资源描述：
《小球藻共栖优势菌株ZTG-04菌株对小球藻的生态学效应》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、小球藻共栖优势菌株ZTG-04菌株对小球藻的生态学效应1前言微藻种类繁多，微藻细胞屮含有：蛋白质、脂类、藻多糖、卩■胡萝卜素、多种无机元素(如Cu,Fe,Se,Mn,Zn等)等高价值的营养成分和化工原料。微藻的蛋白质含量很高，是单细胞蛋fi(SCP)的一个重要來源。微藻所含的维生素A、维生素E、硫氨素、核黄素、毗多醇、维生素Bm、维生素C、生物素、肌醇、叶酸、泛酸钙和烟酸等增加了其作为SCP的价值。我国从1958年开始培养藻类作为食品和饲料，先后进行了栅藻、小球藻、扁藻、褐脂藻和螺旋藻等的大量培养，建立了培养池，总结出一套可行的培养方法，为我国的微藻生产打下了基础。迄今，我国已分离出一大
2、批可用于大量生产的藻种，掌握了生产技术，在藻种选育、培养基配制及某些培养技术方面，已达到或接近国际水平。微藻的应用也从最初的食物来源拓展到医药、工业和生态修复等多个领域。小球澡(Chlo花Uavulgaris)为绿藻门单细胞藻类，是第一种人工培养的微藻。小球藻光合效率高，含有丰富的蛋口质、氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、矿物质和色素等，具有极其丰富均衡的营养成分和优良的医疗保健作用，并且在污水处理，以及保健食品、水产养殖饵料、畜牧饲料添加剂的生产等方面也被广泛应用，是一种重要的微藻资源。ZTG-04是一种从小球藻藻际屮分离的共栖异养优势菌株，通过梅里埃VITEK2Compact全白动细菌鉴
3、定系统鉴定不属于任何已知属种，它的菌落呈现浅绿色，不透明，表面光滑、微凸、外形规则，边缘整齐，圆形，属于革兰氏阴性菌，并且它有非常高的置信度(概率为97.0%),经过本试验室的研究，发现它拥有跟其他革兰氏阴性菌一样的特性，自发产生和释放一些特定的信号分子，当信号分子达到一定的浓度阈值时⑴，能启动菌体中相关基因的表达来适应环境变化，调节微生物的群体行为⑵,这种调控，被称为群体感应(quommsensing,QS)。革兰氏阴性菌的群体感应一般都是由LuxR/I型信号系统调控，并以酰基高丝氨酸内酯类分子(AHLs)作为自体诱导物⑶⑷。冃前己知qs系统能够调控细菌的多种生理生化功能如生物发光，抗
4、生素合成，固氮基因调控，Ti质粒的接合转移，致病基因的表达，群游现象和生物膜的形成等⑸⑹。优化组合饵料微藻与异养细菌，发展微生态制剂，是当前生物控制技术的一个研究方向，所以研究藻菌之间关系成为现在水产方面的热门课题。微藻藻际（phycosphere）细菌与微藻之间既有互利关系⑺也有扌吉抗关系⑻。在本文的研究中，从小球藻藻际中分离出ZTG-04菌株，对小球藻与这株共栖优势菌株的相互作用进行了初步探讨，并采用高效报告菌株AgrobacteriumtumefaciensKYC55检测小球藻对藻际异养细菌ZTG-04菌株AHLs信号分子活性的影响，旨在改进优化藻菌组合，为发展微生态制剂产业提供理
5、论依据。由于小球藻的巨大经济和营养价值以及藻菌之间的密切关系，对小球藻与ZTG-04菌株之间关系的研究可以促使我们深层次的了解海洋生态系统的能量流动和物质循环机制，同时应用这种藻菌关系为我们在养殖生态系统中调控水产病害，开发优质饵料资源提供了新的途径。2材料与方法2.1试验材料2.1.1菌与藻的来源小球藻：小球藻由中国海洋大学水产学院藻种室提供。菌种：ZTG-04菌株系木试验室自小球藻培养液中分离纯化所得；根癌农杆菌A.tumefaciensKYC55（pJZ372/pJZ384/pJZ410）是一种高敏感性的群体感应信号分子（AHLs）牛物检测菌株，其显色原理是基于0•半乳糖昔酶法，可
6、较广泛地检测出5nM级以上的AHLs型信号分了。A.tumefaciensRIO（pCF218,含traR基因，具四环素抗性）是一种过量表达信号分子的阳性对照指示菌，其主要产牛OOHL和少量其他的AHLs分了，包括3・oxohexanoyl・HSL和octanoyl・HSL。这两种菌株由南京农业大学朱军教授提供。2.1.2药品与试剂f/2培养液：硝酸钠225mg，磷酸二氢钠13.2mg,微量元素。f/2微量元M：Zn2SO423mg,CuSO4.5H2O178mg,柠檬酸钠3.9g,釦酸钠7.3mg,乙二胺四乙酸钠4.35g,氯化钻12mg,纯水1000mLof/2维生素：VBi20.5
7、mg,VB
8、100mg,VH（生物素）0.5mg,纯水1000mL。2216E培养基：酵母膏1.0g,蛋白腺5.0g，磷酸高铁0.1g,琼脂20.532g，陈海水1.0L,用1MNaOH调节pH至7.6（注：液体培养基不加琼脂，其余组分相同）。LB培养基（含1pg/mL四环素）：蛋白月东30g,酵母浸粉15g,NaCl30.0g,PH调至7.2,蒸偲水3L。AHLs活性检测用AT培养基:20xATbuffer50mL,20xATsa
