201030承担单位：福建农科院农业生物资源研究所试验设计

《201030承担单位：福建农科院农业生物资源研究所试验设计》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2012-06-30承担单位：福建省农科院农业生物资源研究所试验设计：试验项目：武夷山土壤微生物的分离、纯化和保存（三）试验人员：黄丹丹试验负责：车建美、刘波报告日期：2012-06-30计数月份：2012年6月研究资格系数(0.5-1.0)实验设计系数（0.9-1.0）报告得分总分实验设计实验记载实验分析实验简报实验文章1-20%21-40%41-60%61-80%81-100%1%-5%设计不足，实施错误6%-10%设计不全，实验无果11%-15%设计可以，实施不全16%-20%设计完整，分布实施21%-25%实验不全，记载无果26%

2、-30%实验不足，记载不全31%-35%独立实验，记载不全36%-40%分布实验，记载完整41%-45%目的明确，实验完成46%-50%实验完整，记载清晰51%-55%实验系统，结果可信56%-60%实验创新，分析清晰61%-65%实验创新，结论清晰66%-70%实验完整，统计清晰71%-75%实验系统，数据可靠76%-80%报告完整，文章雏形81%-85%结构合理，分析有据86%-90%逻辑清晰，统计合理91%-95%图表完整，写作流畅96%-100%文献完整，发表水平福建省农业科学院农业生物资源研究所农业微生物研究中心电话:0591-

3、87882571,传真:0591-87882571fjat.yzxz.com1．试验目的土壤微生物是指生活在土壤中的细菌、真菌、放线菌、藻类的总称。土壤微生物大部分对作物生长发育是有益的，它们对土壤的形成发育、物质循环和肥力演变等均有重大影响。对作物来讲是影响其生长发育的重要环境条件之一。其中芽孢杆菌在土壤的多样性中占有较重要的地位。芽孢杆菌是土壤和植物微生态的优势微生物种群，是植物病害生防微生物的重要组成部分，由于其能产生抗逆性强的芽孢，对菌体的生存、剂型加工及其在环境中的存活和定殖都十分有利，因此它是一种理想的生防微生物，许多性状优良

4、的拮抗菌株已成功地应用于植物病害生物防治中。实验室分离采集来自福建省武夷山地区的土壤微生物群，筛选芽孢杆菌，一方面是为了建立武夷山地区的微生物库，另一方面分离芽孢杆菌也是为了能为以后的实验提供合适的菌株，为生防微生物的筛选提供丰富的种质资源。2.试验方法2.1材料表1采集土样的信息编号采集地点生境类型采集时间未编天游峰阶梯土2012-06-22未编天游峰下山路边2012-06-22未编天游峰树下2012-06-22未编中正公园石碑墙角2012-06-22未编挂敦路口2012-06-20Luria-Bertani培养基（LB）：酵母提取物5

5、.0g、NaCl5.0g、胰蛋白胨10.0g、琼脂15-20g、水1000mL。pH7.2-7.4。2.2仪器试管、锥形瓶150mL，移液枪，涂布棒，培养皿，振荡器，培养箱。2.3试验方法2.3.1土样处理取五种土样，分别加入装有90mL无菌水的锥形瓶内（150mL），加土样各10g。摇床震荡20min后水浴10min（80℃）。10-15min均可，中间震荡2-3次。2.3.2土壤原液的配置吸取1mL原液至装有9mL无菌水的试管，即配成10-2浓度，依次稀释配置成10-3，10-4；2.3.3平板涂布超净台上无菌操作，溶液在振荡器上振荡

6、10s，吸取100µl至相应浓度的平板上，溶液滴至平板中央，用涂布棒涂匀并静置1h，使溶液完全渗透进平板中。每个梯度重复2次；涂布梯度为10-3、10-4。2.3培养用袋子装好，30℃恒温箱培养1-2d。2.4计数统计平板上的菌落数，描述菌落形态、大小等，算出每一稀释度菌落的平均数。菌落数计算公式：每克土样中微生物的数量＝同一稀释度的菌落平均数×稀释倍数×100／含菌样品克数。2.5纯化菌株用平板划线法，用接种环在LB平板上挑取单菌落在新的平板上划线，划线后盖上培养皿盖，倒置温室培养，培养后重复多次直到认为菌落完全被纯化。2.6菌种保藏对

7、纯化菌种编号后拍照，保种。3．试验结果3.1土样分离从芽孢杆菌中分离的菌株的形态特征描述和数量见表2和纯化菌落图。表2从土样标本中分离的芽胞杆菌形态描述、编号及数量菌株分离源菌株编号大小表面颜色干湿形状高度透明度边缘菌落数(cfu/g)天游峰阶梯土16679大淡黄不光滑干不规则扁平不透明丝状1×10316680中黄色光滑湿近圆扁平不透明整齐5×10216681小乳白光滑湿圆隆起不透明整齐7.5×10316682大淡黄光滑无光泽湿圆扁平不透明锯齿状1×10316683中乳白光滑干近扇形扁平不透明褶皱5×10216684大淡黄偏白光滑无光泽湿

8、圆形微隆不透明整齐7×10316686大淡黄不光滑干不规则扁平不透明丝状2×10316687中中白，四周淡黄表面褶皱干圆形中部隆起不透明整齐5×102天游峰下山路边16694小白色粗糙湿圆形中