干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响

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1、干旱胁迫对小麦幼苗生理生化指标的影响摘要：以小麦幼苗为试验材料，研究干旱胁迫对小麦生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶（PPO、POD）、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸（ASA）的含量的影响。试验结果表明：在干旱胁迫下除发芽率下降外，小麦幼苗的脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶（PPO、POD）、谷胱甘肽(GSH)的含量都比正常情况下小麦幼苗的含量多。关键词：干旱胁迫小麦幼苗生理生化指标引言：植物体生存在自然环境中，其水热条件随时都变化，对植物多少会产生一些影响。凡是对植物产生伤害的环境都被称为逆境，也称胁迫。干

2、旱也属于逆境，水分在植物的生命活动中占主导地位。大多数植物遭受干旱逆境后各个生理过程都会受到不同程度的影响。如生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶（PPO、POD）、谷胱甘肽(GSH)等发生变化。小麦的生长不仅受到自身遗传物质的控制，还受到众多环境因子的影响，如光、温、水和土壤营养物质等。世界上约有70%的小麦播种面积分布在干旱、半干旱农业区，干旱对小麦的生理、生化都产生重要的影响，进而影响小麦的生长发育、产量和品质。因此，为了减小环境对小麦生产的影响，有必要从小麦的各项生理生化指标含量的变化，来研究干旱胁迫对小麦的影响。本次实验是研究吸胀

3、12小时萌发一周后，干旱处理一周的小麦其生理生化指标脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶（PPO、POD）、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸（ASA）含量的变化。一、材料与方法1、材料及处理将吸胀12小时的小麦种子在有6层湿润滤纸的带盖白磁盘（24cmX16cm）培养基中生长7天，7天后将其中一部分幼苗干旱生长7天，7天后用相同的方法分别对实验组和对照组的小麦进行脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、抗氧化酶（PPO、POD）、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸（ASA）的含量的测定。2、测定方法[1](1)小麦种子发芽率的测定各取50粒吸胀的

4、小麦种子→沿胚的中心线切成两半（严格区分两个半粒），进行下列实验：其中50个半粒进行TTC染色（30℃水浴20min），另50个半粒进行曙红染色（室温染色10min）根据两种方法的染色情况，分别计算发芽率。(2)脯氨酸(Pro)含量的测定①脯氨酸(Pro)的提取：分别取0.1g实验组和对照组的胚芽鞘→加入3mL3%磺基水杨酸（SSA）和少许石英砂→充分研磨→用2mL3%SSA洗研钵→5000rpm离心10min→上清液定容至5mL。②脯氨酸(Pro)的测定：上清液各2mL→分别加入2mL冰乙酸和2mL茚三酮试剂→煮沸15min→冷却后→5000rpm离心10min（若没沉淀可略此步骤

5、）→分别测定A520,将测得的结果用公式Procontent=计算出正常和干旱生长小麦的胚芽鞘的脯氨酸含量。(3)丙二醛(MDA)含量的测定①丙二醛(MDA)的提取：分别取0.1g实验组和对照组→加入3mL10%TCA和少许石英砂→充分研磨→用2mL10%TCA洗研钵→5000rpm离心10min→上清液定容至5mL。②丙二醛(MDA)的测定：分别取上清液各2mL→加入0.6%TBA（用10%TCA配制）2mL→煮沸12min→冷却后→5000rpm离心5min→分别测定OD450和OD532将测得的OD450和OD532的数据带入下列公式OD450=C1x85.4OD532=C1x

6、7.4+C2X155000C1：可溶性糖的浓度，C2：MDA的浓度解方程计算出C1可溶性糖的浓度，C2MDA的浓度。(4)过氧化氢(H2O2)含量的测定①过氧化氢(H2O2)的提取：分别取0.1g实验组和对照组→加入3mL50mMPBS(pH=6.8，内含1mMHA)和少许石英砂→充分研磨→用2mLPBS洗研钵→5000rpm离心10min→上清液定容至5mL。②过氧化氢(H2O2)含量的测定：分别取上清液各3mL→加入0.1%Ti(SO4)2[用20%(v/v)H2SO4配制]1mL→摇匀→5000rpm离心10min→OD410将测得的OD410值带入下列公式H2O2conten

7、t=（mmol.g-1FW）计算出H2O2酶的含量。(5)抗氧化酶（PPO、POD）的测定①抗氧化酶（PPO、POD）的提取：分别取0.1g实验材料→加入少许石英砂和3ml提取液（50mmol/LPBS,pH6.0,内含0.１mmol/LEDTA,1%PVP）→充分研磨　→转入离心管中→用2ml提取液洗研钵→5000rpm离心10min→上清液定容至5ml→用于测定POD和PPO酶活性或分装后转至-20或-80℃保存。②POD测定：取POD反应混合液（10