GBT18646-2002 动物布每氏菌病诊断技术 - 下载地址.pdf

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1、GB/T18646一2002前言布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌属细菌致人畜共患的传染病-一变态反应性疾病，世界范围性威胁人类健康和影响畜牧业发展。动物布病主要由羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌感染羊、牛和猪等动物呈急性或慢性经过。另外，是人布病的主要传染来源。其临床主要特征是母畜流产、乳腺炎、不育和各种组织(如攀丸、关节)的炎症。世界动物卫生组织[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE〕将布病列为B类重要传染病，中华人民共和国传染病防治法将布病列为乙类传染病。为确诊

2、动物布病要尽可能分离病原体，并鉴定其种和生物型，但方法复杂，需要的时间长，而且阳性检出率低。因此布病最常用的检疫技术是血清学诊断。目前我国常用的血清学方法有虎红平板凝集试验、试管凝集试验和补体结合试验以及乳牛全乳环状试验。本标准的编制参考了OIE的《诊断试验和疫苗标准手册》有关章节，澳大利亚动物疾病诊断技术标准有关布病诊断部分和联合国粮食与农业组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)联合布鲁氏菌病专家委员会推荐的《布鲁氏菌病实验室技术》(第三版)。本标准适用于对动物布病的检疫及监测。本标准的附录A,附录B、附录C、附录D是标准的附录，附录E、附录F是提示的附录。本标准由中华人民共和国

3、农业部提出。本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。本标准主要起草人:白文彬。中华人民共和国国家标准GB/T18646-2002动物布每氏菌病诊断技术Diagnostictechniquesforanimalbrucellosis1范围本标准规定了动物布鲁氏菌病的诊断技术。本标准规定的虎红平板凝集试验、乳牛全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试验和乳牛场布病的监测及诊断泌乳母牛布病的初筛试验;试管凝集试验和补体结合试验适用于诊断羊种、牛种、和猪种布病感染的家畜本标准规定的试管凝集试验不适用于犬种和绵羊副攀种布病感染家畜的检疫。2虎红平

4、板凝集试验2-，材料准备2.1.1抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。2.1.2受检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。2.1.3洁净的玻璃板，其上划分成4cm'的方格。2.1.4吸管或分装器，适于滴加。.03ml。2.1.5牙签或火柴杆，供搅拌用。2.2操作方法2.2.1将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应血清。.03mL,2.2.2在受检血清旁滴加抗原0.03mL.2.2.3用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。2.2.4每次试验应设阴、阳性血清对照。2.3判定2.3.1在阴、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。2.3.2受检血

5、清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(十)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(一)。3乳牛布病全乳环状试验3.1材料准备3.1.1布病全乳环状抗原由制标单位提供，按说明书使用。3.1.2乳样3.1.2.1受检乳样须为新鲜的全乳。3.1.2.2采乳样时应将母畜的乳房用温水洗净、擦干，然后将乳液挤人洁净的器皿中。中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2002-02-19批准2002一05一01AM标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB/T18646-20023.1.2-3采集的乳样夏季时应于当日内检查;保存于2℃时，了d内仍可使用3.2操作方法3.2.1取乳样1ml

6、-，加于灭菌凝集试验管内。3.2.2取充分振荡混合均匀的全乳环状抗原1滴(约50kL)加人乳样中充分混匀3.2.3置37C-38'C水浴中60min3.2.4加温后取出试管勿使振荡，立即进行判定3.3判定标准分为:a)强阳性反应(十++)，乳柱上层乳脂形成明显红色的环带，乳柱白色，临界分明;b)阳性反应(++)，乳脂层的环带呈红色，但不显著，乳柱略带颜色;c)弱阳性反应(+)，乳脂层的环带颜色较浅，但比乳柱颜色略深;d)疑似反应(士)，乳脂层的环带颜色不明显，与乳柱分界不清，乳柱不褪色;e)阴性反应(一)，乳柱上层无任何变化，乳柱颜色均匀。4动物布病试管凝集试验4.1材料准备4.，

7、.1稀释液0.5环石炭酸生理盐水。检验羊血清时用含。.5%石炭酸的10%盐溶液，如果血清稀释用含0.5石炭酸的10%盐溶液，抗原的稀释亦用含0.5%石炭酸的10YD盐溶液.4.1.2抗原、阳性血清和阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。4.1.3凝集试验管(三分管)、试管架、吸管及温箱。4-2操作方法4.2.1按常规方法采血分离血清。4.2.2运送和保存血清样品时防止冻结和受热，以免影响凝集价。若3d内不能送到实验室，按每9MI.血清加1m1.5%石炭酸生理盐水(徐徐