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时间:2019-09-07
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1、转生长激素基因鱼的研究进展摘要:本文主要介绍了非“全鱼J“全鱼”以及“同种”生长激素基因重组体的构建,对比分析相应转基因鱼的生长,同时介绍了显微注射法、电脉冲法、精子载体法、基因枪法等常用的鱼类基因转移技术,分析了转生长激素基因鱼的安全性、遗传稳定性和发展前景。关键词:生长激素基因重组体;转基因鱼;基因转移;Abstract:Thispapermainlyintroducestheofnon-Hallfish”,fishandthesamegrowthhormonegenerecombinantconstruction,comparisonandanalysi
2、softhecorrespondingtransgenicfishgrowth,atthesametime,itintroducesthemicroinjectionmethod,electroporation,spermvectormethod,Particlegunmethodcommonlyusedfishgenetransfertechnology,analysisofthegrowthhormonegenefishsafety,geneticstabilityanddevelopmentprospects.Keywords:Growthhormone
3、generecombinant;transgcnicfish;geneWansfer;0前言1985年,世界上第一批转基因鱼的诞生,开辟了鱼类遗传育种的新领域,同时也揭开了转基因鱼研究的序幕⑴。过去的20余年,转基因鱼研究取得了长足发展。IT前,世界上已经有超过35种的鱼用于转基因研究,绝大多数鱼类的转基因研究以培育具有优良生产性状的新品系为目的⑵。其中,生长激索转基因鱼由于具有生长速度快、饵料转化效率高等特点而备受关注。近日,美国食物药品管理局(FDA)在确认转基因三文鱼食用安全性五年、环境安全性三年之后,批准了水恩公司(AquaBounty)的转基因三文鱼
4、品牌"AquAdvantage"上市,从而使之成为首个获批的供食用转基因动物,快速生长转基因鱼在转基因动物中率先实现市场化⑵。在对转生长激素基因鱼的研究中,先后经历了转非全鱼生长激索基因鱼,转全鱼生长激素基因鱼以及同种生长激素基因鱼的研究,采用了显微注射法、电脉冲法、精子载体法、基因枪法等常用的基因转移技术,本文主要分析不同转基因元件构建的转基因鱼生长状况,介绍儿种基本的基因转移方法,转基因鱼的安全性、遗传稳定性分析以及其发展前景。1生长激素基因重组体与转基因鱼1.1非“全鱼”生长激素转基因鱼非“全鱼”生长激素转基因重组体指转植基因的构成元件(调控序列和生长激
5、素编码序列)中至少有一部分來自鱼类以外的其他物种。通过转移此类转植基因所获得的转基因鱼即为非“全鱼”生长激素转基因鱼。转基因鱼研究的初期,所使用的重组生长激素基因来自哺乳动物,如人、牛等的生反激素基因,调控顺序有小鼠金属硫蛋白基因伽T)启动子、病毒SV40启动子等。部分非“全鱼”生长激素转基因鱼的快速生长效应是令人振奋,60日龄转入生长激素基因银鲫(CarassiusauratusgibelioBloch)的平均体重是对照组的1.82倍r,io135日龄转入生长激素基因泥鍬(Misgurnusanguillicaudatus)体重较对照鱼增加3—4.6倍。F2
6、代转入生长激素基因鲤鱼(Cyprinuscarpio厶丿最大个体体重是对照鱼的8.7倍⑵。除此之外,尽管其他非“全鱼”生长激素转基因鱼的生长速率或体重增加较对照鱼有一定优势,但--般不超过50%。F2和F4代转入生长激素基因红鲤(CyprinuscarpioL.redvar.)的生长率分别比对照鱼高出13%—25%〔小。转虹鱒生长激素基因鲤鱼P0代个体的平均体重比对照鱼高22%,F1代杂合个体平均体重比对照鱼高50%[,Oin,。嵌合体转基因沟^.(Ictaluruspunctatus)平均体重与对照鱼Z间没有显著性差异,尽管其F1代转基因个体表现出一定的快速
7、生长效应,但其平均体重仅仅高出对照鱼23%—26%他。1.2“全鱼”生长激素转基因鱼“全鱼”生长激素转基因鱼指通过转移构成元件來自鱼类,但又不完全來自于受体鱼类本身的转植基因所获得的转基因鱼。朱作言等利用鲤鱼肌动蛋白基因启动子与草鱼生长激素基因(gcGH),重组构建了鲤科鱼类基因元件组成的“全鱼”生长激素基因构建体PCAgcGHL13Jo目前,国际上已克隆出20多种鱼的GH基因,包括鯛鱼、大马哈鱼等冋。在此基础上,国内外已构建11!10多个“全鱼”重组基因,证实了其在受体鱼中的生物学功能悶。转“全鱼”生长激素基因鱼的生长情况根据“全鱼”转植基因不同可分为如下4
8、种情况。(1)转植基因调控序列和编码序
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