中药粉末显微鉴别技术

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1、中药粉末显微鉴别技术第一节取样、制片、染色一、取样取样的代表性直接影响到结果的判断准确，因此必须重视取样的各个环节。（一）对照品对照品粉末是检定供试品的参照物，其制备是显微鉴别的先决条件。有经验者，可自取标本，鉴定后制作，或购买药材经品种基原鉴定。还应注意有些药材的显微特征受生长年限及环境的影响，会产生一定的波动，所以对于供试品的产地、采收期、加工方法等也应当认真记录。（二）供试品中药材原药材应注意基原、产地、规格的完整性、清洁程度以及有无水迹、霉变或其他物质污染等情况，并详细记录。（1）从同批药材包件中抽取有代表性的检定用样品。（2）对破碎的、粉末状的或大小在1cm以

2、下的药材，一般药材100g-500g；粉末状药材25g；贵重药材5g-10g；个体大的药材，根据实际情况抽取代表性的样品。（3）将所取有代表性样品混合均匀，即为总样品量。（4）前处理：将供试品捡净后，用量较小时，可以用乳体或小型电磨粉碎过《中国药典》6号筛（1.0μm-250μm）备用。1、中成药（1）取样：从各批号的箱、包、瓶中随机取样，记录好厂家、批号，从各包装盒中任意取1丸，每批号不得少于3次。各供试品留样保存，保存期限至少1年。水丸无包衣时，可直接取2丸-3丸，乳钵中研成细粉后，取少量置裁玻片上，滴加规定的试液，搅拌均匀，使粘结的细胞、组织分离，再按粉末特征加水

3、合氯醛试液或其他适当试液处理后观察。水蜜丸或大蜜丸；可直接用刀片横向切开取一薄片，或用小钢铲取一小块（约15mg）放置在载玻片上制片观察。（1）去包衣：中药片剂常见包衣为糖衣，隔离层常使用胶浆、糖浆和滑石1粉。水丸和糊丸等（挂）衣的材料有滑石、蔗糖、朱砂、雄黄、青黛、百草霜、礞石、赫石等。可用刀片将包衣剥去，简单的办法也可将片剂或丸剂断为两半，直接取内心，粉碎进行观察。（2）添加剂：为便于观察，可对中成药的制造过程中使用的添加剂做适当的前处理。除去水溶性干扰物：将检品置于蒸馏水中研匀，离心处理，取沉淀物检查。除去脂溶性干扰物：将检品滴加适量氯仿，离心处理，取沉淀挥干氯仿

4、后检查。除去淀粉，糊化淀粉的干扰：将检品滴加蒸馏水研匀，置烧杯中煮沸、冷却，离心处理，取沉淀检查。以上操作中，为防止某些显微特征的流失，应进行留样观察。二、制片（一）制片1、载玻片与盖玻片载玻片与盖玻片是影响图像质量的因素之一。因载物台下的聚光器是按使用一定厚度的载玻片设计的。首先应选择规格统一的载玻片（厚0.9mm-1.2mm）与盖玻片（厚0.12mm-0.17mm）。使用前，将载玻片与盖玻片用无水乙醇浸泡后，用柔软的绸布或无纤维人造纸揩擦，至表面洁净无暇。2、制片将供显微观察的粉末药材或样品置于载玻片上，然后加入适宜的试液1滴，用玻璃棒搅匀，用镊子将盖玻片沿一侧轻轻

5、放下，使液体自然展匀即可。可用滤纸吸拭溢出的液体或从盖玻片边缘补充液体不足的空隙。（二）制片按使用试剂分类1、稀碘液制片主要用于观察含淀粉粒。2、斯氏试液制片试液由醋酸：甘油：水（1：1：1）组成。用于观察包括淀粉粒在内的所有显微鉴别特征。3、水合氯醛制片水合氯醛试液能渗透组织，使皱缩的细胞膨胀并能溶解淀粉粒、蛋白质、树脂、挥发油和叶绿素等，使细胞组织变得透明而清晰。4、乙醇装片在观察的切片中有菊糖、粘液、树胶等时，使用95%以上的乙醇。（三）制片按保存时间分类1、临时制片封藏介质一般为流动性液体，不耐久藏。但制作简易、适2用于一般的显微观察及显微化学反应。2、半永久性

6、制片在上述临时制片周围，直接使用加拿大树胶，将盖玻片周围封严，室温放置1天干燥后，置冰箱内，一般可供10年以上观察使用。封藏介质还可以选用半固体的甘油明胶。3、永久性制片封藏介质一般呈固态，可长期保存，但制作费时，多用于教学标本。制作方法一般是先将粉末用无水乙醇浸润，随后沥去乙醇，用二甲苯浸润，再沥去二甲苯，滴加加拿大树胶的二甲苯溶液后，自然挥发干燥固定后即可。三、染色为使标本片特征显著，可根据细胞壁及细胞内含物的性质，加入不同染色剂染色。常见的显微化学反应如下（所有试液的配制方法参见《中国药典》）。（一）细胞壁性质的检定1、木化细胞壁，加间苯三酚试液1滴-2滴，稍放置

7、，加盐酸1滴，因木化程序不同，显粉色、红色或紫红色。此操作最好在水合氯醛透化后再进行，其效果较好。2、木栓化或角质化细胞壁，加苏丹III试液，稍放置或微热，呈橘红色至红色。3、纤维素细胞壁加氯化锌碘试液，或先加碘试液湿润后，稍放置，再加硫酸溶液（33-50）显蓝色或紫色。（二）细胞内含物性质的检定1、淀粉粒加稀碘试液，呈蓝色或紫色。2、糊粉粒（1）加碘试液，呈黄棕色。（2）加硝酸汞试液，呈砖红色（材料中如含有多量脂肪油，宜先用乙醚或石油醚脱脂后进行）。3、脂肪油、挥发油和树脂（1）加苏丹III试液，呈橘红色，红色或紫红色。（2）加90%乙