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时间:2019-07-05
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1、实验5小麦萌发前后淀粉酶活力的比较一、实验目的学习分光光度计的原理和使用方法学习测定淀粉酶活力的方法了解小麦萌发前后淀粉酶活力的比较二、实验原理淀粉是植物最主要的贮藏多糖,也是人和动物的重要食物和发酵工业的基本原料。淀粉经淀粉酶作用后生成麦芽糖、葡萄糖等小分子物质而被机体利用。淀粉酶主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶两种。α-淀粉酶可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。β-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水解,每次水解下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶(啤酒发酵前期工艺)。淀粉在体外或体内(细胞外)
2、的降解:水解的键作用方式产物α-淀粉酶α-1,4糖苷键任何位置麦芽糖和葡萄糖及小分子量多糖β-淀粉酶α-1,4糖苷键非还原性单位麦芽糖连续单位极限糊精α-1,6糖苷键酶水解支链淀粉中支链淀粉的糊精和麦芽糖的(如植物中的R酶和α-1,6糖苷键分支部位混合物小肠粘膜的α-糊精酶等)(只能从淀粉的非还原端开始水解)2(C6H10O5)n+nH2O——nC12H12O11淀粉酶催化产生的这些还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原,生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,后者可用分光光度计法测定。二、实验原理3,5-二硝基水杨酸3-氨基-5-硝基水杨酸休眠种子的淀粉酶活力很弱,种子吸胀萌动后,
3、酶活力逐渐增强,并随着发芽天数的增长而增加。本实验观察小麦种子萌发前后淀粉酶活力的变化。三、主要仪器设备离心机、离心管、研钵、电炉、恒温水浴、20mL具有塞子的刻度试管、试管架、移液管、分光光度计。分光光度计根据Lambert-beer定律:标准管:A=KCsL(下标S:标准液)待测管:Ax=KCxL(下标X:待测液)四、实验步骤酶液的提取酶活力的测定计算五、注意事项1、发芽后的酶液要稀释适量;2、4个管在25℃反应时间一定要保持一致。
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