新课标生物选修3知识点

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1、生物选修3知识点专题1基因工程1基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,乂叫做DNA重组技术。2基因工程的理论基础:①各种的牛物的DNA的基本结构相同②各种生物共用-•套密码子3遗传学原理:基因重组4基因工程的优点:目的性强,周期性短,打破生殖隔离的界限缺点:只生产自然界已有的蛋白质1•“分子手术刀”——限制性核酸内切酶邙艮制酶)(1)(2)(-)基因工程的基木工具來源:主要是从原核生物屮分离纯化

2、出來的。功能:能够识别双链DNA分子的某种睦定的核廿酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苜酸Z间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)2.“分子缝合针”(1)两种DNA连接酶(E・coliDNA连接酶和hDNA连接酶)的比较:结果:经限制酶切割产生的DM片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。DNA连接酶①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别:E・coliDXA连接酚來源于T』噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端Z间的磷酸二酯键连接起来;而TQNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的Z间的效率鮫低。(2)与DA聚合酶作用的界同:DA聚合酶只能将里

3、仝妙酸加到己有的核甘酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。项目DNA连接酶DNA聚合酶相同点催化两个脱氧核背酸之间形成磷酸二酯键不占模板不需模板需要DNA的一条链为模板作用对象游离的DNA片段单个的脱氧核甘酸作用结果形成完整的DNA分子形成DNA的-条链3.“分子运输车”——(运)载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入°③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择°(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复

4、制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:入噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基木操作程序第一步:目的基因的获取1从基因文库中获収目的基因:1、基因组文库2、部分基因文库(如cDNA文库)2.PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)前提:根据己知的目的基因的核廿酸序列合成引物(3)过程:笫一步:加热至90〜95°CDNA解链:第二步:冷却到55〜60°C,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70〜75°C,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。(4)条件:模板DNA、引物、热稳定DNA聚合酶、4种脱氧核甘酸、ATP3.用DNA合成

5、仪人工合成(基因比较小,核昔酸序列又已知;不需耍模板)第二步:基因表达载体的构建(基因工程的核心)1.目的:使口的基因在受体细胞屮稳定存在,并且可以遗传至下一代,使H的基因能够表达和发挥作用。2.组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因(1)卅动了作用:驱动慕因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。(2)终止了作用:终止转录(3)标记基因的作用:是为了鉴定受休细胞屮是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出來。常用的标记基因是抗生素基因。(4)目的基因:编码出人们所需的蛋白质基因表达载体的构建也会有所并别,不可能T•篇一律第三步:将目的基因导入受体细胞1

6、•转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2.常用的转化方法:1、将FI的棊因导入植物体细胞:采川最多的方法是:农杆菌转化法,(自然条件下感染双了叶植物和裸了植物;当植物体受到损伤时,菌Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞,整合到受体细胞的染色体DNA上)其次还有基因枪法和花粉管通道法等。2、将冃的基因导入动物细胞:最常用方法是_显微注射技术,受体细胞多是受精卵。3、将Id的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是人肠杆菌,其转化方法是:先川Cd*处理细胞,使其

7、成为感受态细胞,再将重纽表达载体DNA分了溶于缓冲液屮与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步:目的基因的检测和表达1.白先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法:DNA分子杂交技术。2.其次检测目的基因是否转录岀了mRNA,方法:分子杂交技术。3.故后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法:进行抗原一抗体杂交。4.有时还需进行一个体牛物学水'卜的鉴泄。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。(三)基因工程的应用1.植物基因工程:

8、抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因

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