药物分析05体内药物分析

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1、药物分析主讲:秦大伟第五章体内药物分析第五章体内药物分析体内药物分析定义体内药物分析是指体内样品(生物体液、器官或组织)中药物及其代谢或内源性生物活性物质的定量分析。www.themegallery.comCompanyLogo第五章体内药物分析分析意义与体内药代动力学研究和临床治疗药物监测密切相关,直接关系到药物的体内作用机制探讨与质量评价和药物临床使用的安全、有效与合理。www.themegallery.comCompanyLogo第五章体内药物分析分析样品种类血液尿液唾液头发脏器组织其它特殊样品?www.themegallery.comCom

2、panyLogo第五章体内药物分析分析目标药物在体内的某些代谢产物常具有一定的生理活性,它们在体内的变化规律对母体药物的药理学与毒理学评价特别重要.机体内源性生物活性物质往往参与机体重要的生理过程,其变化规律的异常改变也与某些疾病的发病机制密切相关母药药物特有代谢产物体内内源性生物活性物质www.themegallery.comCompanyLogo第五章体内药物分析分析对象人动物鼠兔犬大鼠小鼠雄雌Justajoke等等猴猩猩都是一些志愿者也有一些不知情的人须动物管理与使用委员会同意www.themegallery.comCompanyLogo分析

3、对象www.themegallery.comCompanyLogo第五章体内药物分析药物在体内的形态游离型代谢产物游离型原药结合型原药结合型代谢产物情形极为复杂缀合物分子间力结合化学共价结合称为两类www.themegallery.comCompanyLogo四、体内药物分析的特点体内样品性质及分析特点采样量少药物浓度低干扰物质多数毫升,至数十微升,一般在特定条件下采集,且不易重新获取生物活性物质的浓度在纳克级到微克级水平,甚至皮克级水平蛋白质,脂肪,尿素,钾,钠,代谢产物,内源性物质………….样品需要分离富集,或者衍生化处理才能分析样品分析方法需

4、要高灵敏度与专属性分析工作量,数据处理和结果阐明较为复杂www.themegallery.comCompanyLogo五、体内药物分析方法体内样品分析方法色谱及其联用方法免疫学方法生物学微生物学方法HPLC,GC,HPLC-MS,HPLC-MS/MS,GC-MS,GC-MS/MS放射(RIA)荧光(FIA)酶(EIA)适合小分子及代谢物,蛋白质大分子药物等生物大分子药物分析抗生素分析www.themegallery.comCompanyLogo第一节常用体内样品的制备与贮藏常用样品的种类(一)血样:药物在体内主要依靠血液运输,血药浓度可作为药物在作

5、用部位浓度的指标.①血浆(plasma)②血清(serum)③全血(二)唾液:很少采用(三)尿液:用于药物剂量回收、尿清除率、生物利用度,药物代谢物及其代谢途径、类型、速率等的研究;临床上用于判断患者是否违反医嘱用药。www.themegallery.comCompanyLogo其它:头发、肝器组织、乳汁、精液、脑脊液、泪液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、粪便。常用样品的种类www.themegallery.comCompanyLogo采集和制备1、血样:一般从肘静脉采血,也可从毛细管采血。每次采血1-5ml,动物采血时一般不超过动物总血量的十分之一。

6、2、血浆:静脉离心5-10分钟,使与血细胞分离;3、血清:静脉血放置30-60分钟。1000g离心5-10分钟。4、全血:加抗凝剂,不离心,血浆和血细胞分布均匀。采集方法www.themegallery.comCompanyLogo2.尿样目的:药物剂量回收,药物清除,药物代谢和生物利用度特点:浓度高,易于收集,体内代谢研究,应水解分离采集方法:随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿等,定时采集。贮藏:健康人排出的尿液颜色淡黄至黄褐色,pH在4.8~8.0之间。3.唾液唾液中药浓与血浓相关性密切收集方法濑口15min钟后采集,离心收集采集方法www.them

7、egallery.comCompanyLogo组织采集:先取各种组织,应用匀浆器均匀化制成水性基质匀浆液,再以适当方法萃取。组织样品要经过蛋白沉淀:甲醇、乙腈、高氯酸、三氯乙酸沉淀。酸、碱水解:将组织水解掉酶水解:应用酶将组织水解掉其它:头发等组织样品药物在组织中的分布提供重要的体内动力学过程www.themegallery.comCompanyLogo体内样品贮存与处理冷藏与冷冻去活性-20℃到-80℃,低温终止酶的活性其它方式去除酶的活性,防止样品进一步代谢分解样本量大,分析时间长,要保证药物不变质,须贮存与处理www.themegallery

8、.comCompanyLogo1.血样(血浆、血清)及时分离→冷藏,-70℃加入稳定剂NaF2.尿样①尿中水、无机盐、尿素

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