GB13091-1991 饲料中沙门氏菌的检验方法 - 下载地址.pdf

《GB13091-1991 饲料中沙门氏菌的检验方法 - 下载地址.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、免费标准下载网(www.freebz.net)中华人民共和国国家标准饲料中沙门氏菌的检验方法GB13091一91MethodfordeterminationofSalmonellainfeeds本标准等效采用国际标准ISO6579-1981《饲料中沙门氏菌检验方法》。1主题内容与适用范围本标准规定了饲料中沙门氏菌的测定方法。本标准适用于配合饲料(包括混合饲料)和动物性单一饲料中沙门氏菌的检验。2引用标准GB4789.1食品卫生微生物学检验总则3原理根据沙门氏菌的生理特性，选择有利于沙门氏菌增殖而大多数细菌受到抑制生长的培养基，进行选择性增菌、选择性平板分离，以求检出饲料中的沙门氏菌。

2、4设备和材料4.1天平:感量1g，最大秤量1000g,4.2显微镜:1500X。4.3温箱:36士1"C.43士10C。4.4冰箱:普通冰箱。4.5均质器:800010000r/min,4.6广口三角瓶:500mL.4.7三角瓶:250mL.4.8水浴锅:45士10C,55士10C,77士1'C。4.9吸管:1,5,10mL,4.10平皿:皿底直径9Cm,4.11电炉。4.12酒精灯。4.13接种棒:镍铭丝。4.14试管。4.15载玻片。4.16试管架。4.17干燥箱:50^-250士1'C。4.18乳钵。国家技术监督局1991-07-16批准1992一04一01实施.www.bzx

3、zk.com.免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB13091一914.19M度计，loono4.20高压灭菌器:2.5kg5培养墓和试荆详见附录A(补充件)。5.1缓冲蛋白陈水。5，2四硫磺酸钠煌绿增菌液。5.3亚硒酸盐肌氨酸增菌液。5.4酚红煌绿琼脂。5.5DHL琼脂，5.6营养琼脂。5，7三糖铁琼脂。5.8尿素琼A65.9赖氨酸脱狡试验培养基。5.10v-P反应培养基。5.11肌酸溶液。5.12--禁酚乙醉溶液。5.13氢氧化钾溶液。5.14靛基质反应培养基。5.15柯凡克试剂。5-16P一半乳糖昔酶试剂

4、。5.17半固体营养琼脂。5.18盐水溶液。6样品采集参照GB4789.1的要求执行。7检验程序沙门氏菌检验程序如下:.www.bzxzk.com.免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)Gs13091一91检验样品25g顶增菌培养荃〔缓冲蛋白陈水)225.L.在36-CC培养16-20h取预场曲培养物lOmL接种于四硫砚吐钠煌姆增圈液中，取预增曲培养物IO.L接种于亚硒酸盐跳氮酸增自液中，在43'C培养18-20h在36i1C培养18一24h或48h煌绿林脂(平皿)3631Y'培弃20-40h,DHL凉脂(平皿)3

5、631C培养20-24h,如有需要培养至相h如有书要，培养至48h每乎皿取5个有沙门氏留特征的自落，接种在营养旅脂上，3621℃培养18一24h生化鉴定血清鉴定结果报告8操作8.1预增菌培养取检验样品25g，加入装有225mL缓冲蛋白陈水的500mL广口瓶内(粒状可用均质器，以8000^-10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎)。在36士1℃培养16^-20h,82选择性增菌培养取预增菌培养物10mL，接种于装有100mL四硫磺酸钠煌绿增菌液的培养瓶中，另取预增菌培养物10mL，接种于装有100mL亚硒酸盐胧氨酸增菌液培养瓶中，四硫磺酸钠培养瓶在43℃培养。亚硒酸盐胧

6、氨酸培养瓶在36士1℃培养。8.3分离培养取8.2培养物一接种环，分别划线接种在酚红煌绿琼脂平皿和DEl琼脂平皿上，为取得明显的单个菌落，取一环培养物，接种两个平皿，第一个平皿接种后，不烧接种环，连续在第二个平皿上划线接种，将平皿底部向上在36士1℃培养。必要时可取8.2培养物重复培养一次。8.3门培养20^-24h后，检查平皿中是否出现沙门氏菌典型菌落，生长在酚红煌绿琼脂上的沙门氏菌典型菌落，使培养基颜色由粉红变红，菌落为红色透明;生长在DHL培养基上的沙门氏菌典型菌落，为黄褐色透明，中心为黑色，或为黄褐色透明的小型菌落。8.3.2如生长微弱，或无典型沙门氏菌落出现时，可在36士I

7、'C重新培养18.24h。再检验平皿是否有160.www.bzxzk.com.免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB13091一91典型沙门氏菌菌落。8.3.3辨认沙门氏菌菌落，在很大程度上依靠经验，它们外表各有不同，不仅是种与种之间，每批培养基之间也有不同，此时，可用沙门氏菌多价因子血清，先与菌落作凝集反应，以帮助辨别可疑菌落。8，4鉴定培养从每种分离平皿培养基上，挑取5个被认为可