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时间:2019-07-13
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1、中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法一、通用显色剂(1)硫酸①浓硫酸与甲醇等体积小心混合,冷却;②15%浓硫酸的正丁醇溶液;③5%浓硫酸的乙酸酐溶液;④5%浓硫酸的乙醇溶液;⑤浓硫酸与乙酸等体积混合。用以上任一试液喷薄层板后,于110℃烘烤15min,不同类的成分显不同颜色。(2)碘①0.5%碘的氯仿溶液;②碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶,使缸为碘蒸气饱和。将薄层板放入缸内数分钟即可显色,碘对很多化合物显黄棕色。(3)高锰酸钾-硫酸高锰酸钾0.5g溶于15ml40%硫酸中。检测易还原性
2、物质。(4)铬酸-硫酸重铬酸钾5g溶于100ml40%硫酸中。易还原性物质显色。(5)荧光显色液①0.25%的罗丹明B乙醇溶液;②0.01%的荧光素乙醇溶液;③0.1%的桑色素乙醇溶液。用以上任一试液喷薄层板后,在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。二、专属性显色剂(一)生物碱及含氮类化合物(1)改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂①碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸与40ml水中;②碘化钾0.8g溶于20ml水中。试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。用前将1ml贮备液、2m
3、l冰醋酸与10ml水混合。用于生物碱与某些含氮化合物,显橙红色。(2)碘-碘化钾(Wagner)碘1g与碘化钾10g溶于50ml水(微温),加2ml乙酸,加水至100ml。用于生物碱,显棕褐色。(3)碘铂酸5ml15%氯化铂溶液加45ml10%碘化钾溶液,用水稀释至100ml。用于生物碱,不同生物碱显不同颜色。(4)碘铂酸钾10%六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合,加100ml6%碘化钾溶液,混匀。新鲜配制。用于生物碱与其他有机含氮化合物,不同生物碱显不同颜色。(5)Ehrlich①10%对二甲
4、氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合。②对二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml96%乙醇中。用于吲哚类,有时喷后要加热。(6)硫酸高铈铵1%本品的85%磷酸溶液。用于吲哚类,长春花生物碱显各种颜色。(7)对二甲氨基苯甲醛-硫酸65ml浓硫酸与35ml水混合,放冷后加对二甲氨基苯甲醛125mg,再加入5%三氯化铁溶液0.05ml。本试液可保存一周。用于麦角生物碱。(8)肉桂醛-盐酸肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml36%盐酸混合,新鲜配制。用于吲哚类衍生物。(9)呫吨氢醇0.1g本品溶于90ml乙醇
5、中,加10ml36%的盐酸,用前新鲜配制。用于色氨酸及其他吲哚类生物碱。(10)氯化铁-过氯酸0.5mol/L三氯化铁溶液1ml与35%过氯酸溶液50ml混合。用于吲哚类生物碱。(11)三氯化铁-碘三氯化铁5g、碘2g溶于50ml丙酮与50ml20%酒石酸的混合液中。用于黄嘌呤生物碱类,不同生物碱显不同颜色。(12)硫酸铈-硫酸(改良Sonnenschein试剂)硫酸铈0.1g混悬于4ml水中,加1g三氯乙酸,加热煮沸,放冷,逐滴加入浓硫酸直至浑浊消失。用于生物碱、含碘有机化合物的显色,喷后11
6、0℃烤几分钟,不同生物碱显不同颜色。(13)硫氰酸钴(Ⅱ)试液硫氰酸铵3g、氯化钴1g溶于20ml水中。用于生物碱,伯、仲、叔胺类。(14)碘化汞钾(Meyer)试剂1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中,混合后加水稀释至100ml即可。(15)硅钨酸(Bertrand)试剂5g硅钨酸溶于100ml水中,加盐酸少量调至pH=2左右。(16)苦味酸试剂1g苦味酸溶于100ml水中。(17)鞣酸试剂鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml。(18)4-甲基伞形酮0.02g本品溶于35ml乙
7、醇,加水至100ml。用于含氮杂环化合物。(19)硫酸铜-联苯胺①0.3g硫酸铜溶于100ml水-乙醇(5:4)的混合液中;②0.1%联苯胺的50%乙醇溶液。用时先喷试液①,于60℃干燥后再喷试液②。用于吡啶单羧酸的显色。(20)氯化铜0.5%氯化铜溶液。用于肟类。(21)硝普钠-铁氰化物10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液和水按(1:1:1:3)混合,冰箱内保存(可保存数周),使用前取适量与等体积丙酮混合。用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的显色。(22)硝普
8、钠-过氧化氢5%硝普钠溶液2ml、10%氢氧化钠1ml与5ml3%过氧化氢溶液混合后,加15ml水。冰箱可保存数日。用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的检测。(23)三氯化锑试剂25g三氯化锑溶于75g氯仿中成饱和溶液。用于秋水仙生物碱类。(二)黄酮类黄酮类化合物在紫外灯或日光下多显不同颜色,用氨薰、喷三氯化铝或氢氧化钠溶液等皆会使颜色加深或变色。(1)三氯化铝-乙醇试液三氯化铝1g,加100ml乙醇溶解,即得。用于含氧杂环化合物。(2)氢氧化钾(钠)试剂10%氢氧化钾或氢氧化钠水溶液。
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