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时间:2019-07-15
《基因工程生物技术的安全性和伦理问题.》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、选修3现代生物科技专题专题1、4基因工程、生物技术的安全性和伦理问题一、基因工程1.DNA重组技术的基本工具(1)限制性核酸内切酶——“分子手术刀”1)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的______________断开。磷酸二酯键黏性平2)结果:形成末端或末端。(2)DNA连接酶——“分子缝合针”1)功能:将切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。(3)基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”能在宿主细胞中保存下来并大量⑥______1)条件有一个至多个⑦________________复制有特殊的遗传⑧___________,便于筛选2)
2、种类:⑨_____(常用)、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。T4DNAE·coliDNA限制酶切割位点标记基因质粒考点DNA重组技术的基本工具1.限制性核酸内切酶(1)来源:多数来自原核生物。(2)作用特点①主要切割外源DNA,而对自身的DNA不起作用,达到保护自身的目的。②专一性:只能识别DNA分子中特定的核苷酸序列,且只能在每一条链中特定的部位进行切割。①限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。②DNA连接酶起作用时不需要模板。(3)作用结果——形成DNA片段末端①黏性末端②平末端(4)作用实质:使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。2.D
3、NA连接酶(1)作用实质:恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,使两个DNA分子连接成一个DNA。(2)常用种类及作用①E·coliDNA连接酶来源:大肠杆菌作用:连接黏性末端来源:T4噬菌体②T4DNA连接酶作用:既能连接黏性末端,也能连接平末端,但后者连接效率低3.基因的运输工具——载体(1)作用①作为运载工具,将目的基因送入宿主细胞中。②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。(2)载体必须具备三个条件①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。②有多个限制酶切位点,以便与目的基因连接。③具有某些标记基因,以便进行筛选。(3)种类①细菌质粒:细菌拟核DNA以外的小型环状DNA。②λ噬菌
4、体的衍生物和某些病毒的DNA。几种酶的作用部位(1)作用于①部位的酶:限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、Taq酶(热稳定DNA聚合酶)。(2)作用于②部位的酶:DNA解旋酶。►考点对应练1.(2011年宁波统考)下列关于DNA连接酶和DNA聚合酶的叙述中,正确的是()AA.两者催化同一种化学键形成B.两者催化同一种化学键断裂C.两者都参与目的基因与载体的结合D.两者都参与遗传信息的表达解析:DNA连接酶和DNA聚合酶都作用于磷酸二酯键,前者是使DNA片段连接,后者是使单个核苷酸连接成DNA子链。2.基因工程的基本操作程序(1)⑩__________的获取:从基因文库中获取、利用PCR技术扩增
5、、人工合成(反转录法、化学合成法等)。目的基因人工合成法:若基因较小、核苷酸序列已知,可以人工合成。(2)基因表达载体的构建A.表达载体的组成:目的基因+________+终止子+标记基因。B.表达载体的功能①使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代。②使目的基因_______和发挥作用。C.启动子:位于基因的_____,它是___________识别和结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。D.终止子:位于基因的尾端,终止mRNA的转录。E.标记基因:鉴别受体细胞是否含有目的基因。启动子表达首端RNA聚合酶(3)将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法1)导入植物细胞:采用⑬________
6、_______、基因枪法、花粉管通道法等。显微注射技术2)导入动物细胞:主要采用⑭_____________。3)导入微生物:先用Ca2+处理再融合。①原核生物特点:繁殖快、多为_______、遗传物质少。②转化:用Ca2+处理细胞―→感受态细胞―→表达载体与感受态细胞混合―→促感受态细胞吸收DNA分子。单细胞3)抗原—抗体杂交:检测目的基因是否翻译成⑰________。4)对生物进行个体生物学水平的鉴定。蛋白质1.获取目的基因和切割载体时使用同一种限制酶,目的是__________________。产生相同的黏性末端2.获取一个目的基因需限制酶剪切___次,共产生___个黏性末端或平末端。两
7、4(4)目的基因的检测和鉴定目的基因1)分子杂交技术(DNA探针+转基因生物DNA):检测是否有⑮____________。2)分子杂交技术(DNA探针+转基因生物mRNA):检测目的基因是否⑯_______。转录考点基因工程的基本操作程序(2)获取方法1.目的基因的获取(1)目的基因:主要是编码蛋白质的结构基因(人类所需的)。①从自然界已有的物种中分离:从基因文库或cDNA文库中获取②人工合成:
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