CFX_Manager_Software_快速使用指南

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1、CFX96快速梯度定量PCR仪快速操作指南一．运行实验1.确认系统数据线和电源线连接正常后，打开CFX96开关，系统将自主进入自检模式。2.自检完成后，双击启动Bio-RadCFXManager控制软件,软件将自动搜索仪器设备，完成连接后，“DetectedInstruments”列表出现设备名称的序列号，同时PCR仪器屏幕显示有红色“Underremotecontrol”字体。3.软件启动后，会出现“StartupWizard”操作导航指示，选择“CreateaNewRun”,同时选择“CFX96“，最后点击”OK”确认进入新运行程序等编辑界面；

2、如需要运行如“打开文件”、“运行相同实验”等请分别选择不同的选项即可。4.在“RunSetup”的条件下，点击“”标签，可分别选择“CreateNew”：可新建热循环程序；“SelectExisting”可调用已有程序；”ExpressLoad”：下拉菜单中可选择的各种标准预设的热循环程序；“EditSelected”：对选中程序进行再编辑。4.1新建或编辑程序时，可在图形或文字区域输入各步骤设定温度、时间值等。4.2：插入一个普通控温步骤4.3：插入一个温度梯度步骤4.4：插入热循环范围，包括循环起始步骤和重复次数（总循环数＝输入的重复次数’Mo

3、reTime’+1）.4.5：插入一个融解曲线程序4.6或：插入或删荧光采集步骤4.7：对反应条件进行优化，包括温度梯度设置、降落PCR设置、升降温速率调节等4.8：删除步骤4.9编辑完成后点击“OK”确认并保存程序，该保存的程序方便下次调用。5.在完成程序设置后，点击后下角的“NEXT”或左上角的“”,进入检测样品设置界面。可分别选择“CreateNew”：可新建样品信息设置；“SelectExisting”可调用已有设置；”ExpressLoad”：下拉菜单中可选择的各种标准的简单预设模块；“Edit1Selected”：对选中样品设置信息进行

4、再编辑。新建或编辑样品设置请按如下操作进行：5.1从“”下拉框中选择荧光扫描模式，“SYBR/FAMOnly”为单通道快速扫描模式，适合使用染料法（如SYBRGreen/EvaGreen）或FAM探针的检测；“AllChannels”为全通道检测模式，可同时对5个通道扫描，适合与任意探针的检测；”FRET”模式适用与FRET探针的使用。在完成这步后可直接跳入步骤6运行实验，从而节约时间，在这种情况下，以下”5.*”步骤可在实验运行中或实验运行结束后再进行编辑，从而尽最大可能的节约时间。5.2“”：选择实验时所使用的荧光分子，注意如果为”SYBR/F

5、AMOnly”模式其仅能选择“FAM、SYBRGreen”5.3“”通过下拉框选择所选反应孔的检测样品类型，包括未知样品（Unknow）、标准品、阴性对照、阳性对照等等。5.4在“”打勾：为所选样品指定检测的荧光类型（此列为SYBRGreen），根据实验需要还可以在“TargetName”中输入扩增基因名称5.5在””输入所选检测孔的样品名，并打勾确认。5.6如有重复性设置，可在复选重复性测试孔后在“”中逐一指定；或者点击“”进行快速的重复反应孔设定。即在“”中分别填入重复的次数和重复起始编号，并在””中选择重复放置的方向。最后点击“”即可。5.7

6、如果在样品类型“SampleType”中选择的为“Standard”，则需要为标准品浓度赋值，可在“”中对对应孔逐一赋值。5.8可在“”设定相对表达量差异分析时的内参、对照样品及各样品的实际扩增效率5.9在“”可解除所选样品重复状态设置25.10“”可删除当前选定的样品孔设置。5.12如有疑问，点击“”再次查看板编辑的流程5.13最后点击左上角的“Settings－PlateType”选择实验所用耗材的类型。5.14编辑完成后点击“OK”确认并保存孔位设置，该保存的设置可方便下次调用。6.确定样品设置后点击右下角的“NEXT”或者点击“”进入运行系

7、统。此时可在“Notes”中输入实验测试的目的等相关信息，并在“”输入样品反应体积。最后点击“”按钮仪器会自动打开样品槽，此时按照设置好的样品位置放置好样品，然后点击“”让仪器自动关闭样品槽（注意：样品槽开或关闭时请勿强行扳开或压合），热盖闭合后“”会变亮，此时点击“”，确定实验数据的保存位置后，程序将开始运行。7.Note：程序运行中或运行结束后都可点击“”对“第5步骤”编辑的样品类型进行再编辑，也可按照“第5步骤”的流程编辑新的设置类型等。8.实验结束后，点击“”，取出并丢弃反应板或管，同时点击“”关闭样品槽后，再退出程序，关闭仪器电源，最后关

8、闭电脑后方可离开。二．数据查看9.如需查看后分析数据，可直接点击“.pcrd”文件或点击软件左上角“File-Open-D