基于肠道菌群研究普洱熟茶提取物对肥胖小鼠脂代谢及炎症影响

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1、分类号：１０１８３：Ｓ８５６．５单位代码研究生学号：２０１５８５２０３３密级：公开吉林大学硕士学位论文学术学位（）基于肠道菌群研究普洱熟茶提取物对肥胖小鼠脂代谢及炎症影响ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＰＴＥｏｎｌｉｐｉｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｏｆｏｂｅｓｅｍｉｃｅｓｔｕｄｙｉｎｇｂａｓｅｄｏｎｇｕｔｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ作者姓名：路晓杰专业：临床兽医学研究方向：兽医内科学指导教师：张乃生教授培养单位：动物医学学院２０１８年６月基于肠道菌群研究普洱熟茶提取物对肥胖小鼠脂代谢及

2、炎症影响Theeffectofpu-erteaextractonlipidmetabolismandinflammationofobesemicestudyingbasedongutmicrobiota作者姓名：路晓杰专业名称：临床兽医学指导教师：张乃生教授学位类别：农学硕士答辩日期：2018年6月4日中文摘要基于肠道菌群研究普洱熟茶提取物对肥胖小鼠脂代谢及炎症影响肥胖是由于机体能量代谢的异常，导致脂肪过度堆积而引发的一种营养代谢综合征。研究证明，肥胖与肠道菌群密切相关，紊乱的肠道菌群会引起全身低度慢性炎症及脂代谢的异常，进而触发肥胖的发生。而饮食是影响肠道菌群的主要因素，因

3、此寻找或者开发一种安全有效的能够改善肥胖的膳食补充剂对人类及动物健康具有重要意义。普洱熟茶作为微生物发酵茶，具有明显的抗炎、抗氧化以及降脂减肥功效，而关于普洱熟茶在肠道菌群介导的肥胖发生中的改善作用的机制，至今无人报道，为了阐明普洱熟茶提取物（PTE）—肠道菌群—肥胖的三角关系，我们通过以下几方面来进行探究：1.动物实验一：以8周龄雄性C57BL/6J小鼠为实验动物，研究在高脂饮食条件下PTE对肥胖的预防作用。每组小鼠每周称量一次体重，实验进行8周后，处死小鼠，通过对小鼠皮下脂肪、附睾脂肪、肝脏重量的测定及脂肪、肝脏HE切片的观察，结果显示，与未经过PTE处理的高脂饮食组相比

4、，PTE处理可以显著降低在高脂饮食条件下小鼠体重的增加、脂肪的积累、脂肪细胞的体积及肝脏脂肪的浸润，且以0.4%PTE的减肥效果最为显著，达到减轻23%的体重的效果。通过荧光定量PCR测定各组小鼠肝脏内与脂代谢密切相关的FAS和SREBP的表达水平，结果显示PTE处理可以显著的降低高脂饮食条件下这两种基因在mRNA水平上的表达量，然后通过ELISA检测各组小鼠血液中游离脂肪酸（freefattyacid；FFA）的浓度，结果显示PTE处理可以显著降低高脂饮食条件下的血脂水平，且以0.4%PTE的改善效果最为显著。通过对小鼠处死前空腹血糖及糖耐量实验的测定，结果显示PTE处理可

5、以明显改善高脂饮食条件下的糖脂代谢，且以0.4%PTE的改善效果最为显著。通过对各组小鼠摄食量的测定及摄入热量的计算，结果显示PTE未对小鼠的摄食量造成影响。2.通过荧光定量PCR检测小鼠回肠通透性及脂肪组织炎性因子水平，借I助ELISA检测血液LPS浓度。结果显示，与未经过PTE处理的高脂饮食组相比，PTE处理可以显著的改善高脂饮食条件下小鼠回肠的通透性，降低血液中LPS的浓度及脂肪组织中炎性因子的水平，且存在剂量依赖关系，其中以0.4%PTE的改善效果最为显著。3.动物实验二：为了确认PTE的减肥效果是否与肠道菌群有关，因此进行了粪便移植实验。其中移植的粪便来自于已在相应

6、实验条件下处理了4周的C57BL/6J小鼠，接受粪便移植的对象为在高脂饮食条件下饲养的8周龄C57BL/6J小鼠，总共分为4组，整个实验周期为8周。每组小鼠每周称量一次体重，实验结束后，处死小鼠，通过对小鼠皮下脂肪、附睾脂肪、肝脏重量的测定及脂肪、肝脏HE切片、糖耐量实验的观察，结果显示，和移植来自于高脂饮食条件下的供体粪便相比，其中移植来自普通饮食条件或高脂饮食条件同时经PTE处理过的供体粪便，可以使受体小鼠的体重增加、脂肪积累、脂肪细胞体积、肝脏脂肪浸润及糖代谢情况显著改善。4.收集第一个动物实验结束时的小鼠粪便，进行16SrRNA测序后，结果显示，在高脂饮食条件下的小鼠

7、经过0.4%PTE处理后，以下菌类在相应分类水平上的丰度有所增加：Segetibacter(属)，Armatimonadetes(门)，JG30-KF-CM45(目)，OPB35soilgroup(纲)，Subgroup22(纲)，Gemmatimonas(属)，Haliangium(属)，unidentifiedCyanobacteria(纲)，Allobaculum(属)，unidentifiedAcidobacteria(纲)，Anaerolineaceae(科)，Clostridialesvad