《从DNA到RNA转录》PPT课件

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1、第三章从DNA到RNA---转录表达系统三种物质的基本功能DNA:贮存、传递RNA:贮存、传递、酶PRO:贮存、传递、酶RNA的转录1与RNA转录有关的概念2转录的基本过程3转录机器的主要成分和功能RNA的转录:transcription酶:转录是一种酶促的核苷酸聚合过程,所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP)编码链(有义链codingstrand):与mRNA序列相同的那条DNA链反义链(无意义链,负链,antisense):在RNA的转录中,用作模板的DNA链增强子:Enhencer启动子:Promoter终止子:Terminato

2、r转录单元:转录区:一、与RNA转录有关的概念上游:Upstream下游:Downstream初级转录本:Primarytranscript二、转录的基本过程模板识别:RNA聚合酶与启动子DNA作用并与之结合。在DNA上形成转录泡。通过启动子:转录起始后直到9个核苷酸短链的形成。转录延长:RNA聚合酶离开启动子,沿DNA链移动并产生新RNA链伸长。终止:不再形成磷酸二酯键,RNA-DNA分离,转录泡瓦解,DNA恢复双链。酶对启动子的识别是转录的第一步大肠杆菌启动子:在转录开始位置的上游10个和35个核苷酸位置有两段DNA的序列比较保守,分别称为-

3、10序列(-10sequence)和-35序列(-35sequence)。1、模板的识别-原核1.Pribnowbox(-10box)5’TATAAT3’2.–35box5’GACA3’……T85T83G81A61C69A52………T89A89T50A65A100…转录起始位点、-10区、-35区、-10区与-35区之间的间隔。原核基因转录起始位点通常是嘌呤,其序列为CAT(A为起始位点)。-10区是一个6碱基保守序列(常以-10为中心)。-35区是另一个6碱基保守序列(常以-35为中心)当-10区和-35区中心位置相距16-18bp时,该启动子

4、的功能较强;相距较近或较远时,起始转录的功能都相应减弱。……T85T83G81A61C69A52………T89A89T50A65A100…原核启动子四大要素全酶由5个亚基组成,去掉δ亚基的部分称为核心酶,核心酶本身就能催化苷酸间磷酸二酸键形成。利福平和利福霉素能结合在β亚基上而对此酶发生强烈的抑制作用。β亚基似乎是酶和核苷酸底物结合的部位。δ亚基的功能是辨认转录起始点的。β’亚基是酶与DNA模板结合的主要成分。α亚基可能与转录基因的类型和种类有关。大肠杆菌RNA聚合酶大肠杆菌RNA聚合酶亚单位 分子量 亚单位数 组分    功  能α365122核

5、心酶 决定哪种基因被转录核心酶组装β1506181核心酶  与转录全过程有关形成活性中心β1556131核心酶   结合DNA模板δ702631δ因子  识别不同的启动子启动子选择:RNA聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭复合物开放复合物形成:δ亚基与-10区紧密结合,确认转录起始点,DNA解链形成开放复合物开放复合物与最初的两个NTP结合并在这两个核甘酸之间形成磷酸二酯键后转变成包括RNA聚合酶、DNA、新生RNA的三元复合物8-14亚基种类 分布    合成的RNA类型 对α-鹅膏蕈碱的敏感性Ⅰ核仁rRNA不敏感Ⅱ核质hnRNA低浓度敏感Ⅲ核质

6、tRNA,5sRNA高浓度敏感Mt线粒体 单亚基,与T7类似不敏感Ct叶绿体 多亚基,与细菌类似   不敏感真核生物的RNA聚合酶模板的识别-真核顺式作用元件(cis-actingelement)-35区 5′-TATAHogness盒TATA盒-70~-80区CAAT盒-100区GC盒反式作用因子(trans-actingfactor)转录因子(TF)转录起始复合物TFⅡA、B、D、E、F起始前复合物(PIC)PIC转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生:酶与启动子结合后,并在RNA聚合酶(?)的催化下使DNA的双链解离,形成转录泡,为RN

7、A合成提供单链模板,并按碱基配对原则,结合核苷酸,在核苷酸之间形成磷酸二脂键(起始复合物)。转录起始后直到形成9个核苷酸短链,是通过启动子阶段,此时RNA聚合酶一直处于启动子区,新生的RNA链与DNA链的结合不够牢固,很容易从DNA链上掉下来并导致转录重新开始。一旦RNA酶成功地合成9个以上核苷酸并离开启动子区,转录就进入正常的延伸阶段。所以,通过启动子的时间代表一个启动子的强弱。一般来说,通过启动子的时间越短,该基因转录起始的频率也越高。当RNA链伸长到8~9个核酸后,δ亚基解离,起始完成,进入RNA的延伸阶段.2、转录的起始转录的延长阶段,原

8、核生物与真核生物之间没有太大差别。3、RNA链的延伸4、转录的终止不依赖于ρ因子的终止作用依赖于ρ因子的终止作用两类终止信号有共同的序列

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