羊病诊断技术

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1、羊病诊断技术诊断实验室在收到送检病料时，应立即进行检验。羊传染病检验的一般程序和方法如下。(一)细菌学检验1．涂片镜检将病料涂于清洁无油污的载玻片上，干燥后在酒精灯火焰上固定，选用单染色法(如美蓝染色法)、革兰氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色镜检，根据所观察到的细菌形态特征，做出初步诊断或确定进一步检验的步骤。2．分离鉴定根据所怀疑传染病病原菌的特点，将病料接种于适宜的细菌培养基上，在一定温度(常为37℃)下进行培养，获得纯培养菌后，再用特殊的培养基培养，进行细菌的形态学、培养特征、生化特性、致病力和抗原特性鉴定。3．动物实验用灭菌生理盐水将病料做成1：10悬液，或利用分离培

2、养获得的细菌液感染实验动物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。感染方法可用皮下、肌内、腹腔、静脉或脑内注射。感染后按常规隔离饲养管理，注意观察，有时还须对某种实验动物测量体温；如有死亡，应立即进行剖检及细菌学检查。(二)病毒学检验1．样品处理检验病毒的样品，要先除去其中的组织和可能污染的杂菌。其方法是以无菌手段取出病料组织，用磷酸盐缓冲液先洗涤3次，然后将组织剪碎、研细，加磷酸盐缓冲液制成1：10悬液(血液或渗出液可直接制成1：10悬液)，以2000～3000转／分离心15分钟，取上清液，每毫升加入青霉素和链霉素各1000单位，置冰箱中备用。2．分离培养病毒不能在无生命的细菌培养基上生长

3、。因此，要把样品接种到鸡胚或细胞培养物上进行培养。对分离到的病毒，用电子显微镜检查、血清学试验及动物实验等方法进行理化学和生物学特性的鉴定。3．动物实验用上述方法处理过的待检样品或经分离培养得到的病毒液，接种易感动物，其方法与细菌学检验中的动物实验相同。(三)免疫学检验在羊传染病检验中，经常使用免疫学检验法。常用的方法有凝集反应、沉淀反应、补体结合反应、中和试验、免疫扩散、荧光抗体技术、酶标记技术、单克隆抗体技术等血清学检验方法，以及用于某些传染病生前诊断的变态反应方法等。四、寄生虫病检验羊寄生虫病的种类很多，但其临床症状除少数外都不够明显。因此，羊寄生虫病的生前诊断往往须要进行实验

4、室检验。常用的方法有以下几种。(一)粪便检查羊患了蠕虫病以后，其粪便中可排出蠕虫的卵、幼虫、虫体及其片段，有些原虫的卵囊、包囊也可通过粪便排出。因此，粪便检查是寄生虫病生前诊断的一个重要手段。检查时，粪便应从羊的直肠挖取，或用刚刚排出的粪便。检查粪便中虫卵常用的方法如下：1．直接涂片法在洁净无油污的载玻片上滴1～2滴清水，用火柴棒蘸取少量粪便放入其中，涂匀，剔去粗渣，盖上盖玻片，置于显微镜下检查。此法快速简便，但检出率低，最好多检查几个标本。2．漂浮法取羊粪10克，加少量饱和盐水，用小棒将粪球捣碎，再加10倍量的饱和盐水搅匀，以60目铜筛过滤，静置30分钟，用直径5～10毫米的铁丝圈

5、，与液面平行接触，蘸取表面液膜，抖落于载玻片上并覆盖盖玻片，置于显微镜下检查。该法能查出多数种类的线虫卵和一些绦虫卵，但对相对密度大于饱和盐水的吸虫卵和棘头虫卵，效果不大。3．沉定法取羊粪5～10克，放在200毫升容量的烧杯内，加入少量清水，用小棒将粪球捣碎，再加5倍量的清水调制成糊状，用60目铜筛过滤，静置15分钟，弃去上清液，保留沉渣。再加满清水，静置15分钟，弃去上清液，保留沉渣。如此反复3～4次，最后将沉渣涂于载玻片上，置显微镜下检查。此法主要用于诊断虫卵相对密度大的羊吸虫病。(二)虫体检查1．蠕虫虫体检查法将羊粪数克盛于盆内，加10倍量生理盐水，搅拌均匀，静置沉淀20分钟，弃

6、去上清液。再于沉淀物中重新加入生理盐水，搅匀，静置后弃去上清液；如此反复2～3次，最后取少量沉淀物置于黑色背景上，用放大镜寻找虫体。2．蠕虫幼虫检查法取羊粪球3～10个，放在平皿内，加入适量40℃的温水，10～15分钟后取出粪球，将留下的液体放在低倍显微镜下检查。蠕虫幼虫常集中于羊粪球表面，因而易于从粪球表面转移到温水中而被检查出来。3．螨虫检查法在羊体患部，先去掉干硬痂皮，然后用小刀刮取一些皮屑，放在烧杯内，加适量的109／5氢氧化钾溶液，微微加温，20分钟后待皮屑溶解，取沉渣镜检。五、给药方法羊的给药方法有多种，应根据病情、药物的性质、羊的大小和头数，选择适当的给药方法。(一)群

7、体给药法为了预防或治疗羊的传染病和寄生虫病以及促进畜禽发育、生长等，常常对羊群体施用药物，如抗菌药(四环素族抗生素、磺胺类药等)、驱虫药(如硫苯咪唑等)、饲料添加剂、微生态制剂(如促菌生、调痢生等)等。大群用药前，最好先做小批的药物毒性及药效试验。常用给药方法有以下两种：1．混饲给药将药物均匀混入饲料中，让羊吃料时能同时吃进药物。此法简便易行，适用于长期投药。不溶于水的药物用此法更为恰当。应用此法时要注意