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1、第三章核酸的化学及结构一、名词解释1.DNA的变性:DNA变性是指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从而使核酸的天然构象和性质发生改变。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变;2.DNA复性:变性DNA在适当条件下,使彼此分离的两条链重新由氢键链接而形成双螺旋结构的过程;3.分子杂交:将不同来源的DNA经热变性、冷群,使其复性,在复性时,如这些异源DNA之间在某些区域有相同的序列,则形成杂交DNA分子;4•增色效应:天然DNA在发生变性时,氢键断裂,双键发生解离,碱基外露,共觇双键更充分暴露,变性DNA
2、在260nm的紫外吸收值显著增加的现象;5.减色效应:在一定条件下,变性核酸可以复性,此吋紫外吸收值又冋复至原來水平的现象;6.回文结构:在真核细胞DNA分子中,脱氧核百酸的排列在DNA的两条链中顺读与倒读序列是一样的(即脱氧核昔酸排列顺序相同),脱氧核昔酸以一个假想的轴成为180°旋转对称(即使轴旋转180°两部分结构完全垂叠起來)的结构;7.Tm:DNA热变性的过程不是一种“渐变”,而是一种“跃变”过程,即变性作用不是随温度的升高缓慢发牛,而是在一个很狭窄的临界温度范围内突然引起并很快完成,就像固体的结晶物质在其熔点吋突然熔化一样。通常把DNA在热变性
3、过程屮紫外吸收度达到最大值的1/2时的温度称为“熔点”或熔解温度(meltingtemperature),用符号Tm表示;8.Chargaff定律:不同牛物种属的DNA碱基组成不同,同一个体不同器官、不同组织的DNA具有相同的碱基组成,含氨基的碱基(腺卩票吟和胞喘噪)总数等于含酮基的碱基(鸟嚓吟和胸腺喀喘)总数,即A+UT+G;嚓吟的总数等于卩密噪的总数,即A+G二C+T;9.碱基配对:腺瞟吟与胸腺嚅唳成对,鸟瞟吟与胞嚅噪成对,A和T之间形成两个氢键,C和G之间形成三个氢键;10.内含子:基因的插入序列或基因内的非蛋白质编码;11.正超螺旋:盘绕方向与双螺
4、旋方向相同,此种结构使分子内部张力加大,旋得更紧;5.负超螺旋:盘绕方向与双螺旋方向相反,使二级结构处于疏松状态,分子内部张力减小,利于DNA复制、转录和基因重组;6.siRNA:(smallinterferingRNA干扰小RNA)是含有21~22个单核昔酸长度的双链RNA,通常人工合成的siRNA是碱基对数量为22个左右的双链RNA;7.miRNA:(microRNA,微RNA)是一类含19~25单核昔酸的单链RNA,在M端有「2个碱基长度变化,广泛存于真核生物屮,不编码任何蛋口,本身不具有开放阅读框架,具有保守型、时序性和组织特异性;8.Southe
5、rnblotting:(Southern印迹法)将凝胶电泳分离的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上后,再进行杂交;9.Northernblotting:(Northern印迹法)将RNA电泳变性后转移至纤维素膜再进行杂交的方法;10.Westernblotting:(Western印迹法)根据抗体与抗原可以结合的原理,用类似的方法分离蛋口质;11.反密码子:是位于tRNA反密码环中部、可与mRNA中的三联体密码子形成碱基配对的三个相邻碱基。在蛋白质的合成中,起解读密码、将特异的氨基酸引入合成位点的作用;12.发夹结构:单链RNA局部区域卷曲形成双链螺旋结构,亦
6、称发卡结构;13.退火:热变性的DNA经缓慢冷却后复性的过程。二、填空题:1.核酸的基本结构单位是单核昔酸。核酸根据化学组成可分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两人类。2.B-DNA双螺旋中一条链的方向是虽2,另一条链的方向是5,,每10对碱基绕轴旋转一圈,螺距为3.40nm,碱基平面与螺旋轴_垂直,且位于螺旋的右侧,磷酸■脫氧核糖位于螺旋的夕卜侧。T总是与A配对,C总是与G配对。3.两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于_细胞核_中,RNA主耍位于细胞质中。4.核酸在260nm附近有强吸收,这是由于核酸的组成中含有碱基和—共轨双键。1.细
7、胞质中的RNA主要分为mRNA(信使RNA),rRNA(核糖体RNA),tRNA(转运RNA)。其屮mRNA是蛋口质合成的模板,tRNA是转运氨基酸的工具,rRnA是蛋白质合成的场所。2.维持DNA双螺旋结构稳定的主要作用力有碱基堆积力、氢键、离子键。3.tRNA的二级结构为三叶草型,三级结构为L型。tRNA分子3,-端有一共同的碱基序列是-CCA,其功能是蛋白质生物合成时,用于连接活化的相应氨基酸。4.真核生物成熟的mRNA的结构特点是:5,-末端具有7-甲基鸟卩票吟核昔三磷酸(帽子结构),3'-末端的一段长约200个碱基的多聚腺苗酸(polyA)o5.
8、Tm值与DNA的人小和所含碱基中的G+C比例成正比。6.脱氧核昔酸