生物选修3动物细胞工程

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1、［动物细胞工程］包含次级知识点：体细胞核移植的过程、体细胞核移植的技术的应用前景、体细胞核移植技术存在的问题知识点总结1.动物核移植:是将动物的一个细胞的细胞核移入一个去核的卵母细胞中，使其重组发育成一个新的胚胎，这个胚胎最终成为动物个体。又分为胚胎细胞核移植（易）和体细胞核移植（难）。母羊B2.下图所示为体细胞核移植的过程（以多利羊产生为例）母羊A▼卵细胞乳腺细胞体外培养成早期胚胎母羊c胚胎发E克隆羊一多利（代孕母亲怀孕）3■应用前景(1)在畜牧生产中:可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁殖(1)在保护濒危物种方面:可增加这些动物的存活数量。(2)在医药卫生方面:转基因克

2、隆动物可以作为生物反应器生产珍贵的医用蛋白。(3)在治疗人类疾病方面:转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异种移植的供体。(4)人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应组织、器官后，可以用于组织器官的移植(5)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。4.存在问题⑴成功率低。(2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。(3)克隆动物食品的安全性存在争议。［动物细胞工程］包含次级知识点：动物细胞培养的过程、动物细胞培养的条件、动物细胞培养的应用知识点总结、动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞

3、培养是基础。二、动物细胞培养概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。培养的条件1•无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。2.营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等）3.血清和血浆（提供细胞生长必须的营养成份）4•温度和pH（36.5±0.5°C,7.2~7.4）4.气体环境（95%的空气+5%CO2的混合气体）其中5%CO2气体是为保持培养

4、液的pH稳定基本过程取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来，形成生长晕并增大以后，科学家接着进行传代培养，即将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。通过一

5、定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性，即癌变。此时的细胞被称为细胞系。技术应用1•生物制品的生产（如制备单克隆抗体）2.转基因动物的培养3.检测有毒物质并判断其强弱4•医学研究（生理病理药理）5.器官移植培养6•筛选抗癌药物［动物细胞工程］包含次级知识点:动物细胞融合、单克隆抗体的制备、单克隆抗体的应用知识点总结一、动物细胞融合1.概念：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，又称细胞杂交。2原理：细胞膜的流动性。3•诱导方法：物理

6、法——离心、振动、电激;化学法聚乙二醇;生物方法——灭活的病毒。4•动物细胞融合的过程（如下图所示）5•优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。6•植物、动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞樂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性，植物细胞全能性细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分我后诱导细胞融合诱导方法物理〔离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）物理、化学方法（同左）灭活的病毒用途获得杂种植株主要用于制备单克隆抗体7•已成功的动物细胞融合实例生物种类细胞来源成功年代酵母菌-鸟原生质体Ttn红细胞1975年人我萝卜腹水癌细胞令生质

7、体1976年人T、鼠纤维肉瘤细胞陶胎瘤细胞1978年二、单克隆抗体1•概念：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。2特点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高，可大量制备。3•制备过程（如下图所示）将特定的抗原注入小鼠•••.骨髓瘤细胞:还能在HAT••培养基上生长）某些淋巴细胞合，转到HAT（产生特定抗体）培养基上培养杏融合•“细胞死亡杂交瘤细胞生长杂交瘤细胞分开培养选育出产生高特异性抗体的细胞在制备单克隆抗体时，需经两次筛选，但目的不同。（1）第一次