uplc-qtofms在相关研究方向的应用

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1、UPLC-QTOFMS在相关研究方向的应用报告人：印敏安捷伦1260液相色谱-G6530三级四极杆飞行时间质谱联用仪（UPLC-QTOF）前言液相色谱用户现在又有了新的需求；首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很短的时间内完成，例如代谢组学分析；其次是在生化样品及天然产物样品的分析中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在与MS及MS/MS等检测技术联用时，对连接的质量提出了更高的要求。简而言之，我们需要“更快地得到更好的结果”UPLC超高效液相色谱提高色谱柱的效能就能增加仪器的解析度运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法小颗

2、粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力（比如6000psi/400bar）需要更小的系统体积（死体积）并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器UPLC色谱柱粒度1.7μm，传统5μm粒度UPLC色谱柱长50mm，传统150-250mmUPLC最佳流量0.2-0.5ml/min，传统0.8-1ml/min与传统的高效液相色谱（HPLC）相比，UPLC具有以下优势：1.高分离度（ultraresolution）2.高速度（ultraspeed）3.灵敏度（sensitivity）UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍使用更少的样品（

3、更适合含量低的样品，如药物代谢，激素等）检测时间短（更适合易降解的样品,如农药残留）消耗更少的溶剂分离效果更好（更适合复杂体系）新的自动进样器适合微量多孔板（方便蛋白多肽分析）安捷伦1260UPLC的优势UPLC应用质谱的应用色谱-质谱联用仪已经成为有机化合物常规检测中的必备工具，广泛应用于环保领域的有机污染物检测药物研究生产质控的进出口环节法庭科学中对燃烧爆炸现场调查，残留物检验石油化工食品安全(添加剂、塑化剂、农药、抗生素）竞技体育中兴奋剂检测Agilent6500系列精确质量四极杆-飞行时间串联质谱(Q-TOF)系统提供了您所需要的轮廓谱分析、鉴定、

4、表征，对定量低分子量化合物和生物分子更具信心。Q-TOF系统尤其擅长MS和MS/MS分析，对蛋白质、代谢物、杂质检测），不用牺牲图谱采集速率而获得高分辨率。飞行时间质谱技术（TOF-MS）是一种新型质谱技术,具有质量范围宽、分辨率和质量测量精度较高、灵敏度高、分析速度快的特点（1）气化的离子，在电场的作用下经过传输毛细管（同时隔离外部常压与质谱内部高真空），进入skimmer，再到八极杆透镜（离子光学组件，聚焦作用，进一步去除溶剂和中性分子）。（2）然后到四级杆，质量过滤器，选择某些离子通过或全部通过。离子在碰撞池裂解，六级杆捕获碎片。随机运动离子经过be

5、amshaper，再用pulsar形成脉冲离子流。（因为TOF是脉冲型的，而电喷雾的离子流是连续的，所以要给一个脉冲电压）（3）脉冲离子在飞行管内纵向飞行，经反射后到达多通道板检测器。板上，不同的位置接收不同m/z的离子（相同的电势能转化为动能，zV=1/2mv2，质量越大，速度越慢,强度与离子的浓度有关)。MS在药物领域的主要应用为药物的定性鉴别、定量分析、结构解析和药物代谢分析。MS/MS在药物领域有很多应用。子离子扫描可获得药物主要成分，杂质和其他物质的母离子的定性信息，有助于未知物的鉴别，也可用于肽和蛋白质氨基酸序列的鉴别。举例1，未知化合物的结构

6、鉴定高分辨质谱给出精确分子量（小数点后4位）根据分子量自动计算分子式从数据库中搜索化合物名称和结构举例2，中药指纹图谱中药复杂体系，多组分研究皂苷等类型无紫外吸收活性物质检测MS检测器灵敏度更高无标准品时，各组分的结构鉴定应用于药材的鉴别，中药提取物和有效部位质量控制，中药复方的质量控制等人参附子药总离子流图举例3，药物代谢研究由于血液样品试样提供量少，基质复杂，在此混合物中分析某种微量成分(通常为(g/mL或ng/mL水平)并加以鉴别，常常是对分析化学家的挑战样品药物代谢产物复杂人参皂苷的代谢物研究举例4，人体代谢物指纹图谱血清蛋白质分析，疾病的检测ES

7、I有利于疏水氨基酸残基的离子化，可鉴定多肽数目多，可检测分子量上限高，多肽质量误差低于基质辅助激光解析电离MALDI举例5，植物生理中蛋白组学的研究病原菌胁迫的植物蛋白质组学研究Chen等进行了水稻悬浮细胞表达抗病基因Xa21质膜蛋白质组分析，以鉴定参与抗水稻白叶枯病(X.oryzaepv.Oryzae)早期防御反应的质膜蛋白成分。质谱鉴定了11个预测在植物防御中起作用的蛋白质，有9个推定的质膜相关蛋白质，H+-ATPase、蛋白质磷酸化酶、过敏反应诱导蛋白(OsHIR1)、prohibitin(OsPHB2)、锌指蛋白(zincfinger)和C2结构域

8、蛋白、USP及热震惊蛋白。举例6，植物内源性激素的研究液相色谱-质