孕酮检测标准操作流程

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1、概述孕酮是一种分子量为314.5道尔顿的甾体类激素。主要形成于黄体细胞以及怀孕期胎盘中。孕酮水平与黄体的发育和萎缩有关。但是在女性周期的卵泡期几乎检测不到孕酮，在排卵前一天可观察到孕酮水平升高。黄体期孕酮合成增加。在后半周期孕二醇作为孕酮主要的降解产物随尿排出体外。孕酮造成子宫内膜腺体组织（分泌阶段）增加，为受精卵着床做准备。怀孕期间孕酮抑制子宫肌层收缩。乳腺中，在雌激素作用的基础上，孕酮促进乳腺腺泡增殖和分泌物的分泌。检测孕酮可用于检测排卵以及黄体期的评估,有助于生育诊断1目的规范孕酮检测测试，确保检测结果准确性和重复性2检测方法和

2、原理2.1检测方法：竞争法2.2检测原理：孕酮检测是一种竞争性的免疫测定方法，使用直接化学发光技术。在标记试剂中，病人样品中的孕酮结合到吖啶酯标记的小鼠单克隆抗孕酮抗体上。在固相试剂中，游离的抗体与孕酮衍生物结合在一起，并通过共价键结合到顺磁性颗粒上3标本采集与保护新鲜无溶血血清遵守以下推荐的血清标本处理，运行和储存步骤3.1用真空采样管采集血液标本时须遵守常规注意事项3.2离心前使标本完全自然形成凝块3.3全程保证样品管的密闭状态3.4尽快分离血清，并及时测定3.5如果标本不能在24小时内检测或运送标本时，将标本保存在4℃或更低温度

3、的环境中：3.6冷藏标本室温放置20分钟后再测定；3.7冷冻标本室温解溶后放置20分钟后再测定3.8不符合标本处理3.8.1溶血和乳糜血标本在报告单的备注栏注明3.8.2标本量过少的标本，严重溶血和乳糜血标本与临床沟通并将标本退回，填写不合格标本拒接登记。4试剂和设备4.1试剂SIEMENS原装配套试剂4.1.1试剂组成标记试剂：5.0mL盒，在缓冲盐水中用吖啶酯标记的单克隆小鼠抗人孕酮抗体(~20ng/mL)，含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂。固相试剂：10.0mL/盒，在磷酸盐缓冲液中结合到顺磁性颗粒的孕酮衍生物（~60ng/mL)

4、，含叠氮化钠（0.11%)和防腐剂。释放剂：类固醇释放剂(2.2Mg/mL)，置于含叠氮化钠（0.1%)和防腐剂的缓冲液中。4.1.2试剂准备：手工混合所有试剂包。肉眼检查试剂底部以确保所有颗粒分散均匀并处悬浮状态，然后将混合物载入系统直接使用4.1.3试剂保存试剂2~8℃避光保存，并保持竖直向上4.2质控品SIEMENS原装配套质控品4.3校准品SIEMENS原装配套标准品。4.4警告和注意事项4.4.1只可用于体外诊断；4.4.2试剂中含有叠氮钠，请小心处理，请勿吞服或与皮肤粘膜接触！叠氮钠在与铜或铅等重金属接触后会产生有毒的叠氮

5、化物；4.4.3试剂盒的测定结果仅作为临床各种疾病的辅助诊断依据4.5仪器ADVIACentaurCP全自动化学发光免疫分析仪5操作程序5.1检测过程流程签收样品→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存5.2样本签收严格按标本接收程序签收标本5.3标本处理以3000r/min，离心6~10min，分离血清上机测定，若标本不能及时检测，将分离血清冷藏于2~8℃的冰箱内5.4标本检测5.4.1手工编排测试项目：在主界面选中样本区域→选择样本架→选择样本→点击Samples区域中的样本类型选择按钮→切换至样本类型→选择样本ID编排区→

6、没有通过扫描样本管条形码输入ID号的样本，在此处手工输入样本ID→然后在AssaySelection区域选择测试项目5.4.2样本运行确认样本装载，必要的样本信息输入完毕→确认所有耗品及试剂已装载→按START键开始运行样本。5.5检验后标本保存保存在标本冰箱内，保存期为7d6校准程序6.1校准品的准备和储存将校准品从冰箱中取出，加5ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min，待充分混匀后分装。-20℃冰冻保存可保存20d，复融后2~8℃可稳定24h。6.2校准条件在室内质控失控，或使用新批号试剂，或更换仪器主要配件，或进行大保

7、养后均需校准。无特殊情况校准周期为28d6.3校准程序参见生化组的校准操作程序7质量控制程序7.1控制品的准备和储存每瓶准确加入5.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min待充分溶解后分装，保存于-30℃冰箱，启用前取出，室温放置30min待充分融化后使用，2~8℃可稳定24h。7.2控制品水平和分析批长度每24h至少进行1批。7.3质控操作程序参见生化组的质量控制操作程序。8性能参数8.1不准确度±12.5%8.2精密度＜8.33%8.3线性范围0.21ng/ml~60ng/ml9生物参考区间黄体期3.34-28.03ng

8、/ml卵泡期0.15-1.4ng/ml绝经期0-1.73ng/ml妊娠早期11.2-90ng/ml妊娠中期25.55-89.4ng/ml妊娠晚期48.4-422.510异常结果的处理结果与诊断不符或两次结果差异较大时，应