基因工程复习课

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1、基因工程复习课-一操作工具及基本步月【识记】1•基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过和等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造C基因工程是在水平上进行生物设计和施工，因此又叫O2•“分子手术刀”-一,这类酶主要从分离纯化出来，他们能识别DNA的,并且使特定部位断开。DNA分子经该酶切割产生的DNA末端通常有两种形式。3.“分子缝合针”-一,根据來源不同分为和这两类酶都是将双链DNA“缝合”起来，恢复两个核昔酸间的o4•“分了运输车”一-,通常用作为载体，质粒是一种很小的o在基因工程中使用的

2、载体除质粒外述有、-5.基因工程的基本操作程序主要包括、、、四个步骤，其屮是基因工程的核心，6•目的基因主要是指,获取目的基因的方法有、7•基因表达载体构建的甘的①②,_个基因表达载体的纟fl成除了目的基因外，述必须有、以及标记基因。&冃的基因进入受体细胞内，并H在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为o将冃的基因导入植物细胞采用最多的方法是:是转基因动物屮采用最多最有效的方法，由于原核细胞有、、的特点，所以早期的基因工程祁用原核生物做受体细胞，这种转化方法为,常用处理受体细胞。【理解】8t辆白T-DNA抗

3、虫棉①Tim下图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的人致过程。请据图分析回答:H的垄因插入到染色体DNA中辎株细胞1•培育抗虫棉的操作水平、操作环境、操作的口的分别是什么？这种育种方法最人的优点?2.获取Bt毒蛋白基因常用哪种酶？该酶的主要来源、作用特点、作用部位、作用结果分别是什么？3.利用PCR技术可人量扩增目的基因，试比较DNA的复制和PCR技术，完成下表。体内DNA复制PCR技术解旋方式解旋每的作用引物类型一小段RNA片段DNA聚合酶•般遵循原则原料、模板数量增加方式4•①过程需用哪种酶？

4、上图中的Ti质粒作为载休必须具备哪些条件？该质粒上的T-DNA具有什么特点?5.①过程所构建的A中启动子、终止子的位置及功能分别是什么？标记:基因的功能是什么？6.图屮培育抗虫棉所用的受体细胞是什么类型细胞？如果培育转基因动物常用的受体细胞是什么？7•由目的基因能够插入到受体细胞染色体的DNA屮说明基因工程得以成功实施的结构基础和物质基础分别是什么？若目的基因在受体细胞中没有成功表达，可分别用什么方法检测是基因表达的哪个阶段没有正常完成？【拓展】HI外.DMA1•仔细观察下面的农格和图解，然后思考、讨论

5、有关问题限制•Bamll1HindIIIEwRISma1识别序列及切割位点gVjatccCCTAGHGA^AGCTTTTCGAfG^ATTCCTTAA^GcccVjggGGG^CC£coRI£cvR!⑴请分别写出限制酶BamHI和限制酶SmaI切割所识别的序列后的结來。⑵只用限制酶Hindlll分别切割图2的外源DNA和图1的一个环状质粒，能分别得到儿个DNA片段?⑶①基因工程中常用一种限制性内切酶切割目的基因和运载体的原因?②上图中若只用一种限制酶去切割质粒和外源DNA获取冃的慕因，应选用哪一种限制醜

6、；用DNA连接酶处理切割后的质粒和所获得的忖的基因（只考虑两两结合情况）能得到儿种环状结果？如何解决英不足Z处？③如果用不同的限制酶切割11的基因和运载体应选用哪两种醜？④切割后的11的棊因两端若带冇不同的黏性末端可否与运载体结合？其优点是?2•含匣组质粒的受体细胞的筛选问题含■环姦⑴步骤④：将三角瓶内的人肠杆菌接种到含四环索的培养基C上培养，目的是筛选o能在C中生长的人肠杆菌有种。⑵步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落

7、的生长状况如图所示。含冃的基因的菌落位于（选填“D”或“E”）上，请在图中相应的位置上圈出来。【反馈】1.基因工程中，需使用特定的限制酶切割hl的基因和质粒，便于重组。已知限制酶I的识别序列和切点根据图示判断下列操作匸确的是（）是一G'GATCC—,限制酶II的识别序列和切点是一$GATC—。注:Genel和GeneII表示两种标记基因

8、均用限制酶I切割C.质粒用限制酶II切割，目的基因用限制酶I切割D.质粒用限制酶I切割，H的基因用限制酶II切割1.质粒作为“分子运输车”的条件是（）①能够自我复制②双链环状DNA分了③冇多个限制酶切点④有标记基因⑤真核细胞屮没有A.①②③④⑤B.①②③④C.①③④D.②③⑤3•下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是（）A.需要限制酶和DNA连接酶13•必须在细胞内进行C.抗生素抗性基因可作为标记基因D.启动了位于目的基因的首端3.