生物化学实验技术考试样题gai

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1、1.分光光度计使用时,在波长360nni〜lOOOnm内,用热辐射光源作光源,在波长200nm〜350nm范围内,用气体放电光源作光源;其测定值/在0.2〜0.8范围内误差较小。2.Bio-gelP中文名是聚丙烯酰胺凝胶,其型别P-300表示排阻极限为4*10'。3.离心转头是离心机的主要部件Z-,主要可分为角度转头、垂直转头、甩平式转头、区带转头、连续流动转头等。4.DNA常用紫外分光光度法进行定量,通常10D26。相当于50Pg/nil双链DNA。1.带电颗粒在电场中的电泳分离取决于下列哪项因素:(ABCDE)A.电场强度B.颗粒所带净电

2、荷数及其大小形状C.支持物的电渗作用D.溶液的pll值E.溶液的离了强度2.偶然误差是由于某些难以预料的偶然因素或是测定过程屮某些不易控制的因素引起的误差。请问下列哪些方法可以减少偶然误差?(CE)A.仪器校正B.对照实验C.平均取样D.空白实验E.多次取样3•下列哪些方法可用于细菌细胞的破碎?(ABCDE)A.超声波处理B.高压挤压匀浆C.纤维素酶处理D.溶菌酶处理E.捣碎机1.吸收光谱:处于基态和低激发态的原了或分了吸收具有连续分布的某些波长的光而跃迁到各激发态,形成了按波长排列的暗线或暗带组成的光谱。2.对流免疫电泳:是在凝胶介质屮将电

3、泳法和扩散法相结合的一种免疫化学方法。3.相对离心力:在离心力场的作用下,颗粒所受离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度4.精密度:精密度是指在相同条件下多次测量结果互相吻合的程度,表现了测定结果的再现性。5.超滤:是一种加压膜分离技术,即在一定的压力下,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜,而使大分了溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分了物质得到了部分的纯化。1.PCR的主耍步骤是什么?答:主要步骤:1•双链D「A模板加热变性成单链(变性);2•在低温下引物与单链DNA互补配对(退火);在适宜温度下TaqDNA聚合酶催化引物

4、沿着模板DNA延仲(延伸)。2.什么是酶的固定化,固定化酶冇何优点?答:酶的同定化是将酶与水不溶性载体结合,制备同定化酶的过程。优点:1•纯化简单2•酶的稳定性冇所改进;3•酶的使用效率提高,可以反复利用;4•反应条件容易控制。1.如何去除核酸提取液屮的杂蛋白?试举2种具体的方法。■蛋白质的去除可以选择去污剂法或有机溶剂法。I■去污剂法是利用SDS等阴离子去污剂与蛋白质带正电I荷的侧链结合,从而使核酸与蛋白质分开。然后加入沐醋酸钾溶液,使SDS-蛋白质复合物沉淀,并使多余的SDS转化为溶解度小的钾盐而同时沉淀。■有机溶剂法是利用酚、氯仿的混合

5、液作蛋白质的变性I剂,当它们与含核酸和蛋白质的水溶液一起振摇时形成乳状液,蛋白质因充分接触酚和氯仿而变性,与核酸分开。离心后可分为两相,一般上层为含核酸的水相,下层为有机相,交界处是变性凝聚的蛋白质层。最后利用乙醇或异丙醇将核酸沉淀离心收集即可。2.什么是凝胶色谱?它的基木原理是什么?简述凝胶色谱的操作过程。答:是利用凝胶把物质按分子大小不同进行分离的一种方法。原理:由于被分离物质的分了大小不同,洗脱时,大分了物质由于直径大于凝胶网孔不能进入凝胶内部,只能沿着凝胶颗粒间的孔隙,随溶剂向下移动,因此流程短,首先流出层析柱,而小分了物质,由于直径

6、小于凝胶网孔,能口由进出胶粒网孔,使之洗脱流程增长,移动速度慢而后流出层析柱。应用:1)脱盐及去除小分了杂质2)蛋白质的分离、生物大分了的纯化3)分了量测定4)去热源物质5)溶液的浓缩。1・分光光度计使用时,在波长360nm〜lOOOnm内,用热辐射光源作光源,在波长200nni〜350nni范围内,用气体放电光源作光源;其测定值A在0.2~0・8范围内误差较小。2.Bio-gelP中文名是聚丙烯酰胺凝胶,其型别P-300表示排阻极限为4*10DNA常用紫外分光光度法进行定量,通常10D26。相当于50Pg/nil双链DNA。3.带电颗粒在电

7、场中的电泳分离取决于下列哪项因素:(ABCDE)A.电场强度B.颗粒所带净电荷数及其大小形状C.支持物的电渗作用D.溶液的pll值E.溶液的离了强度2.偶然误差是由于某些难以预料的偶然因素或是测定过程屮某些不易控制的因素引起的误差。请问下列哪些方法可以减少偶然误差?(CE)A.仪器校正B.对照实验C.平均取样D.空白实验E.多次取样3•下列哪些方法可用于细菌细胞的破碎?(ABCDE)A.超声波处理B.高压挤压匀浆C.纤维素酶处理D.溶菌酶处理E.捣碎机吸收光谱:处于基态和低激发态的原了或分了吸收具有连续分布的某些波长的光而跃迁到各激发态,形成

8、了按波长排列的暗线或暗带组成的光谱。对流免疫电泳:是在凝胶介质屮将电泳法和扩散法相结合的一种免疫化学方法。&相对离心力:在离心力场的作用下,颗粒所受离心力相当于地球

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