生物选修三知识点梳理

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1、生物选修三知识点梳理福建省厦门双十中学余灵昊专题一：基因工程収叫DNA重组技术）1.实现基因工程的技术：体外DNA重组和转基因2.操作水平：DNA分子水平第一节：DNA重组技术的基本工具一、限制性核酸内切酶1.来源：主耍是原核生物2.作用特点：能识别双链DNA分子的某种（不仅限于一种，如：）特定核廿酸序列，并fL使每条链中特定部位的两个核苛酸间的磷酸二酯键断开3.用途：切割DNA获取目的基因，切割载体4.切割得到的末端有黏性末端和平末端两种形式二、DNA连接酶1.作用对象：DNA片段2.分类：甲.从大肠杆菌中分离得到的EcoliDNA连接酶特点：

2、只能连接互补的黏性末端乙.从T4噬菌体中分离出来的T4DNA连接酶特点：既可以连接黏性末端又可以连接平末端但连接平末端效率低DNA连接酶作用无专一性要求三、载体1、作用：将目的基因送入细胞2、分类：甲：质粒乙：噬菌体衍牛物丙：动植物病毒3、质粒特点：裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并且具有自我复制能力的双链DNA分子4、作为运载体的条件甲：在宿主细胞中能保存下来并大量复制乙：有一个至多个限制酶切割位点（作用：供外源DNA片段插入其中）丙：有某种标记基因（抗性基因、绿色荧光蛋白基因或其他产物有特殊颜色的基因）第二节：基因工程的基本操作程序

3、一、四个步骤冃的基因的获取、基因表达载体的构建（基因工程的核心）、将冃的基因导入受体细胞、冃的基因的检测与鉴定二、具体内容甲、目的基因的获取：获取目的基因的方法：1、从基因文库中获取目的基因分类：基因组文库、部分基因文库根据2、利用PCR技术扩增冃的基因原理（特点）前提原料过程3、人工合成条件9、基因表达载体的构建1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并H可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用2.组成：日的基因、启动子、终止子、标记基因启动子（有特殊结构的DNA片段），作用：是RNA聚合酶识別和结合的位点，驱动转录标记基因的作用：鉴别

4、并筛选含目的基因的受体细胞丙：将日的基因导入受体细胞转化的定义：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程1•将目的基因导入植物细胞大题问题汇总：专题一：基因工程：1、冃的基因之所以能插入到转基因牛物的染色体DNA±,其原因是：基因的组成、碱基配对方式和空间结构是相同的、用同一种限制酶对两者进行切割，产生相同的黏性末端2、不同生物基因可以拼接的结构基础是：DNA结构基本相同3、一般情况下，未经Ca2+溶液处理的大肠杆菌不作受体细胞的原因：未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱4、PCR过程屮所用的酶（Taq酶）的显著特

5、点是：耐高温5、培养选择过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件：具有标记基因；能在受体细胞中复制并稳定保存6、DNA分子杂交技术中应用：用放射性同位素或荧光分子标记的含有目的基因的DNA单链（片段）作探针7、hl的基因不一定能从cDNA文库中得到的原因：cDNA是由生物发育某个时期的mRNA逆转录产生的8、PCR过程中退火温度设定必须根据：引物的碱基数量和种类9、含目的基因的DNA片段和质粒表达载体用单酶切处理，并用DNA连接酶连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有：目的基因•载体连接物、载体•载体连接物、目的基因•目的基因连

6、接物3种10、微生物在基因工程屮有哪些重要作用：工具酶主要来白微生物；最重要的冃的基因供体库Z目的基因的载体Z-；作为受体细胞；提供用于发酵的工程菌11、PCR反应体系的主要成分应包括•：扩增缓冲液；水；dATP/dGTP/dCTP/dTTP；Taq酶（热稳定DNA聚合酶）；对目的慕因特异性的DNA引物对12、启动子的作用：提供RNA聚合酶识别和结合的位点；驱动皋因转录出mRNA13、将日的基因导入愈伤组织细胞与采用叶肉细胞相比，其优点是：全能性高14、基因治疗就是把健康的外源基因导入：有基因缺陷的细胞15、检测大肠杆菌（受体细胞）是否导入了质粒

7、或重组质粒，可釆用的方法是：将大肠杆菌（受体细胞）培养在选择性培养基上，能够生长的，说明己导入了质粒A和重组质粒16、目的基因通过一定的途径整合到水稻的基因组中，也不一定会表达，其原因最可能是：目的基因受到转基因生物中相邻基因的影响（X：整合到转基因生物基因组的目的基因被转基因生物的某种酶破坏了）17、冃的基因在转基因牛物细胞中成功表达的标志是:在转基因牛物的细胞中合成冃的基因翻译产物18、两种不同的限制酶酶切后的产物可以连接的原因是：两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端（或平末端）19、设计双酶切的目的：保证目的基因和载体定向连接，防止目的

8、基因或质粒自身环化20、个体水平的检测方法（以抗虫基因为例）：分别向生长状况相同的转基因棉花和普通棉花接种相同等量棉铃虫观察棉花受害情况