亚精胺对小麦离体叶片衰老过程中过氧化物酶的影响

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1、维普资讯http://www.cqvip.com亚精胺对小麦离体叶片衰老过程．中过氧化物酶的影响THEEFFECT0FSPERMIDIM．EON眦PER0ⅪDASEOFTlIE、vHEATINVITR0BLADESINDECLINEPHASE段辉国—‘‘。H‘。‘。u。—i—~uo(内江高等师范专科学拉生物系．内江641002)(DeptofBmlogy．Ne~iangTeachersgoIloge．N1arIg641002)摘要小麦离体叶片衰老过程中，过氧化物酶活力随之增加，36h达到最大值，以后缓慢下降过氧化物酶同工酶谱带数无变化，但谱带强度有变化，其趋势与其活力变化一致；亚精胺(spd

2、)能显著抑制小麦离体叶片衰老过程中氧化物酶活性的增加，井使其同工酶谱带数减少关键词兰堕璺塞耋，苎兰丝鲨分类号Q945畸}fABSTRACTWhenthewhealhwitrobladesooi21etothedeclinephase，perox[daseacPsmo『eactivelyand。merstomaximum[rt36hoursandthendecliness~eadlh．Thebandnumbersofpemxtdaseisoet~srmesr锄8jnthey,a／lle，whiletheintertsltyofbandsvary，withtheirvar[atiortaccor

3、dingwiththeactivitySpen'oidinecandistinctlychecktheincre~-,eoftheact[~Sty0fpemxidaseofthewheat[nvitmbladesinthedev,ltnephase，hencethedeclineofbandrtttmhersofisoenzymes．1ieYWORDSspermidine，Sen(~42eDce．peroxidec~e多胺是一种新的植物生长调节物质，广泛存在于各种高等植物中I_，亚精胺是其中之一．叶片衰老是基因在环境条件影响下顺序表达引起的一系列生理生化的衰老过程，酶活性的变化，特别是过氧化

4、物酶活性的升高是衰老的明显特征，可以作为衰老的指标L3】．目前已有较多的研究表明，多胺能延缓离体叶片的衰老，但有关多胺对叶片衰老过程中过氧化物酶的影响，特别是SN阻止过氧化物酶的方式研究得很少本文以小偃六号小麦离体叶片为材料，用亚精胺结合转录和翻译抑制剂及阳离子(一进行处理，对离体叶片衰老过程中过氧化物酶活性、谱带的动态变化进行研究，为进一步认识有关叶片衰老过程中过氧化物酶的变化和多胺抑制叶片衰老的机理，探索多胺及其类似物的应用提供一些基础资料．收口蝴l99802．16维普资讯http://www.cqvip.com332四川师范学院学报(自然科学版)1998矩l材料与方法1．1材料的培养及

5、处理小偃六号小麦种子(购于西安市种子公司)于加％的安替福民消毒30rain，流动水冲洗约2h，消毒种子置25℃恒温箱中萌发24h后，播于尼龙网上，置光照室生长，光强约2500lx，每日光照15h，日温25±2℃+夜温18±2℃．第9天上午剪取生长整齐的幼苗第一叶中段4．5Ci21，剪成约0．4crn的小段，漂于盛有】5mL试液，直径7cm的培养皿中．对照液为1mmol／L，pH6．9的磷酸缓冲液；Spd处理液为对照液含lflarnol／L的Spd(Fluka产品)溶液，亚胺环已酮((CHM)(10“g／mL)一．、事5-氟．尿求、嘧s啶寸一蝗蠹霹窜噼(5一Fu)(10pg／mL)、c(10r

6、mnol／L)处理液及其与Spd配合处理液亦用对照液配制．置培养皿于25℃的恒温箱中进行暗培养．动态变化于0，12，24，36，48，72h取样，CHM，5一Fu，ca2处理及其与spd配合处理于36h取样进行活性测定及同工酶凝胶电泳分析1．2过氧化物酶活性测定以lg鲜重加入0．01L-预冷的0．2mol／L，pH6．0的磷酸缓冲液，冰浴研磨，0℃下．10000r／rain离心20min，上清液立即用于测定过氧化物酶的活性，其方法按文献(4)中的进行．用721分光光度计于470nm处测定吸光度(A)值，酶活性以△A470／~·g鲜重表示．1．3过氧化物酶同工酶电泳样品制备：提取液为稀释l0倍

7、的电极缓冲液与40％蔗糖溶液1：1的混合液，材料在一2(】℃低温冰箱中固定后，以lg鲜重加入4mL提取液，冰溶研磨后于0℃，10000r／min离心20rain，上清液用于电泳．电泳：用垂直平极型电泳，分离胶浓度为7．5％，间隔胶为2．5％，点样量为l5，电流强度在间隔胶为20mA，分离胶为4OmA，在4℃的冰箱趔中电泳约3h妲染色：按吴少伯[5]的方蝗法进行．逝霹扫描：用岛津双波长扫珥描仪进行．波长为470