动物细胞工程复习课件1

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1、读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念2.1单克隆抗体的概念单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体制备原理：将单个B淋巴细胞和骨髓瘤细胞细胞融合成杂交瘤细胞分泌的设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞特异性抗体大量增殖B-B、B-瘤、瘤-瘤（未融合的B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。2.3单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛

2、应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？单克隆抗体！⑵用于治疗疾病和运载药物①特异性强、灵敏度高生物导弹——单克隆抗体＋抗癌药物②疗效高、毒副作用小结合同位素的单抗-----生物导弹结合同位素的单抗-----生物导弹单抗放射性同位素两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗

3、体特异性强、灵敏度高的优势本节小结重点(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。（2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是，其特点是_________________________________________。效应B抗原细胞融合聚乙

4、二醇灭活的病毒选择性3既能无限增殖又能产生特异性抗体杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。特异性强、灵敏度高有丝无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境15、（1）单克隆抗体是指。（2）制备单克隆抗体的步骤：①将__________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1

5、个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。②将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞在_________________的诱导下融合。③将诱导后产生的多种细胞，放在_______培养基的多孔培养板上培养，筛选。④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞_____________的能力，又具有________________的本领。⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。化学性质单一，特异性强的抗体抗原聚乙二醇选择性无限增殖产生专一抗体（3）大量制备单克隆抗体的方法主

6、要有两种：①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是。（4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_______细胞制备的，其化学本质是___________，应用于人体，会作为产生，解决这个问题的方法是_____________________________。大量生产选①，小规模生产选②效应B蛋白质异物免疫反应采用人的效应B细胞制备15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：　　（1）该方案能达到预期效果吗？。原

7、因是______________________________________________。　　（2）图中②为过程，常用作为诱导剂。该细胞继承了_____________________，因此不仅能分泌___________，还有本领。不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞细胞融合灭活病毒双亲细胞的遗传物质特异性抗体大量增殖制备单克隆抗体（3）该方案的目的是_________________________。阳性孔方法——抗原-抗体杂交法在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的原理和方法是不相同的。