《组培实验课件修改》PPT课件

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1、石河子大学实验课程教学大纲生命科学学院组织培养实验室撰写人签名:陈芳课程名称：植物组织培养技术英文名称：PlantTissueCultureTechnology课程总学时36学时　实验总学时20学时　开设实验项目数5个本大纲属1.统编2.自编3.借用实验教材或指导书;1.统编2.自编实验者类别:1.本科2.专科3.研究生4.进修生5.其它课程类型;1.独立设课2.非独立设课实验考试考核方式：操作实验成绩占课程成绩比例：50%面向专业;生物科学、生物技术开出实验项目名称、实验类型及学时1.植物组织培养实验室的基本设备和一般技术（综合性）4学时2.

2、植物组织培养培养基的制备（综合性）　　4学时3.外植体无菌系的建立（综合性）　　　　　4学时4.植物材料初代培养与继代培养及培养物的观察与统计（综合性）　　　　　　　　　　　　　　　　4学时5.试管苗的生根，移栽及苗期管理（综合性）　4学时实验一.植物组织培养实验室的基本设备和一般技术实验的目的：了解植物组织培养实验室的设置及基本设备，学习基本仪器设备的使用原理与方法，掌握植物组织培养的基本技术。实验的内容：一、组培实验室的设置二、组培实验室基本设备三、必要的器皿四、植物组织培养的基本技术1.洗涤技术2.灭菌技术一、组培实验室的设置1.1基本实

3、验室包括准备室、接种室和培养室，是组织培养实验所必须具备的基本条件。1.1.1准备室其功能是进行一切与实验有关的准备工作。主要包括器具的洗涤、干燥和保存；药品的称量、溶解、配制；培养基的分装、包扎和灭菌；植物材料的预处理等。1.1.2接种室其功能是进行材料的离体无菌操作。主要包括植物材料的接种、培养物的转移、试管苗的继代等。1.1.3培养室其功能是对离体材料进行控制条件下的培养。换句话就是人工条件下培养接种物及试管苗的场所.1.2辅助实验室辅助实验室是根据研究或生产的需要而配套设置的专门实验室，主要用于细胞学观察和生理生化分析等。1.2.1细胞

4、学实验室其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。细胞学实验室由制片室和显微观察室组成。制片是获取显微观察数据的基础，制片室一般配备有切片机、磨刀机、温箱以及样品处理和切片染色的设备等，由于制片过程中所用药品常常是一些具有一定危害的苯、醛类物质，制片室应安装通风橱，并有相应的废液处理设施。显微观察室放置各种显微镜和图像拍摄、处理设备，便于对实验材料进行认真观察、分析和照相。因而要求房间清洁、明亮、干燥，防止潮湿和灰尘污染。1.2.2生化分析实验室在以培养细胞产物为主要目的的实验室中，应建立相应的分析化验实验室，以便于对培养物的有效成分随时进行取样

5、检查。对于一些大型的次生产物生产实验室，还应建立有效物质分离实验室。因此，生化分析实验室的规模和性质需根据整体研究或生产的需要而定。1.3实验室的布局植物组织培养实验室的布局是非常重要的，布局是否合理不仅影响到是否经济，更重要的是会影响到是否能满足实验要求。实验室布局应在实验室建筑设计时确定，其基本要求是：便于隔离，便于操作，便于灭菌和便于观察。为了满足这几个要求，实验室的布局可根据组织培养实验的操作程序安排实验室排列。接种室、培养室应放在与外界环境隔离的区域，使之能较长时间保持无菌状态，从而免除频繁消毒的麻烦。灭菌室应与接种室相邻，以便于将灭

6、菌后的培养基及用品直接放置于接种室，尽可能免除再污染。其他实验室的布局可根据条件，以方便实用为宜。1.4温室试管苗移栽必须要有温室，如用钢架、玻璃架制造温室成本太高，可用单坡塑料大棚代替，这种大棚在向阳面搭棚，其余三面打墙，以防风保温。成本仅相当与钢架玻璃温室的1/8-1/5.A准备室准备室要求宽敞明亮，以便于放置多个实验台和相关设备，便于多人同时工作。准备室要求通风条件好，便于气体交换，同时实验室地面应便于清洁，并应进行防滑处理。根据需要和条件，准备室可设计为分体式或通间式。一般用作研究性质的实验室，可设计成分体式，由分开的若干房间将准备室分

7、解为药品储藏室、培养基配制与洗涤室和灭菌室等。重点介绍几个内容：B.接种室接种室也叫无菌操作室，是进行试管苗接种继代的场所，是试管苗生产中最关键的地方，它关系到试管苗的污染率、接种工作效率等。设计技术要求：接种室宜小：密闭光滑，配置拉动门；接种室要求干爽，吊装紫外线灭菌灯，最好安装一小型空调；接种室应设有缓冲间，面积2m2为宜。C.培养室培养室大小依规模决定。培养架规格：培养架大多由金属制成，一般设５层，最低一层离地高100cm，其它每层间隔30cm左右，培养架即高2m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计，如采用40W日光灯，则长1.2

8、m左右，宽度一般为60cm。培养条件控制：1.温度：一般保持在20-27℃左右，由空调机调节。2.室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在70-80%为好