机能学设计性实验苦瓜提取物对高血糖家兔的影响

机能学设计性实验苦瓜提取物对高血糖家兔的影响

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1、苦瓜提取物对高血糖家兔的影响机能学设计性实验实验目的学习设计实验的基本方法学习给家兔灌胃给药的方法及一些基本的实验操作了解糖尿病的危害、致病因素及治疗方法糖尿病(diabetes)是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征。实验原理苦瓜含有多种降糖成分,主要有甾苷、皂甙、脑苷、生物碱及多肽类物质等。降糖机制抗自由基作用类胰岛素作用刺激B细胞分泌胰岛素修复受损B细胞,改善其功能影响葡萄糖代谢酶实验动物家兔,雌雄各半,体重2.0±

2、0.2kg,50只(已制成Ⅱ型糖尿病模型,选血糖值≥11.1mmol·L的动物作为高血糖模型),同期饲养的健康家兔10只,雌雄各半,遵义医学院动物实验中心提供。主要仪器及主要试剂、药品兔灌胃器、离心机、兔实验台、722型分光光度仪、D-101大孔吸附树脂柱等。 葡萄糖酶酚混合试剂、格列本脲、新鲜苦瓜、70%乙醇、90%乙醇等。(一)、动物模型的制备取质量(2.0±0.2)kg的健康家兔50只,正常饲料喂养1周后,耳静脉注射四氧嘧啶120mg·kg~,72h后耳后静脉取血(取血前禁食8h),测空腹血糖,选血糖值≥11.1mmol·L叫的动物作为高血糖模型。实验方案

3、(二)、家兔经口灌胃给药方法把实验兔放在实验台上,用左手掌从头部握住兔头颈部,将其固定,用拇指和食指使劲压迫其口角部使口张开。然后,右手持抽好药液的灌胃器,用有弧度灌面从右口角处慢慢插入。乙醇洗脱液滤液捣碎,用70%乙醇回流提取3次脱色,滤过,滤液减压浓缩,得苦瓜提取物D-101大孔吸附树脂柱,用水洗至无色,然后用90%乙醇洗脱苦瓜提取物苦瓜苦瓜提取物的提取过程高血糖模型家兔50只家兔10只不做处理空白对照组10只大剂量组10只中剂量组10只小剂量组10只格列本脲组10只给药前、给药后1h、2h、3h、4h、5h采集血液样本{高血糖模型家兔50只家兔10只高血糖模

4、型家兔50只家兔10只不做处理高血糖模型家兔50只家兔10只空白对照组10只不做处理高血糖模型家兔50只家兔10只大剂量组10只空白对照组10只不做处理高血糖模型家兔50只家兔10只中剂量组10只大剂量组10只空白对照组10只不做处理高血糖模型家兔50只家兔10只小剂量组10只中剂量组10只大剂量组10只空白对照组10只不做处理高血糖模型家兔50只家兔10只生理盐水10ml/kg灌胃给提取液300mg/kg灌胃给提取液150mg/kg灌胃给提取液75mg/kg灌胃给格列本脲75mg/kg测定各管的吸光度A波长为:520nm试剂与标本混匀后,在37℃水浴箱内静置10

5、min酶酚混合试剂3ml,加血清0.02ml离心2000转/5min血液样本血清血糖浓度=A标本/A标准×标准液浓度(标准液为5mmol/L)记录血糖值组别血糖值(mmol/L)给药前1h末2h末3h末4h末5h末空白对照组苦瓜小剂量组苦瓜中剂量组苦瓜大剂量组格列本脲组正常家兔组各组血糖浓度值根据实验结果可预测以下结论:1、小剂量苦瓜提取液与优降糖比较,有降血糖效果。2、苦瓜提取液随着剂量的增加降血糖效果更加明显。数据处理方法以血糖浓度为统计量,结果采用SPSS统计软件进行组间χ2检验。讨论为什么选择苦瓜作为研究对象?为什么要选用家兔作为实验动物?Thankyou

6、!

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