生物实验的理论考点

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1、请各位同学到以下邮箱下载PPT和习题:E-mail:shengwuliansai@163.comPassword：shengwujingsai请不要改变密码！2011年全国中学生物联赛辅导生物实验的理论考点马伟元2011年4月2日晚于千佛山下一、显微镜与显微技术•显微镜成像原理•显微镜的重要光学参数•显微镜的使用和维护•一些特殊光学显微镜的原理、结构、成像特点和应用•显微镜VS解剖镜考点1显微镜的成像显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜（object

2、lens），而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜（ocularlens）。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级放大，得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距离处。考点2显微镜的构成••①①机械部分：镜座、机械部分：镜座、镜柱、镜臂、镜筒、镜柱、镜臂、镜筒、调焦装置、载物台、调焦装置、载物台、物镜转换器等物镜转换器等••②②光学部分：目镜、光学部分：目镜、物镜、光源、聚光器物镜、光源、聚光器等等考点3放大倍数显微镜的放大率(amplifica

3、tion)或称放大倍数是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值，常记作M。M=maqM是显微镜的总放大倍数；m是物镜的放大倍数；a是目镜的放大倍率，一般表达为明视距离(正常视力者为25cm)与目镜焦距之比；q为在双目显微镜中所增设的棱镜所起的放大倍数，一般取值为1.6倍。考点4数值孔径•数值孔径(numericalaperture)又叫镜口率，是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积，通常缩写为N.A.，即NA=nsinβ显微镜的数值孔径与其放大率成正

4、比，与分辨率成反比，它的平方与图像亮度成正比。数值孔径NA=nsinβ油油低数值孔径较高数值孔径最高数值孔径干物镜干物镜油浸物镜考点5分辨率•分辨率：显微镜的最重要参数，能够区分开两个质点的最小距离。D：分辨率0.61λλ：光波的波长D=——————————N•sinα/2N：介质折射率α：物镜镜口角N与D成反比，λ与D成正比提高分辨率的方法（1）增大物镜的数值孔径在物镜和盖玻片之间充以n较大的油，如香柏油n=1.52,不仅使n增大，而且孔径角也增大。（2）用短波长的光照射如紫外光显微镜，电子显微镜。习题

5、1、为什么使用油镜可以提高分辨率？2、在购买显微镜时，最重要的是（）A分辨率B放大倍数C配有镜头的放大倍数和数量D光源是电光源还是反光镜3、随着放大倍数的增大，物镜的长度___，工作距离___,需要光源的强度___,通光孔或者聚光器___,视野亮度___。考点6工作距离工作距离是指从物镜前表面中心到被观察标本间满足工作要求的距离范围，与物镜的数值孔径成反比。一般情况下，物镜的数值孔径赿大，其工作距离赿小。考点7显微镜的使用•对于普通光学显微镜低倍镜和高倍镜的使用，初中生物学课本即有详细介绍，在此不再赘述。

6、•工作距离的调节有两种方法镜筒带动物镜动载物台动•油镜的使用很重要油镜的使用方法：低倍镜找出标本的范围，然后在待检部位上加一滴香柏油，转动镜头转换器，将油镜头置于工作位置，从侧面观察并缓慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，然后眼睛移至目镜，缓慢向上移动粗调节器（只应上升，不能下降，以免压碎标本和损坏镜头），待看到模糊物象时，再用细调节器转动至物象完全清晰为止。观察完毕，取下标本片，立即用滴有二甲苯的擦镜纸顺一个方向旋转擦拭镜头上的油。先将二甲苯滴在擦镜纸上。油镜使用的注意

7、事项：1、禁止使用倾斜关节2、滴油要适量，不要污染载物台3、一定用眼观察油镜，切勿压碎4、观察时载物台只可下降，不可上抬5、用后及时擦拭干净6、二甲苯一定不能多用习题1对于显微镜的使用下列说法正确的是（）A物镜分为低倍镜、高倍镜、油镜三种B物镜成倒立的实像C油镜使用完毕应该用二甲苯浸泡后擦拭干净D当NA为1.25、物镜为100×时，最适目镜放大倍数为12.5×习题2下列说法正确的是（）A载玻片的厚度可影响到显微镜的成像质量B盖玻片的厚度可以影响到显微镜的成像质量C按工作距离由小到大依次为低倍镜、高倍镜、油

8、镜D物镜的数值孔径是影响分辨率的重要因素之一考点8特殊的光学显微镜1.荧光显微镜(fluorescencemicroscopy)是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质，产生能观察到各种颜色荧光的一种光学显微镜。利用它可研究荧光物质在组织和细胞内的分布。2.利用环形光阑和相板，将光的光程差转变成振幅差，使细胞内各种结构之间呈现清晰可见明暗对比的显微镜叫做相差显微镜。利用它以活体观察细胞内的细微结构。3.倒置显微镜的组成和普通