PCR扩增与细胞内DNA半保留复制有何异同

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1、PCR扩增与细胞内DNA半保留复制有何异同有关PCRPCR是高温解旋体内用的是DNA解旋酶DNA复制是以自身为模板，边解旋，边复制，边折叠的。自身DNA复制有一个变构问题。PCR是一个一个核苷酸或脱氧核苷酸用酶接上去，再洗脱再接下一个的。形成的是单链，而且没有包裹的蛋白。PCR是一个体外过程，他们的酶不同，反应条件也不同，复制产物可以是双链，也可以是单链！！PCR是体外扩增DNA的过程~~所需温度较高,分三个阶段:高温解链,低温复性,中温合成,都在50度到95度之间.所需的酶不一样:PCR用耐热的TAQ酶.PCR扩增的是特定的序列~~位于两个引物之间的那一段DNA.另外,PCR

2、可以复制DNApcr全称聚合酶链式反应。其基本原理和生物复制一样，都要引物等。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNT

3、P为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。也可复制RNA呢单的说,PCR是将少量DNA在细胞外(首先要将DNA从细胞中取出)快速扩增的方法,能在数小时内将DNA扩增百万倍.样品的量即使非常少,也能被放大很多倍.DNA复制是在细胞内进行的.像细菌数小时DNA复制几次差不多了(复制时间同环境有关,比如有没有足够的养料).既然学的就是这个专业,看看专业

4、的涉及PCR的文章不就了解了,从概念上说PCR和生物自身的DNA复制的区别很简单,具体的细节就复杂了,PCR也不止一种PCR技术                                    DNA生物复制环境  体外复制，加热，90摄氏度左右     体内，温和的环境模板  DNA单链                           DNA单链原料  4种脱氧核糖核苷酸                4种脱氧核糖核苷酸酶   主要是DNA聚合酶                   DNA解旋酶，DNA聚合酶，DNA连接酶等各种酶引物  需要人工合成的引物     

5、            自己合成引物成分步骤 变性--退火--延伸                   解旋-起始-延伸-结束原则  碱基互补配对原则                  碱基互补配对原则PCR是DNA的体外扩增技术. DNA复制是有生命力的细胞在体内自我复制的过程,属于体内扩增.PCR(聚合酶链式反应)原理PCR是体外酶促合成特异DNA片段的方法，主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成：即在高温（95℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板；而后在低温（37～55℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结

6、合，形成部分双链；在Taq酶的最适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新链。这样，每一双链的DNA模板，经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。如此反复进行，每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍，PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增，经过25～30个循环后，理论上可使基因扩增109倍以上，实际上一般可达106～107倍。DNA复制过程: (一)复制的起始   1.螺旋的松弛与解链⑴拓扑异构酶---能改变DNA空间

7、构像的酶   作用：DNA复制时松弛超螺旋，以利复制叉的行进及DNA合成，合成后再引向超螺旋。功能：不清楚，可催化体外拓扑异构化反应，拓扑异构酶分两型。   拓扑异构酶I（topoisomerase--I）作用：松弛超螺旋，不需ATP,作用机制：切开环状一条链、打结与解结原核：拓扑异构酶I对负超螺旋作用>正超螺旋   真核：拓扑异构酶I对正、负超螺旋均有作用。   拓扑异构酶Ⅱ---旋转酶（gyrase）作用：松弛超螺旋，作用机制：切开环状两条链、打结与解结、环连与解环连   ⑵解链酶（he