基因工程的一般过程(1)

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1、基因工程的一般过程与技术（1）学习目标知识与技能1•简述基因工程基本操作程序，以及各步骤的一般方法、原理。二八过程与方法1.通过具体的情境，引导学牛在思索和探究中学习新知识。2.充分利用图片、动画等肓观教学手段，结合模拟实验的动手操作，准确理解基因工程的一般过程。三、情感.态度与价值观1•认同量因工程的基本操作程序以及各部骤的一般方法、原理。课前导学（2）基因工程的一般过程（一）获取冃的基因：可以通过获取冃的基因，又可以通过扩增目的基因，还可以通过直接人工合成。1.通过基因文库获取冃的基因（1）基因文库：将含有某种生物不同

2、基因的许多DNA片段，导入受体细菌的群体中储存,各个受体菌分别含冇这种生物的（不同/相同）基因，称为棊因文库。（2）构建基因文库：厂首先：用适当的方法将某一种生物细胞的切割成大小合适的片段，并J将这些片段与合适的载体进行体简述外重组；I其次：将璽组DNA分了转入相应的宿主，通过使DNA片段扩增；j最后：形成含有人量重组体的群体。1、从基因文库中得到H的基因的方法：根据基因的、基因的、、以及基因的等信息，可以直接从基因文库屮获得目的基因。「原料:I过程:2.通过PCR技术扩增冃的基因：PCR技术又称为技术，模板DNA、引物、4

3、屮脱氧核糖核廿酸、耐热DNA聚合酶（Taq酶）。f®变性：加热使模板DNA在高温下（90-95°C）变性，双链间的氢键断裂成两条单J链。［②退火：使溶液温度降至55-60°C,模板DNA与引物按碱基互补配对原则结合延伸：溶液反应温度升至70-75°C,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物屮的4种脱氧核廿酸，按5,—3,方向复制岀互补DNAo在90~95°C下DNA片段变性在55~60°C下.引物与模板结F图解:在70〜75°C.'互补链不断延伸

4、I3.通过化学方法直接人工合成：比较小的目的基因

5、可在了解DNA分子核昔酸序列的棊础上通过DNA合成仪肓接人工合成。（二）制备重组DNA分子：1.目的：是目的基因在受体细胞屮稳定存在，并且可以遗传至下一代，是目的基因能够表达和发挥作用。2.组成：甘的基因+++标记基因快生执性MW>总绞记基即了//II止子②.用DA连接稿连接目的基因和载体。（1）启动了：位于II的基因上游的一段核昔酸序列，它本身不控制基因的活动，而是RNA聚合酶的和位，其与RNA聚合酶结合后驱动基因的转录活动，并引起相应蛋白质的合成。（2）终止了：载体中终止过程的核昔酸序列。（3）标记基因：为了鉴定受体

6、细胞中是否含有目的基因，从而将含冇冃的基因的细胞筛选出來。常用的标记基因是抗生素抗性基因。1.构建重组DNA分了的步骤：①.用同•种限制酶切割载体和含目的基因的外源DA。质疑探究1・1个冃的基因通过PCR技术扩增循环n次，可得到多少个冃的基因？个。2.PCR技术与DNA复制有哪些不同点和相同点，尝试用表格进行归纳。比较项目PCR技术DNA体内复制异环境步骤解旋方法酶引物引物是否去除否是同利用4种脱氧核糖核廿酸，按照5,-3’的顺序合成DNA单链3•作为目的基因的表达载体，为什么需要带有选择标记基因？2.启动子和终止子在基因

7、的表达过程中的作用与遗传密码子中的“起始密码子和终止密码子”的有何区别？3.H的基因和载体被限制酶切割麻，可以形成哪几种连接片段?反馈矫正1.下列关于基因工程的叙述小，不正确的是（）A.重组DNA是在体外进行的B.棊因工程又叫做重组DNA技术C.基因工程是现代牛物技术的核心D.基因工程的受体细胞必须是大肠杆菌等原核牛物2•下列获取目的基因的方法中需要模板链的是（）①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.①③B.①②③C.②③D.②1.在基因工程屮，把目的基因（共1000

8、个脱氧核廿酸对，具屮腺嚓吟脱氧核卄酸460个）放在DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞唏喘脱氧核昔酸的个数是（）A.540个B.8100个C.17280个D.7560个2.在已知小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A.MJmRNA为模板逆转录合成DNAB.以4种脱氧核卄酸为原料人工合成C.将工体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选D.由蛋口质的氨基酸序列推测mRNA不正3.PCR技术通过对口的基因进行扩增，可以得到大量的口的基因，下面对该技术的叙述,确的是（A.遵循的基本原理是DNA半保留复制

9、和碱基互补配对B.扩增仪内必须加入引物、原料和DNA聚合酶C.每扩增一次，温度都要发生90°C->75°C->55°C的变化D.成指数式扩增，约为2“（n为扩增次数）4.下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是TjrfMDNAA.a通常存在于细菌体内，H前尚未发