生物技术复习

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1、生物技术复习1、生物技^(biotechnology):也称牛物工程,是指人们以现代牛:命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进的工程技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。2、基因工程(geneengineering):称分子克隆或重组DNA技术,用酶学方法,将异源基因与载体DNA在体外进行重组,将形成的重组子转入受体细胞,使界源基因在其中复制表达,从而改造生物特性,大量生产出人类所需要的产物的高新技术。3、细胞工程(cellengineering):是指以细胞为基本单位,在体外条件卜进行培养、繁

2、殖;或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而达到改良生物品种和创新新阳种;或加速繁冇动、植物个体;或获得某种冇用的物质的过程。4^发酵工程(fermentationengineering):利用微牛•物生产速度快、生产条件简单以及代谢过程特殊等特点,山微生物的某利

3、特定功能牛产出人类所需的产品称为发酵工程,也称为微牛•物工程。5^酶工程(enzymeengineering):是利用酶、细胞器或细胞所具有的特界催化功能,对酶进行修饰改造,并借助生物反应器和工艺过程來生产人类所需产品的一项技术。6、生物技术在食品工业中的应用(自己看书)应用发酵

4、工程生产饮料、奶制品、酱汕、食醋、制萄酒等。应用基因工程生产转基因食品。应用蛋白质工程生产单细胞蛋白等。细胞工程1、细胞工程的基本操作技术A、各种器皿、材料的灭菌,无菌操作技术(1)玻璃器皿的清洗:碱洗、酸洗、先高温高压灭菌或煮泡儿分钟再清洗。(2)灭菌:培养基灭菌——高压(120°C,21min)、过滤灭菌。玻璃器皿、用具——与培养基一起灭菌,部分用具酒精火焰灭菌。(3)接种室:紫外灯照射30mino实验人员:手酒精消毒,穿工作服。超净台:提前30min开启。培养室:保持洁净;减少进出。B、细胞培养技术细胞培养(cellculture):是指动物、植物

5、和微生物细胞在体外无菌条件下的保存和生长。过程:(1)配制细胞培养基:根据各类细胞的特点,配制培养基,对培养基进行灭菌或除菌。(2)取材和除菌:除了淋巴细胞可直接捕取以外,植物材料在取材后,动物材料在取材前都要用一定的化学试剂进行严格的表而清洗、消毒。有时还需借助某些特定的酶,对材料进行预处理。(3)生物材料接种:采用无菌操作技术,将生物材料接种于培养基中(4)培养与继代:将接种后的培养基放入培养室或培养箱屮,提供各类细胞生长所需的最佳培养条件,如温度、湿度、光照、氧气等。当细胞达到一定牛物量时应及时收获或继代。C、细胞融合技术:细胞融合(cellfus

6、ion):两个或多个细胞相互接触示,其细胞膜发生分了重排,导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程称为细胞融合。基本过程:(1)制备原生质体(protoplast):微生物和植物细胞具坚硬的细胞壁,需用齣将其壁降解。动物细胞则无此障碍。(2)诱导细胞融合:两亲本细胞(原生质体)的悬浮液调至一定细胞密度,按1:1的比例混合示,逐渐滴入高浓度的聚乙二醇(PEG)或电激等方法诱导、促进融合。(2)筛选杂合细胞:将混合液移到特定的筛选培养基上,让杂合细胞冇选择地氏出,其它未融合细胞无法生长。细胞融合方法:生物学法、化学融合剂法、电处理融合法D、细胞拆合技术:细胞

7、拆合:把完整细胞的细胞核和细胞质用特殊的方法分离开来,或把细胞核从细胞质中吸取出来,或用紫外线等把细胞屮的核杀死,然示再把同种或异种的细胞核和细胞重新组介起来,培冇新的细胞或新的生物个体。过程:2、植物组织培养基本过程(1)预备阶段:a、选择合适的外植体b、除去病原菌及杂菌c、配置适宜的培养基。(2)诱导去分化阶段:让外植体去分化,使各种细胞重新处于旺盛有丝分裂的分生状态。(3)继代增殖阶段:愈伤组织氏出后经过4~6周的迅速细胞分裂,原冇培养基中的水分及营养成分多已耗失,细胞的有害代谢物已在培养集中积累,因此必须进行移植,即继代增殖。(4)牛根发芽阶段:

8、愈伤组织只有经过重新分化才能形成胚状体,继而长成小植株。(5)移栽成活阶段:牛长于人工照明玻璃瓶中的小苗,要适时移栽室外以利牛长。3、动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体。动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。A、动物细胞培养的步骤:①収目的组织,漂洗、切割。②将小组织块置于解离液离散细胞。解离液含蛋白酶类,无钙、镁离子。③低速离心洗涤细胞后,将目的细胞吸移培养瓶。④培养。B、植物细胞和动物细胞培养的比较:比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能型细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有

9、成分蔗糖、植物激索葡萄糖、动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、

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