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时间:2019-07-13
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1、免疫血液学----白细胞血小板输血前交叉配血试验一、人类白细胞抗原人类白细胞抗原代表个体特异性与移植排斥有关的抗原称为组织相容性抗原或移植抗原-MHS编码MHS的基因组称为主要组织相容性复合物(MHC)人类的MHC是首先在白细胞上发现的,称为人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen,HLA)HLA的研究历史最早发现人类白细胞抗原者为Dausset-1954年HLA不仅仅是白细胞特异性同种抗原。它是分布广泛的组织抗原。HLA的分型命名血清学分型命名具有临床意义的HLA基因有A、B、C、DR、DQ、DP等位点(Loci),每个位点又有若干等位基因,这些基因的产物便是HLA抗原。
2、临床意义比较大的HLA-A、B、C称为Ⅰ类抗原HLA-DR、DQ、DP称为Ⅱ类抗原。HLA的遗传单体型遗传存在基因重组多态性现象连锁不平衡HLA抗体及抗体检测临床上HLA抗体多由妊娠、输血或器官移植等免疫产生HLA在医学中的应用一、HLA与输血HLA与非溶血性输血反应HLA与血小板输注二、HLA与器官移植(一)肾移植(二)骨髓移植三、HLA与亲子鉴定二、血小板血型一类是与其他细胞表面或组织共有的抗原,称血小板相关抗原另一类为血小板特异性抗原血小板血型相关抗原:主要与红细胞的ABO血型系统以及人类白细胞抗原(HLA)有关特异性抗原:由血小板特有的抗原决定簇组成,表现出血小板独特的遗传多态性,在
3、其他细胞和组织上不能发现血小板血型血小板表面存在红细胞ABO系统的A抗原和B抗原,可能是从血浆中吸附上的。是否还存在其他红细胞血型抗原尚在探讨之中在我国,通常进行ABO同型血小板输血配合性血小板输注ABO同型血小板抗体的筛选交叉配合试验:确保供受体的血小板型和HLA型的配合血小板血型血小板特异性抗原具有独特的型特异性,并构成血小板膜结构中的一部分血小板特异性抗原有6个血型系统24个抗原,正式命名为HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-4、HPA-5、HPA-15血小板血型的临床意义一.血小板输注无效性(PTR)二.输血后紫癜(PTP)三.新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(NAITP)四
4、.血小板的自身免疫作用---特发性血小板减少性紫癜(简称ITP)血小板同种抗体与输血1.ABO血型的选择一般需要做主侧或次侧的交叉配血,最好输注ABO血型配合的血小板2.Rh血型的选择D阴性的患者,最好要避免用D阳性献血者的浓缩血小板。对育龄妇女可以注射Rh免疫球蛋白三、输血前免疫血液学检查目的:供者与患者的血液安全有效相容输血前免疫血液学检查内容:患者的病史、标本的核对及处理供受双方ABO、Rh血型鉴定不规则抗体的筛选和鉴定交叉配血试验报告和发血标本一、标本采集二、红细胞悬液的配制三、标本的保存标本一、标本采集1.红细胞标本-ACD或CPD、(Na2-EDTA)抗凝静脉血少数患者有一种自身
5、抗体--不宜用抗凝血液作为红细胞抗原标本2.血清标本一般实验避免使用血浆配血试验用血清——不超过72小时二、红细胞悬液的配制1、红细胞悬液常用浓度有2%、5%和10%2、2%的悬液一般用于滴定抗体效价,5%的悬液常用于血型鉴定和交叉配血试验,10%的悬液则用于测定抗体的亲合力。三、标本的保存1.血清标本不稀释的血清标本如加有防腐剂可在4℃保存数月,在一20℃以下可保存数年如用生理盐水稀释的血清只限当天使用2.红细胞标本一般试验用的凝血标本要在5天之内使用,以不溶血为准。如用保存液可保存3周用盐水配制的红细胞悬液只能在当天使用供受双方ABO、Rh血型鉴定ABO血型正反定型Rh血型鉴定}试管法抗
6、A、抗B以外的所有抗体统称为不规则抗体。常见于多次输血的人群不规则抗体的筛选和鉴定不规则抗体的筛选和鉴定患者血清+试剂筛选红细胞盐水介质聚凝胺介质抗人球蛋白介质交叉配血试验受者血清+供者红细胞受者红细胞+供者血清方法主侧次侧盐水介质聚凝胺介质抗人球蛋白介质(1)低离子聚凝胺交叉配血技术原理:聚凝胺(Polybrene),一种高价阳离子季胺盐多聚物,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果使抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集,则凝集不可逆。1红细胞间有一定间距2加入聚凝胺后,可以缩短红细胞之间的距离,使其非特异性凝集3加入枸
7、橼酸钠,可以中和聚凝胺4红细胞的非特异性凝集消失聚凝胺交叉配血技术示意图1聚凝胺枸橼酸钠1红细胞上已有不完全抗体致敏2加入聚凝胺后,缩短红细胞之间的距离,让不完全抗体可以同时与两个红细胞结合使其特异性凝集3加入枸橼酸钠中和聚凝胺4由于不完全抗体的结合,红细胞的特异性凝集不消失聚凝胺交叉配血技术示意图2聚凝胺枸橼酸钠不完全抗体试验分步原理血清红细胞悬液加入LIM混合液Polybrene受体血型抗原IgG抗体迅速
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