兔、豚鼠实验动物的一般操作技术2 卫生毒理学

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1、II实验动物的一般操作技术（兔、豚鼠）08级硕士李志芳实验目的一实验内容二实验记录三实验报告书写和实验讨论四2一、实验目的1了解动物实验在毒理学和预防医学中作用和地位。2．了解实验动物正确操作一般原则的意义。3.掌握兔、豚鼠实验动物的基本操作技术。3二、实验内容（一）动物的选择选择健康的实验动物，检疫1~2周后，进行实验。1.外观：体形丰满，被毛浓密有光泽，紧贴体表、眼睛明亮，反应行动灵活。2.体重、年龄：动物的年龄常按体重大小来估计。豚鼠兔急性：450~700g2.0~2.5Kg慢性（亚慢性）150~200g1.5~1.8Kg

2、4内容（二）动物的抓取正确地抓取和固定动物是为了在不损害动物健康，不影响观察指标，防止被动物咬伤、抓伤的前提下，确保动物实验顺利进行。1.豚鼠：豚鼠胆小易惊，抓取时要稳、准、迅速，先用手掌迅速扣住豚鼠，抓住其肩胛上方，将手张开，用手指环握住颈部，另一只手托住臀部即可。52.兔：从笼内提兔时，轻轻打开笼门，将手伸入笼内，从头前阻拦它跑动，将兔耳放入右掌心内，右手抓兔颈部的皮毛提起，左手托住臀部或腹部，让体重的大部分集中在左手上。注意：在实验工作中常用兔耳采血、静脉注射，所以家兔的两耳尽量保持不受损伤，不要抓耳。6（三）性别鉴定1.

3、豚鼠：用一只手抓颈部，另一只手扒开靠生殖器孔的皮肤，♂在圆孔中露出性器官突起，♀则出现三角形圆隙，成年鼠有两个乳头。2.兔：成年♂：圆孔中露出圆椎形向下弯曲的阴茎，并且两侧有裸露的睾丸。♀：为一条朝向尾巴的长缝呈椭圆形间隙，有乳头8~12个。7（四）实验动物的标记方法:实验动物常需要编号标记以示区别。编号的方法很多，根据动物的种类、数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。兔：挂牌法刺纹法剪毛法染色法豚鼠：挂牌法刺纹法染色法剪耳法8挂牌法：该法适用于狗等大型动物。打号法：该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。用刺数钳(又称耳号

4、钳)将号码打在动物耳朵上。刺纹法：该法适用于大小鼠、豚鼠等。用7号或者8号针头蘸碳素墨水在动物耳朵、前后肢、尾巴等部位刺入皮下，留下黑色标记，在实验动物数量少的情况下，也可用于兔、狗等动物。剪毛法：该法适用于大、中型动物，如狗、兔等。此法编号清楚可靠，但只适于短期观察。剪耳法：此种方法常在饲养大量动物时作为终身号采用。化学药品涂染动物被毛法（染色法）：常用的染料：苦味酸酒精饱合溶液（黄色）；5%中性红或品红溶液（红色）；小鼠和大鼠用得多。9（五）实验动物随机分组方法:各组非处理因素齐同，防止非处理因素干扰处理因素的效应。1.将动

5、物按性别，用感应量为0.1g的天平称重，编号，按体重从大到小排序。2.按实验设计要求进行分组。常见的实验设计方案是配伍设计、完全随机分组设计和随机区组设计。随机方法有：随机数字表和随机分组表。常用“Z”字型分组法。3.各组之间尽量齐同，同组、同性别动物体重变异系数小于10%。不同组间同性别动物体重变异系数小于5%。4.如对性别无特殊要求，宜选用雌雄动物各半，单独分组后雌雄合并。（常采用每组20只，雌雄各10只）10（六）实验动物染毒途径和方法:根据实验目的、实验动物种类，最关键是要参照人接触受试物途径。例：经口药品、保健品、食品

6、采用经口染毒静脉药品采用静脉、腹腔染毒农药、化妆品经皮染毒易挥发物质经呼吸道染毒111.经口染毒：喂饲:将受试物掺入动物饲料或饮水中供实验动物自行摄入。优点：符合人类接触受试物的实际情况；但缺点多：适口性差的受试物，实验动物拒食；易挥发和水解的受试物不适用。而且，实验动物应该单笼喂饲，以食物消耗量计算其实际染毒剂量。12灌胃适用于小鼠、大鼠、兔、犬等动物。优点：剂量准确。缺点：工作量大，并有伤及食管或误入气管的可能。吞咽胶囊适用于大动物。如犬等。将一定剂量的受试物装入胶囊中，放至犬的舌后部，迫使动物咽下，此法剂量准确，适用

7、于易挥发、易水解和有异味的受试物。13例如：兔子灌胃：将兔子固定后，一手按住头部，另一手将开口器（中间有一小孔）开口，将舌头压在下面，将胃管经小孔穿入，沿咽后壁插入食管，遇到阻力即可停止，一般可插入25cm，然后将导管放入有水烧杯内，若无气泡产生，则可进行灌胃，否则重新插胃管。最大灌胃容量5.0ml/Kg。142.经皮肤染毒：经皮染毒的目的有两种。一种是经皮染毒毒性实验；另一种是皮肤刺激和致敏实验。剪毛法拔毛法脱毛法脱毛法（1）先用剪刀将动物脊柱两侧的长毛剪短，左右各一块，一块做测试，另一块做对照。再用电剪逆着毛的方向剪，不要损

8、伤皮肤。（2）取脱毛剂在剪毛区均匀地涂一薄层，用塑料刮板逆被毛的方向梳理，让脱毛剂与被毛充分接触，隔几分钟，有被毛开始脱落后用纱布沾水轻轻擦洗，并且要清洗干净，因脱毛剂有刺激性。（3）放置24小时后，观察动物皮肤是否有损伤。153.经呼吸道染毒：静式吸入染毒，动