抗生素的配制

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1、抗生素储存液工作浓度(mg/ml)保存条件严紧型质粒(ug/ml)松驰型质粒(ug/ml)氨苄青霉素50(溶于水)-20℃2060羧苄青霉素50(溶于水)-20℃2060氯霉素34(溶于乙醇)-20℃25170卡那霉素10(溶于水)-20℃1050链霉素10(溶于水)-20℃1050四环素5(溶于甲醇)-20℃1050常用抗生素溶液抗生素    贮存液a    工作浓度    浓度    保存条件    严紧型质粒    松弛型质粒氨苄青霉素    50mg/ml(溶于水)    -20℃    20μg/ml    60μg/ml羧苄青

2、霉素    50mg/ml(溶于水)    -20℃    20μg/ml    60μg/ml氯霉素    34mg/ml(溶于乙醇)    -20℃    25μg/ml    170μg/ml卡那霉素    10mg/ml(溶于水)    -20℃    10μg/ml    50μg/ml链霉素    10mg/ml(溶于水)    -20℃    10μg/ml    50μg/ml四环素b    5mg/ml(溶于乙醇)    -20℃    10μg/ml    50μg/mla：以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器

3、过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。b：镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如LB培养基）。常用抗生素 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25u

4、g/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量

5、的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素（streptomycin）（50mg/ml） 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixicacid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素（tetracyyl

6、ine）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。几种溶液的配制方法1、PBS:    取ZLI-9061PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。2、TBS：    2.1Tris缓冲液配方：（0.5M  pH7.6）            Tris（三羟甲基氨基甲烷）     

7、   60.57g            1NHCL        约420ml            双蒸水        加至1000ml    Tris缓冲液配制方法：        先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液，4℃冰箱中保存。    2.2TBS配方：            Tris-HCI缓冲液（0.5M  pH7.6）        100ml            NaCI        8.5~

8、9g(0.15mol/L)            双蒸水        加至1000ml    TBS配制方法：        先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加