基因工程学终版

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1、基因研究三阶段：①染色体遗传学阶段：从细胞染色体水平上进行研究②分子住物学阶段:从DNA大分子水平上进行研究③反向牛•物学阶段：直接从克隆目的基因出发，研究基因功能及其与表型关系基因：是DNA上某一特定的可以编码具有某种牛物学功能物质的核晋酸序列0基因的特点：1，不同棊因的具冇相同的物质基础2,遗传密码通用3,基因町切割4,基因可转移5,多肽与基因Z间存在相应关系6,基因通过复制将遗传信息遗传给下一代。基因工程：在体外将核酸分子进行剪切，重组，连接然后插入病毒质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使Z参入到

2、原先没冇这类分了的寄主细胞内，而能持续稳定的繁殖。基因工程的特点：1,跨物种性，外源基因在另一生物细胞内繁殖2,无性扩增，外源基因DNA在寄主细胞内大量扩增和高水平表达。核昔：由一个戊糖和一个碱基缩合而成的核昔酸：由核昔中的戊糖的怪基与磷酸基缩合而成磷酸酯，它是构成核酸基本单位顺反子：是-•段核苜酸序列，或者说相当于一个基因的DNA或RNA单元，它编码一种完整的多肽链编码区：含有大量的可以被细胞质中转译机器阅读的遗传密码，包括起始、终止密码子非编码区：对于基因遗传信息的表达是必要的，但它们不会被转译成多肽序列启动

3、子：位于基因5’端上游外侧紧挨转录起始点的一段非编码区的核营酸序列，功能■引导RNA聚合酶同基因正确部位结合终止子：位于基因3’端下游外侧一段非编码的核背酸序列，功能-具转录终止信号功能真核生物和原核生物编码基因产物区别：①真〜的基因都是以单顺反子形式存在，因此它们编码的也是单基因产物②原〜的基因是以多顺反子的形式存在，意指一个mRNA分子编码多个多肽链，这些多肽链对应的DNA片段则位于同一转录单位内，亨川同一对起点和终点分子探针：是一种带冇高比活性放射性标记的并H•只能同冃的基因特定序列作碱棊配对RNA或DNA

4、分子，它们同冃的基因杂交后，可通过放射口显影技术检测出来，从阳达到分离基因的冃的分离基因的方法：包括生物化学和遗传学方法，核酸杂交以及核酸内切限制酚切割法等。一般用基因克隆的技术和PCR技术。移动基因：乂叫转位因子，由于它可从染色体基因组上的一个位置转移到另一个位置，冥至在不同的染色体间跃迁，因此称为跳跃基因，乂分为插入序列、转位子、复合转位子插入序列：分子量小于2000bp的(IS因子)断裂基因：编码序列不连续的间隔基因RNA剪辑：先转录成初级转录物，然后经过删除和连接，除去无关的DNA间隔序列的转录物，变成了

5、成熟的mRNA分子，它从细胞核中输送到细胞质，再转译成相应多肽链，这种间隔子的删除和表达子的连接最后形成mRNA的过程，称RNA剪辑假基因：这是一种核计酸序列同具相应的正常功能基因基本相同。但都不能合成出功能蛋白质的失活基因。其是基因一追化形式。因为在某一阶段存在着伤及基因表达的一种或几种缺陷基因工程主要研究内容：①目的基因的获取②重组体的制备③重纽体的转化④克隆鉴定⑤冃的基因表达基因工程应用：生在农业生产中应用：①提高植物光合作用效率a•提高CO?固定率b.提高光能吸收率耳环转化率②提高豆科植物的固氮效率③转基

6、因植物里转基因动物2在医药上应用①用转基因植物或动物生产药物与②用微生物生产•药物③技术设计高效特杲性牛物制剂④研制疫苗⑤基因诊断⑥法医鉴定⑦基因治疗2在坏境保护屮：①检测水污染②生物降解电泳种类：①琼脂糖凝胶电泳，用于3OOO-5OOO()bpDNA片段分离。②聚丙烯酰胺凝胶电泳,用于1-lOOObpDNA片段分离。③脉冲典藏凝胶电泳，用于分离条染色体。电泳的原理：带电荷的分了在电场中会以一定的速度移向适当的电极。移动速度称为电泳迁移率，电泳过程中，相同分子量，闭合环状最快，线性次之，展开环状最小。回收DNA：

7、在65°C下将LMP熔化，加过量酚抽捉，离心得含DNA的上清液。核酸分子杂交：带有互补的特定核百酸序列的单链DNA或RNA,当他们混合在一起时，其相应的同源区段会退火形成双链的结构，如果彼此退火的核酸来自不同牛物有机体，那么如此形成的双链分了就叫做杂种核酸分了。核酸分子杂交步骤：（1）将核酸样殆转移至固体支持物滤膜上，这个过程称为核酸卬迹转移。（2）将具有核算卬迹的滤膜筒带有放射性标记DNA或RNA探针进行朵交。核酸印迹转移法：（1）电泳凝胶核酸印迹法（2）斑点印迹法（3）狭线转移法（4）菌落印迹法（5）噬菌斑印

8、迹法复制子：每个基因组筒仓只有一个复制起点，这样的DNA分子称为复制子。细菌转化：指一•种细菌菌株山于捕获了来自另一种细菌菌株的DNA,而导致性状特征发生遗传性状特征的改变的生命过程。这种提供转化DNA的菌株叫做给体菌株，而接受转化的菌株成为受体菌株。感受态细胞：细菌在进入一周感受态的特殊纶理状态吋才能捕获外源DNA。大肠杆菌的转化：1,将正在生长的人肠杆菌在（）°C下加