芍药甘草复方效应组分谱效关系研究

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1、芍药甘草复方效应组分谱效关系研究史美耿1石海云2(1南京美峰医药科技有限公司江苏南京210000)(2南京宇道科技开发有限公司江苏南京210002)【摘要】目的:以芍药甘草复方为例,探讨谱效关系应用价值。方法:取合适SD大鼠分组,随机分组,每组5只,分别以芍药昔效应组分A(0.3、0.6、1.2g/kg)>甘草酸效应组分B(0.3、0.6、1.2g/kg)>甘草总黄酮效应组C(0.6、1.2、2.4g/kg)分,进行配比,灌胃,共17组,另取2组各5只,分别以阿托品、牛理盐水灌胃,计算药剂对胃底肌条抑制率制。结果:A3B3

2、C3配伍抑制率最高,达到(35.83±5.73)%;芍药昔效应组分、甘草总黄酮配比与抑制率方差分析,差异具有统计学(P<0.05),重复试验平均抑制率(36.43±7.19)%o结论:谱效关系以色谱峰获取体内活性物质与药效进行相关性分析,具有极高的应用价值。【关键词】中医药;谱效关系;芍药;甘草;效应组分【中图分类号】R28【文献标识码】B【文章编号】2095-1752(2015)23-0317-02指纹图谱与药效的相关性研究,即谱效研究,是开展中药质控研究工作的重要方法⑴。本次研究试分析芍药甘

3、草复方效应组分谱效关系,为开展芍药甘草复方质控研究提供借鉴。1•材料与方法1.1实验动物随机取体重在(275±25)g范围内,8周龄,SD雄性大鼠。1.2药物与试剂芍药昔效应组分,含芍药昔44%,甘草酸效应组分,含甘草酸50.0%,甘草总黄酮效应组分,甘草总黄酮含量以甘草昔计52.0%,自行配置。乙月青为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯。1.3方法自由饮水,随机分组,每组5只。分别以芍药昔效应组分(0.3、0.6、l,2g/kg).甘草酸效应组分(0.3、0.6、l・2g/kg)、甘草总黄酮效应组(0.

4、6、1.2、2.4g/kg)分,进行配比,灌胃,共27组。另选5只大鼠给予生理盐水、阿托品灌胃。连续给药5d,禁食,不禁水,末次给药120min后,敲昏大鼠,腹主动脉取血,处理备用。取大鼠胃底肌条,制备胃底肌条收缩模型,计算药物对胃底肌条抑制率。重复性实验。以最佳配比灌胃大鼠血液样本血清,进行HPLC指纹图谱测定,最后进行HPLC谱峰、活性成分配比与药效双变量分析。1.4色谱条件ThermoTMC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:A(乙0h),B(O.O5%三氟乙酸)进行梯度洗脱,运行时间

5、90min;0〜5min,15%A;5〜7min,15%A〜25%A;7〜27min,25%A;27〜29min,25%A〜50%A;29〜59min,50%A;59〜61min,50%A〜75%A;61〜90min,75%A。流速1.0mL?min-l,柱温30°C,检测波长232nm,进样量20μL«1.5统计学处理计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,组间比较采用t检验,相关性分析采用双变量检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。2•结果2.1最佳配比生理盐水对照组抑制率为(2.

6、28±3.10)%,A1B1C1抑制率为(13.11±3.42)%,A2B1C1(16.83±5.50)%、A3B1C1(25.43±5.58)%、A1B2C1(33.22±8.42)%、A1B3C1(22.74±8.91)%、A1B1C2(22.58±7.36)%、A1B1C3(22.85±7.94)%、A2B2C1(22.89±8・43)%、A1B2C2(28.48±5.83)%、

7、A2B1C2(22.8±7.34)%、A2B2C2(31.24±5.28)(29.55±5.14)(35.83±5.73)%、A3B3CBC3(28.47±5・26)%、A2B3C3%、A3B2C3(31.15±5.58)%、A3B3C3%。其中A3B3C3配伍抑制率最高。以三类有效成分配比为自变量,以抑制率为因变量,进行方差分析,结果显示芍药昔效应组分、甘草总黄酮配比与抑制率方差分析,差异具有统计学(F二84.322,P二0.03<0.0

8、5)、(F=24.38,P=0.04)o在最佳配比(1:1:2)配比情况下,理论上剂量水平越高,抑制率越高。进行重复性实验5次,最佳配比条件下,抑制率均值为(36.43±7.19)%,标准差/均值=19.74%<20%,稳定性较好。2.2谱效相关性分析HPLC色谱图分析各血清特征峰与药效相

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