专题1 基因工程复习

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1、专题一基因工程选修三现代生物科技专题基因工程诞生的背景1、20世纪中叶,基础理论取得了重大突破DNA是遗传物质的证明DNA双螺旋结构和中心法则的确立遗传密码的破译2、技术发明使基因工程的实施成为可能基因转移载体的发现工具酶的发现DNA合成和测序技术的发明DNA体外重组的实现重组DNA表达实验的成功第一例转基因动物问世PCR技术的发明1.科学家们经过多年努力，创立了新兴生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是A．定向提取生物体的DNA分子B．定向地对DNA分子进行人工“剪切”C．在生物体外对DNA分子进行改造D．定向

2、地改造生物的遗传性状D练习基因工程基本工具操作程序生产应用运载体DNA连接酶限制性核酸内切酶目的基因的检测与鉴定目的基因导入受体细胞基因表达载体的构建目的基因的获取转基因动物转基因植物工程菌基因治疗和基因诊断蛋白质工程练练练练练练1、限制酶的作用特点：（体现了专一性）2、限制酶的作用原理：4、用途：5、来源和种类：微生物、几千种3、作用结果：“分子手术刀”——限制性核酸内切酶1）能识别双链DNA的特定核苷酸序列；2）从特定部位的两个核苷酸切开。催化磷酸二酯键断裂形成黏性末端、平末端1）切割目的基因和运载体（基因工程）2

3、）保护自身细胞原有的遗传信息（微生物细胞）磷酸二酯键ATGGCATCTTCGAA氢键“分子手术刀”——限制性核酸内切酶“分子手术刀”——限制性核酸内切酶“分子缝合针”——DNA连接酶1、DNA连接酶的作用：2、作用原理：3、作用结果：4、用途：5、种类：DNA聚合酶与DNA连接酶连接DNA片段催化磷酸二酯键形成获得重组DNA分子1）构建基因表达载体（基因工程）2）基因修复（微生物细胞）1）E.coliDNA连接酶2）T4DNA连接酶黏性末端黏性末端和平末端2、作为载体的必要条件：能自我复制有切割位点有遗传标记基因对受体

4、细胞无害、容易分离等1、载体的用途：1）运载工具2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制“分子运输车”——载体3、载体的种类：1）细菌质粒2）λ噬菌体的衍生物3）动植物病毒1、关于限制酶的说法中，正确的是（）A.限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列B.EcoRI切割的是G—A之间的氢键C.限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD.限制酶只存在于原核生物中答案：C练习2.（双选）有关基因工程的叙述中，错误的是A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种B、重组DNA的形成在细胞内完成C、目的

5、基因须由运载体导入受体细胞D、质粒都可作为运载体答案：BD练习3.下列四条DNA分子，彼此间具有黏性末端的一组是A．①②B．②③C．③④D．②④答案：D练习4.以下是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的部分片段。完成下列问题：①…CTGCA②…G③…TG…G…CTTAA…AC④…G⑤…GC…CTGCA…CG(1)以上DNA片段是由种限制性核酸内切酶切割后产生的。(2)若要把相应片段连接起来，应选用(填“DNA聚合酶”或“DNA连接酶”)。(3)找出能连接的对应片段并写出连接后形成的DNA分子：4DNA连接酶…

6、CTGCAG……GACGTC…原核细胞的基因结构非编码区非编码区编码区与RNA聚合酶结合位点启动子终止子目的基因主要是指______________________编码蛋白质的结构基因（一）目的基因的获取真核细胞的基因结构编码区非编码区非编码区内含子外显子启动子终止子非编码序列：包括非编码区和内含子思考：编码相同数目氨基酸的蛋白质，原核生物与真核生物基因结构一样长吗？（一）目的基因的获取1、从基因文库中获取（鸟枪法）2、利用PCR技术获取和扩增目的基因3、人工合成质粒目的基因限制酶切割一个切口两个黏性末端两个切口目的基

7、因DNA连接酶表达载体同一种（二）基因表达载体的构建1.过程2.基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因它们有什么作用？（复制原点）2、下列关于基因表达载体的叙述不正确的是A．启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是起始密码B．启动子和终止子都是特殊结构的DNA短片段，对mRNA的转录起调控作用C．标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选D．基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同而有所差别A练习1.转化——2.方法将目的基因导入植物细胞将目的基因导入动物细胞将目的基因导入微生物细胞农杆菌转化法

8、基因枪法花粉管通道法——显微注射法——氯化钙法目的基因进入_________内，并且在受体细胞内维持_____和_____的过程受体细胞稳定表达（三）将目的基因导入受体细胞目的基因的mRNA转录翻译双链DNA(即目的基因)蛋白质的氨基酸序列参与代谢表现出特定性状DNA探针—DNA杂交DNA探针—mRNA杂交抗原—抗体杂交分子水平检