革兰阳性菌的鉴定操作

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1、革兰阳性菌的鉴定操作阳球G+c：葡萄球菌属、微球菌属、链球菌属、肠革兰阳性菌球菌属等阳杆G+b：棒状杆菌属、李斯特氏菌属、丹毒丝菌属、分支杆菌属、奴卡菌属等需氧革兰阳性球菌：触酶葡萄球菌属微球菌属链球菌属肠球菌属G+球菌革兰涂片阳性阴性七叶苷阳性、6.5％Nacl阳性肠球菌属链球菌属挑取单个菌落进行涂片固定、初染、酶染、脱色、复染注意：挑取时接种环轻碰菌落边缘即可。1：涂片2：染色根据菌体特征作出初步鉴定若镜检结果为革兰氏阳性杆菌，则在建议与解释栏填写“因NCCLS上无相应的药敏标准，请根据临床症状经验用药，并考虑是否为污染菌。”3：镜检革兰

2、阳性球菌原理：2H2O2O2+2H2O注意：血琼脂上菌落不宜作此试验。4：触酶试验触酶试验（Catalase）：1、触酶阳性，可初步判断为葡萄球菌属和微球菌属;2、触酶阴性，可初步判断为链球菌属和肠球菌属5：Staphaurex胶乳凝集试验Staphaurex胶乳凝集试验是一种鉴定金葡菌的快速、简便的商品化直接凝集试验。基本原理是在纸板或玻片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体的聚苯乙烯胶乳，然后用接种环挑取待鉴定的新鲜培养物加入混匀出现凝集块现象为阳性。本法不仅可以检测金葡菌的凝固酶而还可通过IgG抗体的FC段与金葡菌的A蛋白有特殊的亲和力

3、而检测之。中等大小、黄或灰白，β溶血或不溶血的菌落，则做Staphaurex胶乳凝集试验：阳性、24hβ溶血，则判断为金黄色葡萄球菌；不溶血，则API或上机。阴性报告凝固阴性葡萄球菌或APISTARPH、上机5.API板条试验5.葡萄糖发酵试验5.β溶血菌落小、黄色菌落；镜下呈四联、八叠排列细菌，则做葡萄糖发酵试验：阳性则转为上一个步骤试验；阴性报微球菌属6.杆菌肽试验6.CAMP试验6.Optochin试验6.七叶苷NaCl试验七叶苷试验（阴性或阳性）6.5％Nacl试验阴性：1.α溶血，做Optochin试验：敏感且G+矛头状双球菌、脐窝

4、状菌落，则判断为肺炎链球菌（Optochin试验抑菌圈的直径≥14mm为阳性）2.β溶血：2.1.杆菌肽试验敏感，则判断为A群链球菌2.2.乳胶凝集或CAMP阳性，则判断为B群链球菌2.3.其它上机3.γ溶血则上机6.阿拉伯糖、山梨醇七叶苷试验阳性6.5％Nacl试验阳性，则判断为肠球菌属：1.阿拉伯糖阴性、山梨醇阳性则判断为粪肠球菌2.阿拉伯糖阳性、山梨醇阴性则判断为屎肠球菌葡萄球菌属葡萄球菌属概述葡萄球菌属（Staphylococcus）是一类触酶试验阳性的革兰氏阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌属、

5、施氏葡萄球菌、路邓葡萄球菌等32个种。因常堆聚成葡萄串状，故名。葡萄球菌在自然界中分布广泛，存在于空气、水、尘埃及人体皮肤表面、鼻、咽等。多数为非致病菌。少数可导致疾病。形态与染色球形或稍呈椭圆形，直径0.4-1.2um，排列成葡萄球状。葡萄球菌无鞭毛、不能运动，无芽孢，除少数菌株外一般不形成荚膜。革兰染色为阳性，其衰老、死亡或被白细胞吞噬后某些菌株可被染成革兰阴性。金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落特征：光滑、完整微隆起、半透明，β-溶血，奶黄色、橙黄色、柠檬色、白色（脂溶性色素）菌落特征：菌落相对较小，2.5～6.0mm，取决于不

6、同菌株，通常不产生色素，某些菌株产生黏液性常黏附在琼脂表面菌落特征：菌落5～8mm大小，完整，有光泽，不透明、光滑，比前面提到菌种菌落较凸起，约一半菌株产色素，奶油、黄-橙色。培养特性头葡萄球菌孔氏葡萄木糖葡萄金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌小、黄色菌落；镜下呈四联、八叠排列细菌No中等大小、黄或灰白，β溶血或不溶血的菌落API或上机报微球菌属葡萄糖发酵报告凝固阴性葡萄球菌或API或上机+Staphaurex胶乳凝集葡萄球菌微球菌属－24hβ溶血+－－+G+球菌触酶+上机主要病原菌：金黄色葡萄球菌其他：脓肿和严重伤口感染中分离的路邓葡萄球菌；多次

7、血培养中分离的凝固酶阴性葡萄球菌葡萄球菌链球菌属链球菌属概述链球菌属（Streptococcus）是一群触酶实验阴性、呈链状排列的革兰氏阳性球菌，广泛存在于自然界和人及动物粪便和健康人鼻咽部，可引起各种化脓性炎症、猩红热、丹毒、新生儿败血症、脑膜炎、产褥热以及链球菌变态反应性疾病等该菌属种类繁多，目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法分为A、B、C、D、E、F、G群，或根据其在血平板上的溶血现象进行分类（β溶血或完全溶血、α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血）根据溶血现象分类⑴α型溶血性链球菌菌落周围有不透明溶血环。多为条件性致病菌。⑵

8、β型溶血性链球菌菌落周围形成完全透明的无色的溶血环。致病力强。⑶γ型链球菌不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为不溶血性链球菌。无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔