《生化分析仪资料》PPT课件

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1、生化分析仪原理根据反应方式一般分为液体和干式生化两种。所谓干式是把样品直接加到滤纸片上,以样品作溶剂,使反应片上试剂溶解,产生颜色变化,用反射光度计定量检测,进一步计算完成反应。此方法完全革除了液体试剂,故称干化学法。干片不仅包括试剂,也可由电极构成,所以此类分析仪也可以进行电解质测定。干片均为一次性使用,故成本较高,推广有一定难度。但在野战、急救、救灾方面优点明显。以下主要介绍现在普遍使用的液体式生化分析仪。电话:400-0538-600------反应方式分类生化分析仪原理比色分析的基本原理许多化学物质的溶液具有颜色(无色的化合物也可以加显色剂

2、经反应生成有色物质),当有色溶液的浓度改变时,颜色的深浅也随之改变,浓度愈大,颜色愈深。因此,可以用比较溶液颜色深浅的方法来测定有色溶液的浓度。这种方法叫做比色分析法。------比色法原理生化分析仪原理朗伯-比尔定律当一束单色光通过有色溶液时,入射光线的一部分被器皿反射回来,一部分被溶液吸收另一部分则透过溶液(如图所示)他们之间有以下关系:Io=Ia+Ir+It式中:Io---入射光强度Ia---吸收光强度Ir---反射光强度It---透过光强度------朗伯-比尔定律生化分析仪原理由于在实际测定时,所用的比色皿都是用同一材料规格的。反射光的强

3、度为一定值,不会引起测量误差,所以反射光的影响可以不加考虑。则上式可简化为:Io=Ia+It从上可知:当入射光强度Io为一定时,被吸收光强度It愈小。也就是说:光强度的减弱仅与有色溶液对光线的吸收有关。------朗伯-比尔定律生化分析仪原理实验证明:溶液的浓度C愈大,液层厚度L愈厚(即光线在溶液中所经过的路程愈长)则溶液对光线吸收的愈多。他们之间的关系有下式决定:A=KCL------朗伯-比尔定律生化分析仪原理A=KCL公式中的K称为吸光系数,它表示有色溶液在单位浓度和单位厚度时的吸光度。在入射光的波长、溶液种类和温度一定的条件下,K为定值。吸

4、光系数是有色化合物的重要特性之一,在比色分析中有着重要的意义。K值愈大,表示该物质对光的吸收能力愈强,浓度改变时引起吸光度的改变愈显著,因此比色测定时灵敏度愈高。------朗伯-比尔定律生化分析仪原理A=KCL朗伯-比尔定律即有色溶液对一定强度光的吸收程度,与液层厚度和溶液中有色物质浓度的乘积成正比。其中朗伯定律说明吸收光与厚度间的关系;比尔定律说明吸收光与浓度间的关系。------朗伯-比尔定律生化分析仪原理朗伯-比尔定律的应用假定有两种有色溶液,其中一种是已知浓度的标准溶液,另一种是待测溶液。根据公式:在标准溶液中:在待测溶液中:------

5、朗伯-比尔定律生化分析仪原理波长的选择:由于有色溶液对光的吸收具有选择性,因此进行比色测定时,测量不同的项目需要用到不同的波长。作为临床生化分析使用一般工作波长为340nm~800nm。------生化工作波长生化分析仪光路检测系统生化分析仪以紫外可见分光光度法为其中心和主要的检测手段,与一般分光光度计一样,其光路和检测系统由光源、单色器和检测系统组成。------检测系统生化分析仪光路检测系统光源(lightsource)一般为卤素钨丝灯(halogentungstenfilamentlamp),也有采用长寿命的氙灯(xelamp),要求在340

6、~800nm波长范围内能发射出稳定且较平坦光能。------检测系统生化分析仪光路检测系统单色器(monochromato)单色器是生化分析仪最为核心的部件,生化检验所需的不同波长的单色光都是由它产生。根据单色器内部分光元件不同一般分为:滤光片式和光栅式根据单色器内部分光结构的不同一般分为:前分光和后分光------检测系统生化分析仪光路检测系统干涉滤光片利用干涉原理只使特定光谱范围的光通过的光学薄膜。通常由多层薄膜构成。干涉滤光片种类繁多,用途不一,常见干涉滤光片分截止滤光片和带通滤光片两类。干涉:频率相同的两列波叠加,使某些区域的振动加强,某些

7、区域的振动减弱,并且振动加强和振动减弱的区域互相间隔,这种现象叫波的干涉。生化分析仪光路检测系统截止滤光片能把光谱范围分成两个区,一个区中的光不能通过(截止区),典型的截止滤光片有低通滤光片(只允许长波光通过)和高通滤光片(只允许短波光通过),他们均为多层介质膜,具有由高折射率层和低折射率层交替构成的周期性结构。截止滤光片------滤光片生化分析仪光路检测系统带通滤光片带通滤光片只允许较窄波长范围的光通过具体结构为:玻璃衬底上涂上一层半透明金属层,接着涂一层氟化镁隔层,再涂一层半透明金属层,两金属层构成了法布里-珀罗标准具的两块平行板。当两极的间

8、隔与波长同数量级时,透射光中不同波长的干涉高峰分得很开,利用别的吸收型滤光片可把不允许透过的光滤掉,从而得到窄带通的带通滤

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