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时间:2019-08-03
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1、高中生物实验方法与常用试剂1.实验方法 实验方法是整个实验设计的精髓,是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下:(1)化学物质的检测方法:①淀粉——碘液(蓝色) ②还原性糖——斐林试剂、班氏试剂(砖红色) ③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)或酸碱指示剂④乳酸——pH试纸 ⑤O2——余烬复燃无O2——火焰熄灭⑥蛋白质——被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫色) ⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液(橘黄色)、苏丹Ⅳ染液(红色) ⑧DNA——二苯胺(蓝色) ⑨染色体——龙胆紫溶液(紫色),醋酸洋红溶液(红色)(2)实验结果的显示方法:①光合速率——O2释放量或C
2、O2吸收量或淀粉产生量◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率;◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;◆植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量③原子途径——放射性同位素示踪法④细胞液浓度大小——质壁分离和复原⑤细胞是否死亡——质壁分离的复原⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量,发育速度等(饲喂法)⑦生长激素作用——生长速度(体重变化,身高变化)⑧胰岛素作用——动物活动状态(切除、移植胰腺)⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基⑾生长素作用——向光性(3)实验条件的控制方法:①增加水中氧气
3、——泵入空气或吹气或放入绿色植物②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水③除去容器中CO2——NaOH溶液④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠⑨线粒体提取——细胞匀浆离心⑩骨的脱钙——盐酸溶液⑾灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌,对不同材料,灭菌方法不同:培养基用高压蒸气灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒;整个接种过程都在实验室无菌区进行。(4)实验中控制温度的方法:①还原糖鉴定:水浴煮沸加热②酶促反应:水浴
4、保温③用酒精溶解叶中的叶绿素:酒精要隔水加热④DNA的鉴定:水浴煮沸加热⑤细胞和组织培养以及微生物培养:恒温培养(5)常见器材滤纸:过滤或纸层析纱布、尼龙布:过滤,遮光血球计数板:计数(探究酵母菌种群数量变化)2、具体实验方法⑴、根据颜色来确定某种物质的存在: 淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色);脂肪+苏丹Ⅲ(橘黄)或+苏丹Ⅳ(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色); 大肠杆菌+伊红和美蓝(菌落为深紫色,有金属光泽)⑵、用颜色标记法来确定原肠胚三个胚层的分化情况。⑶、用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性⑷、同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源;光合作用中二氧化碳的去向;
5、噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质; DNA的复制是半保留复制。⑸、确定某种元素为植物生长必需的元素的方法: 水培法(完全培养液与缺素完全培养液对照)⑹、获得无籽果实的方法: 用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄、 诱导染色体变异,如无籽西瓜。⑺、确定某种激素功能的方法: 饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。⑻、确定传入、传出神经的功能: 刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。⑼、植物杂交的方法 雌雄同花:花蕾期去雄+套袋+开花期人工授粉+套袋 雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋⑽、确定某一显性个体基因型的方
6、法: 测交;该显性个体自交。⑾、确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法: 具有一对相对性状的纯合体的杂交 自交,观察后代是否有性状分离。⑿、确定某一个体是否具有抗性基因的方法: 确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈病菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑出现。⒀、鉴定血型的方法: 用标准血清与待测血型混合,在显微镜下观察血液的凝集情况。⒁、育种的方法: 杂交育种;人工诱变育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种;多倍体育种等。⒂、测定种群密度的方法:样方法;标志重捕法⒃、生态瓶的制作方法;瓶必须透明,且封闭⒄、分离微生物的方法: 平板划线法;用选择培养基培养(如:圆褐固氮菌的分离,
7、金黄色葡萄球菌的分离,细菌和酵母菌的分离)⒅、测定微生物群体生长的方法: 测定细菌的数目---显微计数 测定细菌的重量---取一定体积的培养基,经离心分离,反复洗涤后,称湿重,或烘干后称干重 3、生物学中常用的试剂: 1、斐林试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测
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