莱克多巴殷检测问题探讨

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1、维普资讯http://www.cqvip.com饲料广萄2oo6年第15期27检测分析Determination肌dAnn莱克多巴股检测问题探讨于洪侠摘要：莱克多巴胺fRactopamine，Rac)是／3一兴奋剂Smith等的试验表明，停药后7d，动物尿液中中的一员，在欧盟和我国属违禁药物。笔者经过检测实践的莱克多巴胺浓度已经低于限定量(高效液相色并结合相关的文献，阐述了莱克多巴胺检测中造成酶联免谱法，检测限lng／mL)，具体数据见表1。疫吸附(ELISA)方法与确证方法符合率低的主要原因，并提出了解决方法和建议。表1停药0,3、7d后的莱克多巴胺残留

2、量t~g／kg关键词：莱克多巴胺；ELISA；色谱法动物种类及停药期组织残留肝肾莱克多巴胺与瘦肉精一样同属于一兴奋剂，我国农业部2002年176号公告将其规定为违禁药物。目前，我国已建立了莱克多巴胺检测的标准方法(GC／MS方法)，并且市场上已有商品化莱克多巴胺试剂盒出售。因此，莱克多巴胺的检测仍然遵循检测惯例。即现场试剂盒筛查和实验室经典方法确证相结合。然而，检测实践表明。筛查方法与经典方法的检测结果却大相径庭。试剂盒筛查阳性，经典方法检测却屡屡为阴性，两者的符合率仅20％50％。有些单位的检测人员怀疑试剂盒假阳性率由表1可知，莱克多巴胺的代谢速度很快。

3、太高而往往以经典方法的结果为判定依据：有些3d以后就以代谢物的形式存在了，因此，用色谱单位的检测人员明知被检样品有添加莱克多巴法很难检测到莱克多巴胺的存在：而基于抗体的胺。由于经典方法没有给出可靠的阳性数据而不检测方法由于交叉反应性的存在。能够检测到莱敢枉下结论，从而影响严格执法。可见，若以色谱克多巴胺的代谢物。因此，两者的检测结果必然法的结果作为最终的判定依据，会造成严重漏存在差异。检，使非法使用者逃脱监察，危害社会，严重损害第二。莱克多巴胺代谢位点影响了检测机构的权威性和人民的安全，后果严重。因此，有必要对此问题进行探讨。为什么出现这样的结果?这与莱克

4、多巴胺的代谢特点和抗体的特点有关。第一，莱克多巴胺代谢速度快于洪侠：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研图1莱克多巴胺分子式究所。维普资讯http://www.cqvip.com检D测e招九分7析nA咖28钢姆广萄20064s~15期试验表明，莱克多巴胺在10和1O位置(图例如：Shelver等以动物(牛)尿样为分析对1)的酚羟基偶联上糖苷键代谢(Dalidowicz和象．检测药物处理结束时Od的莱克多巴胺残留Smith等)。代谢物主要为莱克多巴胺葡萄糖苷结果，ELISA为487ng／mL；LC—MS—MS为280ng／酸。莱克多巴胺抗体对两种代谢物的交

5、叉反应性mL。停药后3d，莱克多巴胺残留结果，ELISA为不同，对1O位的糖苷键代谢物的交叉反应性很387ng／mL；LC—MS—MS为18ng／mL。停药14d后，高，最高达384。由于代谢位点的不同，必然影响只有一例达到ELISA的检测限，色谱法已经检测莱克多巴胺的检测结果不到莱克多巴胺。由此可见，ELISA值总是高于第三，莱克多巴胺抗体对代谢物的交叉反应LC—MS—MS值。性高综上所述，在进行莱克多巴胺检测时．一定Smith等的结果表明，莱克多巴胺抗体对莱要注意莱克多巴胺检测的特殊性，其与克仑特罗克多巴胺的代谢物有交叉反应．且对莱克多巴胺以及其他违禁

6、药物的检测有着很大的不同．其他葡萄糖苷酸C的交叉反应非常高，单抗交叉反应违禁药物都执行ELISA筛选和色谱法确证相结性达到384。当然，不同来源的抗体其交叉反应性合的检测方式，目前都有很好的符合率，但由于不同，有的抗体其交叉反应性较弱(表2)。莱克多巴胺的特殊性，ELISA和色谱法的检测结果差别很大。实际检测中色谱法经常出现漏检。表2莱克多巴胺抗体对3种代谢物的交叉反应性为避免漏检的发生，根据莱克多巴胺代谢和代谢物IC50~(ng／mL)交叉反应性／％检测的特点．建议采取以下措施：莱克多巴胺葡萄糖苷酸A多抗155单抗263多抗2．7单抗1莱克多巴胺葡萄糖苷

7、酸B多抗>1000单抗87．8多抗<0．1单抗3．1(1)在色谱法中增加对莱克多巴胺代谢物莱克多巴胺葡萄糖苷酸C多抗16．2单抗0．7多抗26单抗384的检测。以莱克多巴胺的代谢物标准为目标物，建立莱克多巴胺代谢物的色谱学方法．确定最佳此3个特点是导致莱克多巴胺检测时筛选检测条件。这样可避免漏检，保证确证的准确性。和确证符合率低的主要原因。检测中显示以下特(2)将莱克多巴胺代谢物水解成游离的莱点：即ELISA检测结果总是高于色谱法．并且在克多巴胺，再行检测。这一方法是用葡萄糖苷酶代谢物未完全排出之前，随着停药期的延长．差在一定条件下处理样品．目的是将样品中

8、的莱克别愈加显著。多巴胺代谢物(葡萄糖苷一莱克多巴胺偶联物)分原因