度影响。(4)该组只第4个作用时间的试验，对所试微生物杀灭效果合格，判为该组所试因素有重度影响。(5)全部试验对所试微生物杀灭效果均不合格，判为本试验所试因素有严重影响。为取得消毒或灭菌的有效剂量，需增加消毒液浓度或作用时间，重新进行试验。2.1.1.12.9注意事项(