小动物活体成像操作说明手册

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1、第七部分操作7.1准备程序图7.1麻醉准备程序在开始麻醉程序之前，做一些准备程序可以帮助实验顺利进行，请参看图7.11）请把不用的出气口用特制的黑色橡胶塞塞住。（PN10168）2）把锥形通气口的位置对准。3）在麻醉程序开始前对照图片确保出气支管位置正确。4）确认气体循环管没有打结阻塞和松动。5）确认蒸发器内有足够的乙氟醚（Isoflurane），如果需要注入请参看下一节。7.2蒸发器注入程序警告：不能在正在进行氧气供应时向蒸发器内灌注液体乙氟醚（Isoflurane）。注入前，关闭供应打开前面板上两个阀门开关

2、监视流量计。当流量球在指示管中的底部保持不动时说明已无气体流动，此时可以进行注入。警告：只有当蒸发器控制旋钮处于关的位置才可以进行注入，在注入过程中不能打开任何氧气供应。警告：只能使用乙氟醚（Isoflurane）不要使用其它麻醉气体，使用其它麻醉剂可能会导致危险。警告：在处理剩余的麻醉剂时实验室要具备良好的通风条件，建议遵照已公布的安全条例进行操作，当丢弃剩余的乙氟醚（Isoflurane）时使用蒸发器使用手册上推荐的合适的化学容器。警告：使用时XGI－8麻醉系统要保持直立状态。蒸发器注入步骤1）如图7.2所

3、示，确保氧气供应被切断，可以在源头或减压阀处关掉它。2）如图7.3所示，确保蒸发器开关处于关的位置。3）打开两个前面板的阀门开关释放XGI－8的氧气，如图7.4所示可以看到阀门处于打开位置，流量计指示氧气已放完后，关闭这两个阀门开关。4）反时针旋转卸掉蒸发器的螺丝帽（如图7.5）。确认试剂是乙氟醚（Isoflurane），缓慢的倒进灌入口，透过玻璃指示窗随时观察乙氟醚（Isoflurane）的水平线，注意不要超过最大允许线。如图7.6所示。5）注意：如果蒸发器在灌注前是干的，水平线在开始会轻微下落因为内部的棉芯

4、会吸收一部分试剂。6）当乙氟醚（Isoflurane）达到玻璃指示窗上的最大标线时，表明蒸发器已灌注满。此时应停止，不要过分灌注。顺时针旋紧螺丝帽。为防止泄漏，请仔细检查螺丝帽已旋紧。图7.2氧气阀图7.3蒸发器置于OFF图7.4氧气压力计，前面板开关ON图7.5拧下蒸发器螺母图7.6监视最大刻度线7.3设备操作步骤一在开始程序前分别称量两个乙氟醚（Isoflurane）活性炭过滤器（如图7.7），在过滤罐上用不可擦除的标记记录这些信息和日期。图7.7图7.8步骤1－称量过滤器步骤2－打开排气泵步骤二打开前面板

5、上的排气泵的电子开关（如图7.8）确认流速超过每分钟6公升（LPM）。步骤三打开高压氧气罐或其它供应源确保氧气供应（如图7.9）注意：推荐的氧气压力是每平方英寸55磅（或每平方英寸35－65磅之间的任意值，请根据需要选择）。图7.9图7.10步骤3－打开氧气供应打开成像暗箱的气体开关步骤四打开IVIS系统成像暗箱的气体开关（如图7.10，在暗箱右侧）步骤五打开XGI-8前面板上的绿色氧气开关。（如图7.11）图7.11图7.12步骤5－打开XGI-8氧气开关步骤6－把蒸发器旋钮设置到0％步骤六把蒸发器旋钮设置到

6、0％（如图7.12）步骤七打开前面板上标记着“IVISFlowon/off”的开关（麻醉气体流向IVIS分支管，如图7.13）使用流量计设置流速。注意：使用能使动物处于麻醉状态的最低量麻醉即可，最初建议如需麻醉5只成年鼠使用0.25公升每分钟的流量。图7.13图7.14步骤7－打开“IVISFlow”步骤8－打开流向感应箱的开关步骤八打开标记着“CHAMBEROn/off”的开关（麻醉气体流向感应箱），如图7.14所示。设置感应箱流量计的流速为1.5公升每分钟。步骤九确认“IVISMANIFOLD”的流速，可以

7、根据需要进行调整。步骤十关上“IVISMANIFOLD”和“INDUCTIONCHAMBER”的开关。不要再调整流速计了。步骤十一合理设置蒸发器的百分比，典型值是百分之2.5（如图7.15），可以根据需要进行调整。图7.15图7.16步骤11－设置蒸发器的百分比步骤12－把动物放入感应箱步骤十二把动物放置在感应箱内（如图7.16），关上并锁紧箱子。步骤十三打开“INDUCTIONCHAMBER”开关，注意，第一次运行的时间是最长的因为要把感应箱和管子充满试剂。步骤十四打开“IVISMANIFOLD”开关，等一段

8、时间（通常是二分钟到五分钟之间），麻醉气体到达分支管的锥形鼻塞处，然后把动物从感应箱中拿出来。步骤十五在把动物从感应箱拿出之前要关掉“CHAMBEROn/off”开关。步骤十六快速的把动物拿出来放在锥形鼻塞处（如图7.17）。如果先前没把多余不用的分支管堵住，此时用特制的黑色橡胶塞塞住（型号是PN10168）。图7.17图7.18步骤16－将需要麻醉的动物放置好蒸发器置于OFF步骤十七