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1、文献检索与利用综述作业生物技术1201于凤川1020512129检索课题名称：代谢工程改造酿酒酵母合成青蒿素一、检索目的：青蒿素（artemisine）是从中药黄花蒿中提取的有过氧基团的倍半萜内酯抗疟新药。被WTO批准为世界范围内治疗脑型疟疾和恶性疟疾的首选药物。但目前青蒿素的生物合成途径仍未清晰。二、文献检索范围及检索策略序号所检索数据库名称检索的数据库收录时间检索结果（篇）1中国期刊全文数据库（CNKI）1994-现在122中文科技期刊数据库（重庆维普）1989-现在123中国学位论文全文数据库（万方）1977-现在154Cali
2、s外文期刊网CCC-3检索词：中文：1、酵母2、青蒿素3、代谢4、生物合成5、基因工程6、中间体英文：1、Yeast 2、artemisinin3、metabolism 4、biosynthesis5、genetic engineering6、midbody检索式：中文：酵母*青蒿素*（生物合成+代谢）（基因工程菌+酵母）*青蒿素*中间体英文：（Yeast orgenetic engineering)andartemisinin三、检索结果1、篇名：酵母中青蒿素作用靶点的探索作者：黄倩;周兵;文献来源：清华大学学报(自然科学版),Jo
3、urnalofTsinghuaUniversity(ScienceandTechnology),编辑部邮箱2008年03期 摘要：为了验证前人提出的青蒿素在疟原虫中靶点蛋白的可信性并寻找其直接作用的靶点,用酵母作为模式生物,对候选靶点在酵母中的同源蛋白进行基因改造,研究其对青蒿素抑制作用的影响,并利用与琼脂糖偶联的二氢青蒿素(DHA)寻找与之特异性紧密结合的酵母蛋白。研究发现酵母中的同源蛋白似乎没有在青蒿素抑制中起关健作用;并且未找到能与DHA特异性紧密结合的酵母蛋白。结果表明:过去提出的青蒿素作用靶点可能不正确,并暗示青蒿素可能没
4、有特异专一的蛋白靶点或同时作用于多个靶点。2、篇名：青蒿素生物合成研究进展作者：静一;罗安才;文献来源：安徽农业科学,JournalofAnhuiAgriculturalSciences,编辑部邮箱2010年04期 摘要：综述了青蒿素生物合成途径及其关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶、法呢基焦磷酸合酶、紫穗槐-4,11-二烯合酶、紫穗槐-4,11-二烯P450单加氧酶。3、篇名：酵母代谢工程菌生产青蒿素中间体的研究作者：孔建强、王丽娜、朱平、程克棣、王伟 文献来源：2008全国药用真菌学术研讨会论文集摘要：青蒿素是重要的抗疟
5、药物,紫穗槐-4,11-二烯是其中间体。本论文构建了两种能生产紫穗槐-4,11-二烯的酿酒酵母工程菌:整合体型和质粒型.以朱栾倍半萜为标准品,对这两种酿酒酵母的代谢产物进行GC-MS检测,发现都能产生紫穗槐-4,11-二烯,而且整合体型酵母工程菌紫穗槐-4,11-二烯的产量要高于质粒型,达到117mg·L-1朱栾倍半萜当量。4、篇名：基因工程酵母全合成青蒿素的策略作者：曾丽香、冯丽玲、ZENGLi-xiang、FENGLi-ling 文献来源：中外医学研究 2010 08(14) 摘要：目的构建青蒿细胞色素P450单加氧酶(CYP71
6、AV1)和青蒿醛△11(13)双键还原酶(DBR2)基因酵母表达载体,为在微生物体内重建青蒿素合成途径打下基础.方法采用PCR扩增、片段连接表达载体、转化大肠杆菌、双酶切和序列分析鉴定重组子,并将CYP71AV1-DBR2双基因表达载体导入酵母菌中.结果分别获得1488bp的CYP71AV1基因和1246bp的DBR2基因,构建了重组子pESC-CYP-DBR2,测序结果与GenBank上已登录的相应基因序列吻合,将其导入酵母菌后,已检测到它们的表达.结论成功构建了青蒿素前体合成基因的酵母表达载体,为下一步培育青蒿素全合成酵母工程菌打
7、下了基础。5、篇名：紫穗槐-4,11-二烯合酶及其代谢工程研究进展作者：孔建强;黄勇;沈君豪;王伟;程克棣;朱平;文献来源：药学学报,ActaPharmaceuticaSinica,编辑部邮箱2009年12期 摘要：紫穗槐-4,11-二烯合酶催化FPP(farnesylpyrophosphate,法尼基焦磷酸)生成青蒿素前体紫穗槐-4,11-二烯,是青蒿素生物合成途径中的关键酶。本文对紫穗槐-4,11-二烯合酶的分子生物学和代谢工程研究进行了综述。紫穗槐-4,11-二烯合酶编码基因及其相关核酸序列已经得到了克隆。紫穗槐-4,11-二
8、烯合酶cDNA全长1641bp,编码546aa。紫穗槐-4,11-二烯合酶最适pH范围较宽,但需要二价金属离子作为辅酶才能发挥作用,其产物和底物的特异性不高。在紫穗槐-4,11-二烯合酶作用下,FPP首先进行的是1,6-
