半枝莲中抗肿瘤活性成份之萃取研究

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1、嘉南學報第三十期魏明治韓建華楊竹茂陳莉螢—65—第65∼74頁，民國九十三年CHIA-NANANNUALBULLETINVOL.30,PP.65－74,2004半枝蓮中抗腫瘤活性成份之萃取研究魏明治韓建華楊竹茂陳莉螢嘉南藥理科技大學藥學系摘要本研究以溶劑與超臨界二氧化碳，分別萃取半枝蓮中的naringenin、luteolin、apigenin、wogonin、baicalein、baicalin，以及protocatechuicacid等保肝與抗腫瘤成份。探討各種萃取條件，如不同溶劑（水、乙醇、丙酮及正己烷等）、萃取的溫度與時間，以及超臨界二氧化碳萃取的溫度與壓力等變因對於各成份萃取

2、量之影響。各種萃取條件之萃取液經由高效率液相層析儀(HPLC)定量分析，以作為最佳萃取條件之指標。在溶劑萃取方面，顯示以40-80%的乙醇與50%丙酮水溶液作為萃取劑，在50℃下萃取1小時，naringenin等六種黃酮類成份具有較佳的萃取產率。對於protocatechuicacid而言，其萃取產率於純水中較高。於壓力117-154bar與溫度40-50℃下，以超臨界二氧化碳萃取半枝蓮時，其萃取效果均不佳。關鍵詞：半枝蓮、超臨界二氧化碳萃取、溶劑萃取、wogonin、baicalein、baicalin前言因為受到農藥與藥物的濫用、食品中化學物品不當的添加，以及環境污染等諸多因素的影

3、響，(1)已使得人類之肝臟造成極大的負擔。在衛生署的統計資料顯示，歷年來（70-92年）台灣地區十大死亡原因中，慢性肝病與肝硬化位居第六位；同時，在癌症死亡原因中，肝癌更是常年來（80-92年）高居男性癌症中的首位。故治療肝病藥物的研發，對於全民健康的保護，乃是一項相當重要之課題。在傳統使用之中草藥中相傳具有保肝作用者，包括柴胡、茵陳、山豆根、山葡萄、薑黃、三白草、羊蹄甲、金線蓮、枸杞、山防風、山芋麻、欖人葉、地耳草、苦菜、酸藤、蝴蝶花、石上柏、土丁桂、龍葵、白花蛇舌草、半枝蓮⋯等等。其中半枝蓮常與白花蛇舌草配伍使用於治療肝臟疾(2)病。半枝蓮是唇形科黃芩屬植物狹葉韓信草(Scutel

4、lriabarbataDon)之乾燥全草，近代的臨床(3-4)研究顯示，半枝蓮之水萃取物於大白鼠受D-半乳糖胺(D-galactosamine)、對位乙醯胺酚(Acetaminophen)，以及四氯化碳等三種不同作用機轉之肝毒化物，所誘發之肝細胞損傷具有顯著的—66—半枝蓮中抗腫瘤活性成份之萃取研究(5)抑制作用。同時，由詹等人之研究中發現，半枝蓮之萃取物於小白鼠腹水癌也有抑制作用。另外(6)(7-12)，據Chou及後續多位學者之研究發現，半枝蓮具有保肝作用之主要成份為Baicalein、Baicalin及Wogonin等。(13)(14)半枝蓮單一成份的保肝與抗腫瘤藥理學研究方面，

5、由Kimuya等人與Abe等人，以及其他(15-19)多位學者研究發現，Baicalein、Baicalin及Wogonin具有保肝及抗腫瘤之作用。而芹菜素(20)(apigenin)、木犀草素(luteolin)對人類前列腺癌有毒殺與抑制作用。又有研究證實單兒茶酸(21)(protocatechuicacid)對人類結腸癌細胞的生長有抑制作用。由以上的研究結果得知，半枝蓮不僅具有保肝作用，亦為一擁有抗腫瘤與治療肝癌效果的中草藥。中草藥之抽取物（湯劑）因具有內服吸收快、療效迅速之優點，故在臨床應用上最為常見。由於現代科學的進步，一些新技術、新方法、新指標成份、新劑型等的開發應用，湯劑已

6、漸為科學中藥製劑所取代。而科學中藥製劑，在台灣的中藥廠中，大都係將藥材加水（有時亦加入少量酒），並以水蒸氣加熱蒸煮（萃取）後，去渣起汁，濃縮後再藉由賦型劑吸收，以及其他的加工步驟，以(22)製得方便攜帶與服用之劑型。但據1976年，野口衛於半夏厚朴湯抽取實驗顯示，於實際煎劑中之油性成分含量只有3.5%，而殘渣中仍存有油性成分49.8%，其餘有46.7%是在煎熬過程中揮發掉的；所以如何有效地抽取藥材中所含之成分，亦是中草藥製程研發的一大關鍵。(23-27)(28)(29)中草藥的萃取方法常用者有溶劑萃取、溶劑萃取加超音波振盪、微波萃取與超臨界(23-26,28,30-31)流體萃取等。前

7、三種方法是較常採用之傳統萃取技術，而超臨界流體萃取係歐美國家現在最盛行的綠色萃取法，是基于超臨界流體兼具有氣體的高擴散性與液體的高滲透性之優良特性，所發展出的萃取分離技術，尤其是當以二氧化碳為萃取溶劑時，因二氧化碳具有相對較低之臨界溫度(304.2K)與中等的臨界壓力(1070.7psi)，可於低溫下進行萃取，特別適合于分離熱敏感之物質。目前尤其是應用至天然物與中草藥萃取加工時，因二氧化碳具有無毒、不燃性、便宜、萃取速率迅速、容易自萃取物中分離