实验2样品中化学成分系统预试和单项预试

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1、实验2植物体中化学成分的单项预试与系统预试一、实验目的与要求1.学习和掌握预试的程序和方法，并对预试结果能正确地进行初步判断。2.通过预试初步了解植物中化学成分，有利于正确设计某种成分的提取分离方案。二、基本原理植物体小所含的化学成分很多，在提取分离Z前，一般先进行预试,初步了解其屮可能含有的各类成分，有利于正确设计提収分离方案。为了全面了解各类成分在植物体中的存在状况（如资源植物化学成分调查），可进行系统预试。有时根据实际需要对进行单项预试。如为了寻找馆体激素原料，就可只进行馆体皂甘及其昔元的定性反应。在

2、实践中一些植物材料如屮草药等可能己被制成一定制剂，则可根据制剂方法选择性地进行某些成分的预试,如用水蒸汽蒸谓法制成的有效制剂,可主要进行挥发油、内酯成分预试；用水煎酒梢沉淀法所制成的制剂，町不必再进行蛋白质、多糖成分的预试。在预试实验中，-•般利用各类成分的化学特征反应现象来鉴别。实验现象包括颜色动态变化、沉淀反应、放出气体反应快慢等，可使用试管法试验来进行，也可采用层析法（PC、TLC）在分离的基础上进行反应。前者样品用量稍人，简单易行，反应明显，不需特殊设备，但反应现彖冇时不易观察准确。后者方法简便，快

3、速、用量少，比较灵敏；rti于多种定性试剂都有例外情况，植物化学成分的复杂性和相互干扰,提取液颜色深，使显色反应不易观察，以及检测方法的灵敏性等问题，因此往往根据初步预试结果完全肯定或否定某种成分的存在与否是不全面的。三、仪器与试剂1.仪器：试铮滤纸简易水蒸汽蒸锚装置〔冷凝器、蒸憎烧瓶、接收器），分液漏斗，锥形瓶,水浴锅，紫外灯，阿贝折光仪，载玻片，硅胶薄层，培养皿2.试样与试剂：乙醇，乙醯，甲醇，改良碘化钮钾试剂,4%NaOH乙醇,2%3,5-二硝基苯甲酸乙醇液，1%醋酸镁甲醇，1%A1C4溶液，3%Fe

4、Cl3乙醇液，5%K0H溶液，5%氢氧化鞍，5%磷钳酸乙醇溶液（新配制）,异创亏酸铁试剂（包括I、11、III）,邻苯二甲酸-苯胺试剂，1%氯化诙溶液，1%铁氧化钾水溶液，1%甲基红乙醇溶液，0.1%甲基橙水溶液，0.05%漠酚蓝乙醇液，0.2%即三酮溶液,3%碳酸钠,新制重氮化试剂,10%NaCL,10%白明胶,澳水,新制石灰水，酷酸，酷酸铅，盐酸，碘化汞钾试液，硅鸭酸试剂，新制碱性洒石酸铜试剂，10%HCl,5%a-蔡酚乙醇溶液，2%红血球悬浮液，1.8%NqC1水溶液，醋阡，氯仿，浓硫酸，5%氢氯化钠

5、溶液，5%盐酸溶液，三氯化锤的氯仿饱和溶液，浓盐酸，镁粉，醋酸铅（饱和）溶液，1%醋酸镁甲醇溶液，碱性苦味酸试液，NaOH饱和乙醇液，0.5%硫酸铜溶液，5%硫酸，无水硫酸钠四、实验内容与步骤1.预试样液制备记录待预试植物材料的来源、收集吋间、生境状况、待检测部位、有关学名及特征（如色泽、气味等），将预试材料研成粗粉过20目筛（如为新鲜样品，愆吋高温使臨失活（105°C/1-2min）后在50-60°C烘48h）。（1）水浸液：収待试植物粗粉2g,加入20mL水,室温浸泡过夜，滤取10mL滤液供检试氨基酸、

6、多肽和蛋白质等,余液及残渣在50-60°C水浴上温浸0.5h抽滤，滤液供检试单糖、多糖、皂苜、芹类、酚类、有机酸、糅质等成分。也可用水预先润湿lh后，在超声波条件下促提2次，每次10血,振荡0.5ho⑵乙醇提取液：取植物粗粉5g,加95%乙醇约50mL,水浴上回流15min,过滤滤液浓缩至1/2,—部分供检测黄酮、蔥醞、香豆素、强心廿、讷类、内酯、幽体化合物等项预试。一部分继续浓缩至糖浆状物以2%HC110汕溶解成酸液，供检试酚类、冇机酸、生物碱等。⑶乙讎提取液：对于植物色索较多的材料若进行挥发油及脂类检试

7、，可进行如此处理。取粗粉5g,加乙瞇50mL,水浴回流20min,过滤，滤液浓缩至5mL,供圆形滤纸层析法检查内酯、汕脂、游离香豆素、游离黄酮、游离蔥服和挥发油。⑸甲醇提取液：乙瞇处理过的材料,用甲醇20讥水浴回流10min趁热过滤，供检测黄酮营、恿:醞昔、强心甘和香豆精昔等。2.圆形滤纸层析法预试（根据具体情况采用乙醇提取液、水提取液或乙醯提取液）取直径12cm的圆形层析滤纸一张，在距中心l-2cm处用毛细管绕中心圆周等分点8-10个样点，样点直径人小为3rnni左右,溶剂挥T•后，在滤纸中心穿一纸芯,在

8、盛有展开剂的培养皿中进行层析，上面覆盖一只同样大小的培养皿。展开后，取出滤纸，待溶剂挥干后将滤纸沿虚线剪开，各喷以不同显色剂，检测各类成分的存在与否。展开剂为甲醇,95%乙醇或甲苯等。⑴挥发汕的检查首先观察滤纸上有无油迹样斑点，加温烘烤时若油迹消失,证明有挥发油，若未消失，需用试管法进一步确证。为进一步检查，可用石油瞇：乙酸乙酯（95:5）展开乙瞇提取液，喷以新配制5%香兰醛浓硫酸溶液，如在斑点上出现黄色、棕色、