第一章酶工程电子教案绪论(4)

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1、酶工程电子教案第一章绪论1、酶的基本概念酶的概念：具有生物催化功能的生物大分子，按照其化学组成，可以分为蛋白类酶（P酶）和核酸类酶（R酶）两大类别。酶工程：酶的生产与应用的技术过程。酶工程的主要内容包括：微生物细胞发酵产酶，动植物细胞培养产酶，酶的提取与分离纯化，酶分子修饰，酶、细胞、原生质体固定化、酶的非水相催化、酶反应器和酶的应用等。2、酶的发展史19世纪以前：4000多年前的夏禹时代就已经掌握了酿酒技术。3000多年前的周朝，就会制造饴糖、食酱等食品。2500多年前的春秋战国时期，就懂得用麴来治疗消化不良等疾病。19世纪30年以来：1833年，佩恩（Payen

2、）和帕索兹（Persoz）从麦芽的水抽提物中用酒精沉淀得到淀粉酶（Diastase）o19世纪中叶，巴斯德（Pasteur）认为在活酵母细胞内有一种可以将糖发酵生成酒精的物质。1878年昆尼（Kunne）首次将酵母中进行酒精发酵的物质称为酶（Enzyme）,这个词来自希腊文，其意思是“在酵母中”。1896年，巴克纳（Buchner）兄弟发现酵母的无细胞抽提液也能将糖发酵成酒精。1902年，亨利（Henri）根据蔗糖酶催化蔗糖水解的实验结果，提出中间产物学说。k

3、k2E+S======ES===E+PK-i1913年，米彻利斯（Michaelis）和曼吞（menten

4、）米氏方程：Vm[S]v==Km+[S]“酶是生物体产生的具有生物催化功能的物质”。但是尚未搞清楚究竟是哪一类物质？1920年，德国化学家威尔斯塔特（Willstater）将过氧化物酶纯化12000倍。1926年，萨姆纳（Sunme门首次从刀豆提取液中分离纯化得到腺酶结晶，并证明它具有蛋白质的性质。1960年，雅各（Jacob）和莫诺德（Monod）提出操纵子学说，阐明了酶生物合成的基本调节机制。1982年，切克（ThomasCech）等人发现四膜虫（Tetrahynena）细胞的26SrRNA前体具有自我剪接功能（Self-splicing并将这种具有催化活性的

5、RNA称为ribozyme。1983年，阿尔特曼（SidneyAltman）等人发现核糖核酸酶P（RNaseP）的RNA部分MlRNA具有核糖核酸酶P的催化活性。由此引出“酶是具有生物催化功能的生物大分子（蛋白质或RNA）”的新概念。3、酶催化作用的特点3.1酶催化作用的专一性强酶的专一性是指在一定的条件下，一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型反应的特性。酶的专一性按其严格程度的不同，可以分为绝对专一性和相对专一性两大类。3.1.1绝对专一性：一种酶只能催化一种底物进行一种反应，这种高度的专一性称为绝对专一性。例如，乳酸脱氢酶［EC1.1.1.27］催

6、化丙酮酸进行加氢反应生成L-乳酸：CHjCIb1乳酸脱氢酶1C=01H-C-OH1COOHNADHNADCOOH丙酮酸L-乳酸核酸类酶也同样具有绝对专一性：四膜虫26SrRNA前体等催化自我剪接反应的R酶，只能催化其本身RNA分子进行反应，而对于其它分子一概不作用。3.1.2相对专一性：一种酶能够催化一类结构相似的底物进行某种相同类型的反应，这种专一性称为相对专一性。相对专一性又可分为键专一性和基团专一性。键专一性的酶能够作用于具有相同化学键的一类底物。如，酯酶可催化所有含酯键的酯类物质水解生成醇和酸：0

7、

8、酯酚R—C—O—R'+H2O===========R-CO

9、OH+R'・OH（酯）（水）（酸）（醇）基团专一性的酶则要求底物含有某一相同的基团。如胰蛋白酶［EC3.4.31.4］选择性地水解含有赖氨酰-或精氨酰-的親基的肽键。再如核酸类酶MlRNA（核糖核酸酶P的RNA部分），催化tRNA前体5，-末端的成熟。要求底物核糖核酸的3」端部分是一个tRNA,而对其5」端部分的核昔酸链的顺序和长度没有要求，催化反应的产物为一个成熟的tRNA分子和一个低聚核昔酸。3.2酶催化作用的效率高酶催化的转换数（每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数）一般为103min-1左右。酶催化和非酶催化反应所需的活化能有显著差别。如图1-1所示。反应过

10、程从图中可以看到，酶催化反应比非酶催化反应所需的活化能要低得多。图1-1酶与非酶催化所需的活化能3・3酶催化作用的条件温和酶的催化作用一般都在常温、常压、PH近乎中性的条件下进行。原因：一是由于酶催化作用所需的活化能较低，二是由于酶是具有生物催化功能的生物大分子。在高温、高压、在过高或过低pH等极端条件下，大多数酶会变性失活而失去其催化功能。4•影响酶催化作用的因素酶的催化作用受到底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂浓度、抑制剂浓度等诸多因素的影响。4・1底物浓度的影响底物浓度是决定酶催化反应速度的主要因素。在其他条件不变的情况下，酶催化反应速度与底物浓度的关