Transwell实验技术(corning)

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1、Transwell®通透性支持物的选择和使用手册目录contents02总览02选择合适的Transwell膜和合适的孔径03选择合适的Transwell系统06如何使用Transwell通透性支持物06使用提示06常规使用指南07技术支持08订购信息08聚酯（PET）Tranwell嵌套08胶原包被的Tranwell-COL嵌套09聚碳酯Transwell嵌套10Snapwell嵌套10高通量筛选HTSTranswell-24系统116，12和24孔细胞培养板12HTSTranswell-96系统总览细胞和组织培养技术在基础和应用生命科学领域的重要性日益提高。为尽可能的模拟体内环境

2、以培养某些特殊的细胞系，新的培养容器和细胞贴附的表面不断涌现。顺理成章的，使用带有多微孔膜的通透性支持物培养这些细胞成为基本的方法。通透性支持物可以有效改善极性细胞的培养，因为这些支持物允许细胞从其基底面和顶面分泌和吸收分子，从而以更为自然的方式进行代谢。滤膜作为细胞培养介质来源于Grobstein(Nature,172:860-872;1953)关于后肾滤膜诱导的研究。经过长年对不同种类细胞的无数次应用，利用通透性支持物进行细胞培养被认为明显优于坚固的，不可透过的细胞生长界面。对于表皮细胞和其他种类的细胞，利用通透性支0.4μm孔径聚碳酯膜的扫描电镜持物在体外培养使得细胞可以在更为

3、自然的极性条件下生长和研究。同时提高了细胞的分化水平，使得体外生长的细胞在形态和功能上更为接近体内的细胞。还可以进行运输，吸收和分泌等细胞功能的研究，因为在通透性支持物上生长的细胞可以很方便且无干扰的接近其基底面和顶面的细胞膜结构。使用通透性支持物进行细胞培养对于实验细胞学研究是一个无可比拟的工具。选择合适的Transwell®膜和孔径Transwell通透性支持物可以提供三种膜材料：聚碳酯（PC），聚酯（PET）和胶原包被的PTFE膜的扫描电镜，显示孔径结构聚四氟乙烯（PTFE）。表1提供了这些膜特性的更多信息。聚酯Transwell-透明嵌套的特点是带有在显微镜下呈透明的膜。这些

4、膜经过处理，可以让细胞更好的贴附和生长。Transwell-透明嵌套使细胞在相差显微镜下更易观察，可以估计细胞的生长状态和单层细胞的形成。聚碳酯Transwell嵌套提供从0.1um到12.0um多种孔径。所有的膜都经过处理，使得细胞更易贴附。Transwell-COL嵌套湿润时透明的，胶原包被的PTFE膜，使得细胞更易贴附和伸展，同时在培养的过程中可以观察。Transwell-COL含有牛胎盘中提取的等摩尔数混合I型和III在6孔板中的聚酯Transwell透明嵌套显示膜的清晰度型胶原。不同于传统包被技术会形成密封的膜层，康宁专利包被技术使具有生物稳定性的胶原包裹住滤膜的每一根纤维

5、，从而保持了膜的多孔性。选择孔径在实验中使用Transwell®通透性支持物时选择合适的孔径也是十分重要的。表2总结了通透性支持物的常规应用和推荐使用的孔径。最小孔径的Tanswell膜（0.1um）主要应用于药物转导研究。细胞侵袭，趋化性和运动性研究通常采用3.0um或以上的孔径的Tranwell膜。细胞从膜的孔中迁徙通过的能力与选用的细胞系及培养条件有关，同时也与孔径相关。小12mm直径的Transwell嵌套带有于3.0um孔径条件下，细胞不会迁徙通过。对于一些要求严格的实验，康宁建议在实验中聚碳酯膜选用一系列孔径作为对照来确定哪种尺寸最适合于你的细胞培养和特殊应用。还有一个方

6、法就是参照已经发表的文献的推荐。若需更多的使用和应用信息，请访问康宁网站上技术信息部分的Transwell。02总览表1.Transwell膜特征特点聚酯（PET）聚碳酯（PC）聚四氟乙烯（PTFE）光学特性透明半透明湿润时透明细胞可见度好较差可见细胞轮廓组织培养处理有有无膜厚度10um10um50umMatrix/ECM包被性有有有胶原处理无无有可提供孔径（um）0.4,1.0,3.0,8.00.4,3.0,5.0,8.00.4,3.0化学兼容性所有的Transwell膜都适用于组织学固定剂，包括甲醇和甲醛。聚酯Transwell膜具有最佳的全面化学适用性。这些膜（不包括聚苯乙烯）

7、都耐受多种酒精，胺类，脂类，醚类，酮类，石油类和其他溶剂包括卤化碳氢化合物和DMSO，但是不推荐使用强酸强碱。孔密度在三类膜中只有胶原包被的PTFE膜没有确定的孔密度，因为它具有是曲折孔道的膜。两种具有额定孔密度的膜是聚酯膜和聚碳酯膜。聚酯Transwell膜的孔密度不像聚碳酯膜75mmTranswell嵌套和100mm培养皿那么高，但是它具有更好的光学清晰度，康宁聚酯膜和聚碳酯膜的额定孔密度详见表3。选择合适的Transwell系统Transwell通透