人fgf-basic elisa试剂盒

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1、www.blkwsw.com人FGF-basic定量分析酶联免疫检测试剂盒本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的FGF-basic浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的帮助。如您有其它需求，请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。FGF-basic简介：碱性成纤维细胞生长因子也叫FGF-2，属于高度保守的分子量从16－34kDa的FGF家族，该家族蛋白都与基质中的肝素形成结合蛋白，以酪氨酸激酶途径调节细胞的活性。18kDa的FGF-2亚型从核内到胞质到胞外

2、都存在，21－23kDa的亚型只存在于核内。FGF-2缺少信号肽序列，所以必须通过内质网/高尔基体转运方式进行分泌，提示该蛋白分泌形式可能有几种不同形式。FGF-2是来源于中胚叶和神经胚层组织细胞的DNA合成的强烈刺激物。FGF-2调节如血管再生术、创伤治疗、组织修复、胚胎中心脏、脑和骨组织的发育和分化等。FGF-2的功能通过三个信号通路进行调控，第一是与有丝分裂原蛋白活性酶途径（MAPK），第二是磷酯酰3肌醇激酶途径，第三是蛋白激酶C途径(PKC)。FGF-2已被发现在不同细胞表面表达，这类细胞包括成纤维细胞、巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞及神经细胞等。检测原理:本试剂盒采用双

3、抗体夹心ELISA法检测样本中FGF-basic的浓度。FGF-basic捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的FGF-basic会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人FGF-basic抗体后，抗人FGF-basic抗体与FGF-basic接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在FGF-basic将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会

4、催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，FGF-basic浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中FGF-basic浓度。人定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分规格预包被板12条或6条样本分析缓冲液1瓶5ml/3ml标准品稀释液10ml/5ml标准品4支/2支(冻干)生物素化抗体1瓶10ml/5mlHRP连接的酶结合物1瓶10ml/5ml浓缩洗涤液20×30ml/瓶TMB底物1瓶10ml/5ml终止液1瓶5ml/3ml封板胶纸3/2张说明书1份标本收集:1.标本的收集请按下

5、列流程进行操作：A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测；D.标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。BeijingBLKWBiotechnologyCo.,Ltd.Tel:010-57158602/52872342blkwbio@blkwbio.comwww.blkwsw.com2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除；4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。注：正常人血清或血浆

6、样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。注意事项:1.试剂盒请保存在2～8℃。2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。3.若标准品复溶后，请在三天内用完。4.底物请勿接触氧化剂和金属。5.加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。8.室温反应，请严格控制在25～28℃。9.洗涤过程是至关重要的，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。10.试验中标准品和样本检测时建议作双复孔。11.加样过程中避免气泡的产生。12.血清和血浆标本的检测时，

7、检测抗体的孵育时间应适当延长。检测前准备工作:1.试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡20分钟；每次检测后剩余试剂请及时于2～8℃保存。2.将浓缩洗涤液用双蒸水或去离子水稀释(1份加19份水)。3.标准品:加入标准品稀释液0.2ml至冻干标准品瓶中使FGF-basic终浓度达到1000pg/ml，静置15分钟后轻轻混悬待彻底溶解，用标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。（标准曲线取七个点，最高浓度为1000pg/ml,标准品稀释液直接加入作为0浓度.）洗涤方法:自动洗板机或人工洗板：每孔洗