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时间:2019-08-07
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1、第一节发酵液过滤特性的改变发酵液成分复杂:菌体,残存的固体培养基,未被微生物完全利用的糖类、无机盐、蛋白质,以及微生物的各种代谢产物。发酵液特性:1、发酵产物浓度较低,大多为1%—10%,悬浮液中大部分是水;2、悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大;3、固体粒子可压缩性大(细胞在很大程度上属于可压缩的粘稠物料);4、液相粘度大,大多为非牛顿型流体;5、性质不稳定,随时间变化,如易受空气氧化、微生物污染、蛋白质酶水解等作用的影响。以上使固液分离变得相当困难,应进行适当预处理才行,降低滤饼比阻,提高过
2、滤与分离速度U×A=A2△PX=A△Pxwμ(v+vF)Uwμ(v+vF)A:过滤面积;△P:为通过滤饼和过滤介质后的压力降;U:滤液通量;W:单位滤液体积中沉积固体的干重;u:滤液的粘度;V:单位时间内累积的滤液体积。vF为沉积与过滤介质阻力相当的滤饼厚度所滤过的滤液体积x=(m-n-1ln+1t2n)(△P)n△P:为通过滤饼和介质后的压力降;m:单位质量干滤饼对应过滤饼的质量;l:床层厚度;n:常数,滤饼的可压缩度,不可压力n=0,高度可压n=1;n=0,x=m-1l=l/m,x下降减少床层
3、厚度;m上升减少滤液的悬浮物;n=1,x=m-2l2t2(△P)2,x下降l下降,t下降(过滤时间),△P下降悬浮物,粘度下降,m上升,减少悬浮物。一、降低液体粘度(加水、加热)对于通过一个圆形直管的粘性流可采用哈根—泊肃叶(Hagen-poiseuilles)议程:U=Dc2△P→U=dm2△P32μlckμbmU:流体的平均速度,μ为流体的粘度,△P为流体流过圆管的压力降,dc和lc分别为圆管的直径与长度。dm、bm为流体流过滤床层的当量直径为长度。K,常数取决于床层结构。可见U与μ成反比,降
4、低粘度可有效提高过滤速率。1、加水稀释法:(1)加大后继过程的处理任务;(2)实际效果:即若加水一倍,则稀释后液体的粘度下降50%以上才能有效提高过滤速度。2、加热:加热可降低粘度:如120Be麦芽汁40度加热到75度粘下降一半,速可加倍。如链霉素PH3.0时,加热70度,半小时,过滤速度可增大10—100倍。(有蛋白质凝聚,m上升)(1)加热温度控制:不影响目标产物的活性;(2)时间控制:不造成细胞溶解,胞内物处溢,使后续分离纯化复杂化。二、调整PH(1)对于两性物质(氨基酸、蛋白质),调PH至
5、等电点,所带净电荷为零,溶解度最小,发生等电点沉淀。(2)膜过滤中,调整PH改变易吸附分子的电荷性质,减少堵塞和污染;(3)细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个PH值下有可能凝聚成较大颗粒,有利过滤。三、凝聚与絮凝1、凝聚(1)双电层:发酵液中胶体粒子的表面——带电荷(吸附溶液中的离子,自动基因的电离)——如菌体或蛋白体(生理PH值下)带负荷——静电引力,吸附阳离子——在界面形成双电层——使胶粒之间不易凝聚,稳定分散。双电层电位越高,电排反越强,胶粒稳定,分散越好,过滤越难。(2)电解质的凝聚:加
6、入电解质——异电离子作用下,双电原电位降低——胶体稳定下降——相互碰撞而凝聚。(3)凝聚值凝聚值:使胶粒发生凝集作用的最小电解质浓度(mmol/L)。反离子的价数越高,凝聚值就越小。A13+>Fe3+>H+……常用的有明矾(硫酸铝)、石灰、硫酸亚铁、三氯化铁等。2、絮凝①相对凝颗粒粗大;②相对凝聚更为昂贵;(1)絮凝剂的絮凝作用:絮凝剂(能溶于水的高分子聚合物,相对分子质量数万—1千万,长链结构)——链节上含有许多活性官能团,阴离子(-)或阳电子(-NH3+)、不带电的非离子型基团——通过静电引力
7、、范华力、氢键等吸收在胶粒表面——当许多链节分别吸附在不同胶粒表面上——产生桥架联授——形成较大絮团。(2)絮凝剂化学结构①含有相当多的活性官能团,能与胶粒表面结合。②长链线性结构,与较多的胶粘液表面结合。③相对分子质量不能超过限度,保证其有良好的水溶性。(3)絮凝剂的分类:①有机高分子聚合物:如聚丙大类(絮团粗大、用量少、絮凝快、效好,但有毒)、聚丙烯酸类(无毒,可用于医药、食品)、聚乙烯等。②无机高分子聚合物、如聚合铝盐、聚合铁盐等。③天然有机高分子絮凝剂,如明胶、骨胶、壳多糖、海藻酸钠、聚糖
8、类胶粘物。(4)影响絮凝效果的因素(确定了某种絮凝剂)①添加量:试验确定最适添加量少:胶粒吸附不完全多:形成的絮团小②PH值:影响絮凝剂活性官能团的电离度,进一步影响吸附强弱。另外还有:搅拌转速、时间等。3、混凝混凝是包括凝聚和絮凝机理的过程。(1)单独使用絮凝剂如带负电的菌体、蛋白质+阳离子型高分子絮凝剂→具有降低胶粒双电层电位,产生吸附桥架的双重作用。(2)电解质+絮凝剂在无机电解质的凝聚作用基础上,高分子絮凝剂架桥絮凝→效果更好四、加入助滤剂1、助滤剂:是一种不可压缩的多孔微
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